清华大学医学院医学分子生物学国家重点实验室
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
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- 相关机构：石河子大学生命科学学院农业生物技术中心重点实验室石河子大学生命科学学院更多>>
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- 锌对水稻金属硫蛋白基因家族的表达以及重组酵母细胞耐受性的影响被引量：2
- 2007年
- 采用Northern杂交和酵母功能互补实验,分析了10个水稻I类金属硫蛋白基因(Os MT-Is)在水稻幼苗和重组酵母细胞中与Zn2+的应答反应.Zn2+处理后样品的杂交结果显示:在幼苗的地上部分,除了3个4型Os MT-I基因(Os MT-I-4a,Os MT-I-4b,Os MT-I-4c)的表达不受Zn2+的影响外,其余6个基因的表达都有不同程度的增加;而在根中,Zn2+明显增加了Os MT-I-1b和Os MT-I-2c的转录,但Os MT-I-1a和Os MT-I-3a的转录却受到了抑制.将Os MT-Is转化Zn2+敏感酵母突变体并获得异源表达后,10个成员都可以在一定程度上提高酵母细胞的Zn2+耐受力,而且表现出重组酵母体内Zn2+积累的增加.上述结果表明OsMT-I家族的成员均能够对外加的Zn2+产生反应,可能是通过螯合Zn2+来增加了生物体对Zn2+耐受性.
- 徐玉凤周功克李一勤刘进元
- 关键词：水稻金属硫蛋白锌离子耐受性
- 水稻3型金属硫蛋白基因的分离和表达研究被引量：2
- 2009年
- [目的]对从水稻幼苗中分离的2个3型金属硫蛋白基因OsMT-I-3a和OsMT-I-3b的结构进行了分析,并对其表达模式进行了检测。[方法]利用Blast搜索水稻数据库,设计引物并利用RT-PCR的方法克隆OsMT-I-3基因cDNA全长。通过多重比对等方法对其基因和蛋白结构进行了分析。利用Northern杂交对这两个基因的组织表达模式和环境应答模式进行了检测。[结果]OsMT-I-3a和OsMT-I-3b分别编码62和65个氨基酸的多肽,具有典型的3型金属硫蛋白的半胱氨酸分布模式。OsMT-I-3a基因在叶片中没有检测到表达,OsMT-I-3b在叶片中高表达,且各种非生物胁迫因素会影响两种基因的表达模式。[结论]Ⅰ类3型2个水稻MT基因可能参与水稻多种环境胁迫的信号通路,在水稻抗非生物胁迫过程中起作用。
- 徐玉凤李一勤刘进元
- 关键词：水稻金属硫蛋白基因非生物胁迫
- 水稻新型MT基因的鉴定及其基因家族分子特征分析被引量：2
- 2009年
- [目的]探讨水稻MT基因家族各成员在基因结构上的差异及相互间的进化关系。[方法]从经重金属处理的水稻幼苗中分离到3个新的植物MT,对其进行RT-PCR和Northern杂交分析以及水稻和拟南芥MT基因家族的序列比对和进化分析。[结果]RT-PCR和Northern杂交分析表明,水稻中3个MT基因的表达均受重金属的诱导,在幼苗根部进行特异性表达。由水稻和拟南芥MT基因家族的序列比对提出植物MT的新分类方式。水稻I类OsMT基因家族的所有10个成员,定位到6条染色体上。同一类型的OsMT有高度的氨基酸序列保守性,相似的Cys排列方式。新发现的3个OsMT家族在单子叶植物水稻中独有,属4型MT。[结论]水稻和拟南芥MT基因家族进化分析显示,植物MT至少发生在种子植物出现前,而4型MT可能发生于单子叶植物和双子叶植物分离后。
- 徐玉凤李一勤刘进元
- 关键词：金属硫蛋白水稻NORTHERN杂交基因表达
- 重组萝卜磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶在毕赤酵母优化表达初步纯化与鉴定被引量：2
- 2010年
- 将萝卜磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(RsPHGPx)基因插入到分泌表达载体pPIC9K中,转化巴斯德毕赤酵母GS115细胞,筛选具有G418抗性的单拷贝转化子。经过优化表达条件,RsPHGPx在1%甲醇、pH6.0、28℃条件下诱导60h后得到最大表达量,产率约为102mg/L。通过硫酸铵分级沉淀、脱盐柱脱盐、凝胶过滤等纯化步骤,得到了90%以上纯度的RsPHGPx.活性分析显示纯化获得的RsPHGPx具有依赖于GSH的还原活性,比活性为4.2μmol/min.mg,为获得大量RsPHGPx而用于应用开发研究奠定了基础。
- 李洋李晖祝建波刘进元
- 关键词：分泌表达蛋白纯化质谱鉴定活性检测
