第三军医大学军事预防医学院创伤烧伤与复合伤国家重点实验室
- 作品数：32 被引量：77H指数：6
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- 相关机构：第三军医大学大坪医院野战外科研究所遵义医学院贵州省细胞工程重点实验室更多>>
- 发文基金：国家重点实验室开放基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
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- 重组质粒phPPARδ-IRES2-EGFP高效体外转染表达体系的建立
- 2007年
- 目的:建立phPPARδ-IRES2-EGFP重组质粒高效体外转染表达的体系。方法:采用阳离子脂质体Lipofectamine2000将phPPARδ-IRES2-EGFP转染入293细胞,荧光显微镜观察质粒转染细胞GFP报告基因表达强度及转染效率,并对转染细胞hPPARδ的表达进行荧光定量PCR和Western Blot检测。结果:荧光显微镜下可见转染phPPARδ-IRES2-EGFP质粒的293细胞绿色荧光蛋白(GFP)报告基因高表达,转染效率高达(85±10)%;荧光定量PCR和Western Blot检测的结果表明,phPPARδ-IRES2-EGFP转染的293细胞其hPPARδ表达水平高于空载体转染对照组(P<0.01)。结论:成功建立phPPARδ-IRES2-EGFP质粒的高效体外转染表达体系,为hPPARδ受体功能的研究及基于hPPARδ为靶标的药物筛选平台的建立奠定了基础。
- 章涛万敬员杨俊卿周元国周岐新
- 关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体Δ转染效率293细胞
- 大鼠多发伤致凝血功能障碍模型的建立
- 目的建立符合临床的大鼠多发伤致凝血功能障碍模型。方法雄性SD大鼠60只,随机分为正常组,模型组4h,6h,12h,24h,48h,共6组,每组10只,通过造成大鼠重型颅脑损伤、双股骨骨折、开腹及腹主动脉放血20%,制成大...
- 包卿郑旭文刘政沈文明楚鹰梁华平岳茂兴
- 关键词：多发伤凝血功能障碍
- 文献传递
- 甘草酸18α体对缺血再灌注损伤后肾小管上皮细胞p21蛋白表达的影响被引量：6
- 2008年
- 目的探讨甘草酸18α体对肾脏缺血再灌注损伤(IRI)后肾小管上皮细胞p21蛋白表达的影响及其意义。方法将成年(2月龄)野生型鼠[p21(+/+)]和p21基因敲除鼠[p21(-/-)]分成4组:p21(+/+)鼠生理盐水组和p21(+/+)鼠甘草酸治疗组,p21(-/-)鼠生理盐水组和p21(-/-)鼠甘草酸治疗组;左肾IRI模型建立:无创动脉夹阻断左肾动脉血流45min,开放动脉夹形成再灌注。于再灌注后0、1、7d处死实验动物,制作双肾(右肾作自身对照)标本,HE染色观察肾组织病理形态学变化;Westernblot定量检测p21蛋白表达的变化。结果缺血再灌注损伤肾脏主要表现为肾小管坏死,半定量分析发现甘草酸治疗组比生理盐水组轻,p21(+/+)鼠组比p21(-/-)鼠组轻(P<0.01)。在p21(+/+)鼠,甘草酸治疗组p21蛋白表达比生理盐水组显著增多(P<0.01)。p21蛋白表达与肾小管坏死呈显著负相关(P<0.01)。结论甘草酸主要通过对小鼠IRI肾脏p21蛋白表达的上调,减轻肾小管坏死,从而对IRI肾脏产生保护作用。
- 李开龙何娅妮王惠明赵玲陈林
- 关键词：IRIP21
- 大鼠多发伤致凝血功能障碍模型的建立
- 目的建立符合临床的大鼠多发伤致凝血功能障碍模型。方法雄性SD大鼠60只,随机分为正常组,模型组4h,6h,12h,24h,48h,共6组,每组10只,通过造成大鼠重型颅脑损伤、双股骨骨折、开腹及腹主动脉放血20%,制成大...
- 包卿楚鹰梁华平沈文明郑旭文刘政岳茂兴
- 关键词：多发伤凝血功能障碍
- 文献传递
- 利用CRISPR/Cas9基因编辑靶向下调FGFR2缓解Apert综合征小鼠颅缝早闭
- 2021年
- Apert综合征(Apert Syndrome,AS)是一类常染色体显性遗传疾病,主要表现为颅缝早闭、中面部发育不良、并指(趾)、智力发育障碍等,多由FGFR2分子功能增强型点突变引起。目前,此疾病主要靠手术矫形来恢复功能,其中大脑等病变部位手术难度大,难以实施,且通常需要多次手术。CRISPR/Cas9基因编辑技术在人类遗传病治疗中具有巨大潜力。本研究筛选到靶向FGFR2基因的gRNA,与Cas9经慢病毒包装后作用于Apert小鼠(FGFR2^(+/P253R))的原代颅骨细胞、体外培养的颅骨以及活体小鼠颅骨中,可敲低FGFR2的表达,改善Apert原代颅骨细胞的分化程度。CRISPR/Cas9处理体外培养的颅骨及注射至Apert小鼠头颅,颅骨冠状缝早闭状态有效缓解,异常降低的颅骨骨量、骨密度等也显著改善,表明CRISPR/Cas9基因编辑可缓解Apert小鼠头颅异常。本研究为Apert综合征的基因治疗提供了实验依据,有望为其它骨骼遗传病治疗提供新的策略与借鉴。
- 罗凤涛谢杨丽谢杨丽谭乔燕李灿陈林
- 关键词：颅缝早闭APERT综合征
- p53抑制尿毒症血清诱导的小鼠血管平滑肌细胞成骨样分化
- 目的血管钙化是维持性血透(Maintenance hemodialysis,MHD)患者心血管并发症重要的病理基础,而血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cell,VSMC)成骨样分化是MHD患...
- 李开龙何娅妮王燕陈菁王建民
- 关键词：血管钙化P53
- 文献传递
- 造血干细胞在辐射损伤中的应用
- 2006年
- 电离辐射在工业、医学的广泛应用可造成机体严重造血损伤,造血干细胞移植是救治的重要措施。本文概述了4种造血干细胞移植方法在辐射损伤中的应用,并重点介绍了4种造血干细胞移植的优缺点及研究进展。
- 王明科罗成基
- 关键词：造血干细胞移植电离辐射
- 20AA复方氨基酸联用大剂量维生素B6新疗法治疗创伤凝血障碍的实验研究
- 目的：建立创伤性凝血功能障碍动物模型,观察20AA复方氨基酸注射液(丰诺安)+大剂量维生素B6新疗法对动物模型凝血功能的影响.
方法：实验动物为雄性SD鼠,随机分为假手术组、对照组以及新疗法治疗组,每组8只.采...
- 楚鹰黄琴梅蒋立新岳茂兴郑旭文梁华平包卿沈文明刘政周培根李瑛卞晓星
- 关键词：复方氨基酸注射液维生素B6
- 文献传递
- 携带人PPARγ1受体基因高效真核表达载体的构建及其意义被引量：1
- 2007年
- 目的:构建高效表达人过氧化物酶体增殖物激活受体γ1(hPPARγ1)的真核表达载体,为hPPARγ1受体功能和基于hPPARγ1受体靶点的药物筛选提供分子研究平台。方法:采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)从HepG2细胞总RNA克隆hPPARγ1全长基因,与经XhoI、SmaI相同双酶切的pIRES2-EGFP载体连接,构建重组质粒phPPARγ1-IRES2-EGFP,经酶切及测序鉴定重组质粒中hPPARγ1基因的完整性和忠实性;荧光显微镜观察重组质粒转染的293细胞GFP报告基因表达强度,并对转染细胞hPPARγ1的表达进行荧光定量PCR及免疫细胞化学检测。结果:经酶切和测序证实重组质粒构建正确,并在转染的293细胞中获得hPPARγ1的高效表达。结论:成功构建phPPARγ1-IRES2-EGFP重组质粒,为基于hPPARγ1受体靶点的药物筛选平台的建立及受体功能研究提供了高效表达载体。
- 章涛李苌清杨俊卿万敬员蒋建新周岐新
- 关键词：基因克隆真核表达
- 人脐血源性MSCs成骨诱导分化后的免疫调节作用被引量：1
- 2010年
- 目的:探讨脐血源性间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)经成骨诱导分化后,其对淋巴细胞的免疫调节作用。方法:从人脐血中分离、培养及扩增MSCs,流式细胞仪测定细胞表型;将获得的MSCs在成骨诱导体系中诱导分化并鉴定,将诱导后的成骨细胞分别以不同剂量加入到外周血混合淋巴细胞培养体系和植物血凝素(PHA)刺激的外周血淋巴细胞转化体系中,用3H-TdR标记β液体闪烁计数仪检测细胞增殖,观察对混合淋巴细胞反应和淋巴细胞转化的影响。结果:从人脐血中分离获得的MSCs,呈成纤维样的细胞形态,CD29和CD105表达阳性,CD34和CD45表达阴性;在成骨诱导剂诱导下,具有成骨细胞样表型,可表达碱性磷酸酶,并形成矿化结节;人脐血源性MSCs经成骨诱导分化后在体外对混合淋巴细胞反应和PHA诱导的淋巴细胞转化均具有明显的抑制作用,抑制作用与细胞数量呈正相关。结论:脐血源性MSCs诱导为成骨细胞后对同种异体淋巴细胞具有免疫调节作用,为其作为骨组织工程异基因种子细胞来源打下基础。
- 王蒙杨媛粟永萍马华松邹德威
- 关键词：免疫调控骨组织工程
