吉林大学生命科学学院生物药学系
- 作品数：15 被引量：81H指数：6
- 相关作者：年综潜王晓峰张扬更多>>
- 相关机构：长春中医学院药学院首都师范大学化学系北京林业大学生物科学与技术学院更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金吉林省科技厅科技发展计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学农业科学更多>>
- 丝瓜ACC合成酶的原核表达、分离纯化及性质鉴定被引量：7
- 2004年
- 将构建成功的丝瓜ACC合成酶cDNA的重组质粒,转化为大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后得到特异性高效表达,表达蛋白以包涵体形式存在.包涵体经洗涤和Zn2+螯合柱层析,得到纯化蛋白.SDS PAGE显示纯化蛋白分子量为55000的单一蛋白带.经活性分析,该酶最适pH值为8.5,米氏常数(Km)为44.2μmol/L.
- 高波曾庆银陆海付学奇
- 关键词：白带原核表达活性分析ACC合成酶丝瓜
- 前列舒通片对鼠的抗炎及镇痛作用被引量：3
- 2008年
- 目的:观察前列舒通片(QLS)对实验性动物一般炎症与镇痛模型的作用,为临床应用提供药效学依据。方法:大鼠和小鼠分别均按体重区组随机方法分为空白对照组(n=8)、阳性对照组(阿司匹林组,n=8)、低剂量组(小鼠:25 mg.kg-1.d-1,n=8;大鼠:17.5 mg.kg-1.d-1,n=8)、QLS中剂量组(小鼠:50 mg.kg-1.d-1,n=8;大鼠:35.0 mg.kg-1.d-1,n=8)、QLS高剂量组(小鼠:100 mg.kg-1.d-1,n=8;大鼠:70.0 mg.kg-1.d-1,n=8)。QLS各剂量组均连续灌胃给药3 d。采用二甲苯致小鼠耳肿胀、卵白蛋白致大鼠足肿胀和棉球肉芽肿观察其对炎症反应的影响,并采用小鼠热板法和腹腔注射0.6%醋酸扭体法观察其镇痛作用。结果:QLS 3个剂量组均不同程度地抑制小鼠耳肿胀度,与空白对照组比较,50及100 mg.kg-1.d-1QLS组小鼠耳肿胀度均明显减小(P<0.05或P<0.01),对小鼠耳肿胀的抑制率分别为53.97%和60.09%;QLS 35.0及70.0 mg.kg-1.d-1组均显著抑制大鼠足肿胀(P<0.05),且对棉球所致肉芽组织增生有明显的抑制作用(P<0.05或P<0.01),大鼠肉芽肿的抑制率分别为32.40%和35.65%。与空白对照组比较,QLS 25、50及100 mg.kg-1.d-1组分别在给药后90、90及30 min均明显提高热板法小鼠的痛阈值(P<0.05或P<0.01),且可明显减少小鼠的扭体次数(P<0.05),对小鼠痛阈抑制率分别为36.17%、44.13%和46.64%。结论:QLS具有明显的抗炎和镇痛作用。
- 林天慕李红管清香杨世杰王恩思
- 关键词：抗炎作用镇痛作用药效学
- 应用pCYB1载体表达胰高血糖素
- 2002年
- 目的 研制基因工程胰高血糖素。方法 利用pCYB1表达载体,亚克隆胰高血糖素基因后转化于BL21（DE3）菌种,并对阳性克隆的质粒进行DNA测序。检测不同条件下,IPTG诱导胰高血糖素-intein-几丁质结合结构域（CBD）组成的融合蛋白表达量,确定工程菌表达最适条件。利用几丁质结合柱进行亲和层析,在DTT作用下由intein在柱上进行自我切割,纯化胰高血糖素。SDS-PAGE检测融合蛋白表达量,SDS-PAGE在Tris-Tricine缓冲系统中电泳检测纯度,Lowry法检测蛋白质含量,Western blot检测免疫原性,升血糖实验检测活性并进行 N-末端测序。结果DNA测序显示表达产物基因序列正确,纯化胰高血糖素具有免疫原性和生物学活性,N-端15个氨基酸与天然产品相同,电泳呈单一谱带,产率为1.25mg/L。结论 获得分泌胰高血糖素基因工程菌,适于快速大规模生产。
- 母敬郁母凯平杨翰仪相世和潘风香王峤陈岚李俐VettaiAnanthanarayanan
- 关键词：胰高血糖素
- 黄连解毒汤对高脂血症大鼠血脂代谢及其相关基因表达的影响被引量：15
- 2010年
- 目的:观察黄连解毒汤对高脂血症大鼠血脂代谢及其相关基因表达的影响。方法:将50只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、立普妥(阿托伐他汀)组和低、高剂量黄连解毒汤组。除正常对照组外,其他组大鼠喂饲高脂饲料建立高脂血症大鼠模型。连续给药8周后,检测血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triacylglycerol,TAG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein choles-terol,LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)水平,并检测各组大鼠肝脏脂蛋白脂酶(lipoproteinlipase,LPL)和肝脂酶(hepatic lipase,HL)活性;利用逆转录聚合酶链反应技术检测各组大鼠肝脏组织低密度脂蛋白受体(low-density lipoprotein receptor,LDLR)和过氧化物体增殖物活化受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)mRNA的表达水平。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠血清TC、TAG和LDL-C水平显著升高,HDL-C水平显著降低;肝脏LPL、HL活性和LDLR、PPARγmRNA表达水平明显下降。黄连解毒汤组血脂水平均较模型组有不同程度的改善,肝脏LPL、HL活性和LDLR、PPARγmRNA表达水平明显升高。结论:黄连解毒汤可能是通过提高肝脏脂代谢酶的活性,促进肝脏LDLR和PPARγmRNA的表达来调节脂质代谢紊乱的。
- 金瑾张扬胡文祥张郑瑶徐楠楠周秋丽
- 关键词：高脂血症低密度脂蛋白受体
- 人干扰素基因植物表达载体的构建及其在人参愈伤组织细胞中的表达被引量：9
- 2006年
- 目的:利用组织培养人参愈伤组织细胞表达人干扰素,探讨用植物细胞表达人类基因的可行性。方法:用PCR从pBV889扩增人干扰素α2b(hIFN-α2b)编码基因,将其克隆于pMD18-T载体和pBI121,进而构建植物细胞表达载体pBIFN。用冻融法将pBIFN导入根瘤农杆菌LBA4404,经卡那霉素和利福霉素筛选后利用农杆菌介导的转化法将hIFN-α2基因导入人参愈伤组织细胞。经G418筛选,形成阳性细胞。用PCR、RT-PCR、Western blot和WISH/VSV系统检测转基因组织。结果:经PCR检测表明hIFN-α2b基因已成功整合到人参愈伤组织细胞基因组中。RT-PCR证明存在hIFN-α2b基因的转录产物。Western blot分析表明转基因人参愈伤组织细胞能有效表达hIFN-α2b蛋白。WISH/VSV系统检测分析表明表达的hIFN-α2b具有生物学活性。结论:本研究利用转基因人参愈伤组织细胞成功地表达了人干扰素,为进一步提高口服干扰素的疗效打下基础。
- 任琦盛军任志霞
- 关键词：转基因
- 替莫唑胺联合丙戊酸钠对人脑胶质瘤细胞生物学行为的影响被引量：2
- 2017年
- 目的观察替莫唑胺(TMZ)与丙戊酸钠(VPA)联用对人脑胶质瘤细胞SHG-44和U251生物学行为的影响。方法将细胞分为对照组、VPA单用组、TMZ单用组和VPA-TMZ联用组。分别采用MTT法检测细胞增殖;流式细胞术AnnexinV-FLUOS染色法检测细胞凋亡;DAPI染色法观察凋亡细胞形态学变化;Transwell小室检测细胞侵袭能力。结果 VPA-TMZ联用较TMZ/VPA单独用药,能有效抑制人胶质瘤细胞SHG-44和U251的增殖,促进其凋亡且减弱其侵袭能力。结论 VPA可提高人脑胶质瘤细胞对TMZ的敏感性,为临床合理用药提供参考。
- 蔺勇马志骏乔寒栋徐效义张扬
- 关键词：替莫唑胺丙戊酸钠人脑胶质瘤
- 山栀苷对6-羟基多巴胺损伤的SH-SY5Y细胞的保护作用及其机制
- 2022年
- 目的:观察山栀苷对6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导的SH-SY5Y细胞氧化损伤的作用,并探讨其作用的分子机制。方法:以6-OHDA诱导的SH-SY5Y细胞为帕金森病体外细胞模型,分别以5、50、100和200μmol/L山栀苷作用于受损细胞,另设空白组及50μmol/L栀子苷阳性对照组。CCK-8法检测细胞活力;倒置显微镜下观察细胞形态学改变;流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)的荧光强度;分子对接技术评价山栀苷、栀子苷与Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)的结合情况;Western blot检测Keap1、核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶1(HO-1)蛋白表达水平;RT-qPCR检测HO-1的mRNA水平。结果:(1)与空白组比较,模型组细胞活力降低,细胞数量减少,形态改变明显,ROS水平显著升高,Nrf2和HO-1蛋白表达均显著下降,HO-1的mRNA水平显著降低(P<0.05);(2)与模型组比较,山栀苷预处理2 h可提高6-OHDA损伤SH-SY5Y细胞的活力,其中100μmol/L山栀苷组的细胞活力最高(P<0.05),还可显著降低ROS水平,增加Nrf2和HO-1蛋白表达,提高HO-1的mRNA水平(P<0.05);各组Keap1蛋白表达的差异无统计学意义(P>0.05);(3)与受体Keap1蛋白的结合能力:阳性配体>山栀苷>栀子苷。结论:山栀苷对6-OHDA损伤的SH-SY5Y细胞具有保护作用,其机制可能是通过调控Keap1/Nrf/HO-1通路抑制氧化应激反应。
- 张扬张文超刘鑫苗
- 关键词：分子对接
- P185^(c-erBb-2)胞外区结构域在大肠杆菌BL21中的表达分析
- 2001年
- 以 PET-HT为表达载体 ,探讨在大肠杆菌 BL2 1中高效表达 P1 85c- er Bb- 2胞外区结构域蛋白的最佳条件 .经 SDS-PAGE与软件分析 ,确定其最佳表达时间为 3 h,当菌液密度为 0 .7时 ,所表达的蛋白含量最高 ,而 IPTG在一定浓度范围内对表达含量不产生影响 .
- 王颖曾庆银何晓红孟庆繁高波傅学奇
- 关键词：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳大肠杆菌BL21跨膜糖蛋白
- 曲古菌素A诱导急性髓系白血病细胞表达共刺激分子CD80和CD86的研究(英文)
- 2015年
- 目的:研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古菌素A(TSA)诱导急性髓系白血病细胞表达共刺激分子CD80和CD86。方法:应用流式细胞仪检测TSA诱导急性髓系白血病患者单核细胞、HL-60细胞和K562细胞表达共刺激分子CD80、CD86及细胞活力;应用RT-PCR分析CD80和CD86 mRNA表达情况;在75 Gy照射TSA诱导的HL-60细胞和K562细胞后,应用CCK-8检测共刺激分子表达提高后HL-60细胞和K562细胞对健康人单核细胞的增殖作用。结果:TSA上调HL-60细胞表达CD86,也可上调急性髓系白血病患者单核细胞表达CD86,但TSA不能上调K562细胞表达CD86,TSA诱导HL-60细胞和K562细胞后,提高表达CD86的HL-60细胞对健康人单核细胞有增殖作用,而K562细胞无此作用。结论:TSA诱导HL-60细胞和急性髓系白血病患者单核细胞表达共刺激分子CD86,促进健康人单核细胞的增殖作用。
- 余美霞刘迅陈幼发张扬程静胡东霞张灵冯磊申小丽倪健周咏明
- 关键词：曲古菌素ACD80CD86
- 用近红外光谱-PLS法非破坏性分析吡嗪酰胺片被引量：2
- 2006年
- 应用偏最小二乘法结合近红外光谱法（NIRS—PLS）对吡嗪酰胺片中吡嗪酰胺的含量进行了非破坏性定量分析。采用近红外一阶导数800—1200nm光谱区间建立了吡嗪酰胺片中吡嗪酰胺的含量定量分析模型，校正集预测值与真实值的相关系数（R）达到0．9989，预测均方根误差（RMSEP）为0．563，表明所建模型准确可靠，预测准确度高，NIRS-PLS方便快捷，可作为药品分析的一种常规方法。
- 滕乐生年综潜逯家辉郭伟良蒋朝军孟庆繁
- 关键词：药物化学近红外光谱法偏最小二乘法非破坏性分析吡嗪酰胺
