中国海洋大学医药学院海洋药物与食品研究所
- 作品数：176 被引量：1,413H指数：20
- 相关作者：徐家敏苗本春王尚资宋乐天吴强明更多>>
- 相关机构：首都医科大学附属北京同仁医院青岛科技大学化学与分子工程学院中国医学科学院北京协和医学院药物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学化学工程更多>>
- 雄激素含量测定用蛋白微阵列的制备
- 2005年
- 利用分子生物学技术对鼠雄激素受体结合域(rARLBD)重组表达,结合新兴的蛋白质微阵列技术建立了一种快速无污染的检测方法,用于临床雄激素检测及新药发现。实验将编码ARLBD的cDNA片段(888bp)插入到含有多聚组氨酸标签的表达载体pET32a中构建了表达质粒pET32a/AR,并将其转化到大肠杆菌BL21中。经IPTG低温诱导,得到高效表达的可溶性ARLBD融合蛋白产物,并通过NiNTA凝胶亲和吸附纯化。将纯化得到的ARLBD使用芯片点样仪固定到硅烷化-多糖表面片基,制备得到ARLBD蛋白质微阵列。实验得到的特异性结合曲线表明在微阵列上的受体蛋白能够保持功能构像。通过Scatchard方程计算得到微阵列上ARLBD与荧光标记的睾酮结合的Kd值为5.32nmol/L。浓度依赖性标准曲线表明这一方法有较高的灵敏度,最低检测限达1pmol/L。应用这一方法对224例健康中国老年人血清雄激素水平进行了测定,研究证明了该方法的可靠性,并首次提供了一定样本量的我国老年人血清活性雄激素水平的参考值。这一技术的建立将为生物工程技术产品与临床检测和分子水平化合物筛选有效地结合提供一条新的途径。
- 周勇王伟耿美玉杜冠华
- 关键词：雄激素受体蛋白质微阵列血清检测
- 微生物生态学一种新研究方法-T-RFLP技术被引量：16
- 2004年
- T RFLP是建立在PCR基础之上一种新的微生物生态学研究方法。该方法克服了传统微生物培养方法的限制、应用快速、灵敏度高且输出定量的数据结果 ,被广泛应用到菌种鉴定、群落对比分析、群落中系统发育种群多样性的评估等领域。目前我国仍没有关于此方法应用的相关报道 ,但作为一种研究微生物群落特征的理想方法 ,T RFLP已经越来越受到相关研究人员的重视。该文主要介绍了该方法的基本原理。
- 王洪媛江晓路管华诗牟海津
- 关键词：T-RFLP分子生物学技术微生物多样性
- 硫酸多糖聚甘古酯抑制HIV-1反式转录调节蛋白诱导的THP-1细胞炎症细胞因子释放及机制探讨被引量：7
- 2006年
- 目的观察硫酸多糖聚甘古酯（SPMG）对HIV-1反式转录调节蛋白（Tat）刺激THP-1细胞释放具有神经毒性的炎症细胞因子如TNFα，IL-1β和IL-6的影响，并探讨其作用机制。方法用ELISA法检测SPMG对Tat刺激4h细胞上清液TNFα、刺激6h细胞上清液IL-1β和IL-6的影响；用Western blotting技术检测SPMG对PKCζ，PKCθ与PKCδ磷酸化影响。结果SPMG（50～100μg·mL^-1）显著抑制Tat诱导的TNFα，IL-1β与IL-6释放；Tat显著促进PKCζ，PKCθ和PKCδ的磷酸化，SPMG对PKCδ与PKCθ的磷酸化没有影响，但显著抑制PKCδ的磷酸化。结论SPMG可能通过抑制Tat对PKCδ活化，抑制炎症细胞因子TNFα，IL-6与IL-1β释放。
- 惠斌耿美玉李静
- 关键词：炎症细胞因子蛋白激酶C
- 中国毛虾酶解多肽降压作用的初步探讨被引量：13
- 2005年
- 初步探讨从中国毛虾(Aceteschinensis)经碱性及中性蛋白酶降解获得的多肽(AP、NP)的降压作用及相关机制。采用Cushman-Cheung方法测定酶解多肽体外对血管紧张素酶(ACE)活性的影响;采用两肾一夹型建立肾血管性高血压大鼠模型,分别长期预防给药及急性治疗给药;应用GY-6088型多道生理参数分析记录仪和张力传感器测定、记录血压和呼吸;采用均相竞争法测定大鼠血浆中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的含量。结果表明,2种酶解多肽体外均能明显抑制ACE的活性,AP和NP的半数抑制浓度(IC50)分别为15.61mg/L和16.95mg/L;无论是长期预防给药还是急性治疗给药,二者均能显著地降低肾血管性高血压大鼠的动脉血压;经口服预防给药能明显降低高血压大鼠血浆中的AngⅡ水平;给药大鼠的呼吸频率随血压的变化呈正相关变化;碱性酶解多肽的降压作用及抑制ACE生成的作用均强于中性酶解多肽,其中,200μg/g的AP降压效果最好,与14μg/g的卡托普利相当。中国毛虾酶解多肽无论是长期预防给药还是急性治疗给药对肾性高血压大鼠均有显著的降压作用,抑制AngⅡ的生成可能是其降压机制之一。
- 付雪艳薛长湖宁岩许萍苗本春
- 关键词：多肽肾血管性高血压降压作用
- 蛋白质芯片在药学中的应用被引量：5
- 2004年
- 周勇耿美玉杜冠华
- 关键词：蛋白质芯片药学
- 酸性寡糖对阿尔茨海默病模型小鼠脑内基因表达的影响被引量：4
- 2005年
- 目的应用基因芯片检测酸性寡糖971对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠脑内基因表达谱的影响。方法Balb/c小鼠随机分为对照组、AD模型组(-βAP25-35侧脑室注射)和971给药组,采用Morris水迷宫测试小鼠行为学改变;提取各组小鼠大脑皮层总RNA,与含有1 176个基因的cDNA表达谱芯片进行杂交。并用RT-PCR对其中5个基因表达进行验证。结果AD模型组寻找平台潜伏期比对照组显著延长,给予971可使其明显缩短。基因芯片结果显示,模型组与对照组存在表达差异的基因共有31个,其中上调19个,下调12个;给药组与模型组存在表达差异的基因共有17个,其中上调13个,下调4个。RT-PCR结果显示基因变化趋势与芯片结果相符。结论酸性寡糖971改善AD模型小鼠学习记忆功能可能与DNA损伤修复、神经生长、突触可塑性、免疫应答等相关基因的表达变化有一定关系。
- 孔令娜耿美玉牟亮辛现良杨楠左萍萍
- 关键词：阿尔茨海默病基因芯片Β-淀粉样蛋白
- HPLC法同时测定北沙参中法卡林二醇和人参炔醇的含量被引量：3
- 2007年
- 运用DAD Agilent 1100高效液相色谱仪,首次建立了同时测定北沙参药材中2种组分法卡林二醇和人参炔醇含量的方法。采用大连依利特C_(18)(4.6 mm×250 mm;5.0μm)色谱柱。流动相乙腈-水(0.3%磷酸)梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长254 nm,柱温25℃,进样量30μL,比较测定了23批北沙参药材、参皮和茎叶中法卡林二醇、人参炔醇的含量。结果表明:在0.06～1.20μg质量范围内,法卡林二醇(r_a=0.9999)和人参炔醇(r_b=0.9998)呈现良好的线性关系,法卡林二醇的平均回收率为101.7%(RSD=2.6%,n=5),人参炔醇的平均回收率为97.5%(RSD=1.9%,n=5)。本方法准确、灵敏、稳定、重现性好,可作为北沙参药材的质量控制方法。
- 张样柏李国强管华诗
- 关键词：北沙参人参炔醇HPLC
- 啤酒风味物质及游离脂肪酸的气相色谱研究被引量：27
- 2006年
- 啤酒中含量极低、极不稳定的游离脂肪酸(FFAs)是影响啤酒风味的主要因素。实验采用气相色谱技术,对形成啤酒的主要风味(如药物味、水果味、酒精味和哈喇味等),重点是不良风味的风味物质进行了检测。啤酒样品经两次酸化处理,酯化后薄层分离的方法测得游离脂肪酸的含量具有较好的重复性和较高的回收率,以癸酸和亚油酸为代表测得回收率分别为85%和114%。
- 王家林薛长湖付雪艳苗本春李兆杰薛勇
- 关键词：啤酒风味物质游离脂肪酸气相色谱
- 海藻核酸提取的难点及对策被引量：7
- 2004年
- 韩峰宫倩红史晓翀于文功
- 关键词：海藻核酸海带紫菜多糖
- Nisin与香辛料提取液在五香牛肉保鲜中的应用研究被引量：22
- 2004年
- 用滤纸片琼脂扩散法比较了8种天然香辛料提取液对五香牛肉中腐败菌的抑制效果,研究了香辛料提取物对五香牛肉货架期的影响。结果证明丁香与桂皮提取液抑菌作用最强,以1.5%丁香+3%桂皮+0.05%Nisin组合保鲜液处理五香牛肉,在0～4℃条件下可以将产品货架期延长至15d,室温条件下贮存,货架期可达5d,且不影响产品的感官品质。
- 贺红军姜竹茂孙承锋江涛金海珠
- 关键词：香辛料NISIN保鲜五香牛肉
