中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室
- 作品数：1,251 被引量：6,850H指数：38
- 相关作者：王吉贵田杰生张美佳蔡祝南李赞东更多>>
- 相关机构：东北农业大学动物科学技术学院江西农业大学动物科学技术学院河北农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 阿维链霉菌中ECF家族Sigma因子Sig6的调控机制
- ECFσ因子可以响应外界环境的改变并调节适应环境胁迫相关基因的转录.SAV663是阿维链霉菌ECF家族Sigma因子Sig6的编码基因，通过对SAV663及其相邻基因SAV662的基因缺失、过量表达和回补实验表明SAV6...
- 颜婷婷陈芝李季伦
- 关键词：阿维链霉菌生物合成
- 文献传递
- 实验动物在生物医学研究中的应用被引量：2
- 2004年
- 实验动物是现代生物医学研究的重要支撑条件 ,在诸多领域有着不可替代的作用。本文仅对实验动物在人类疾病动物模型。
- 谢启发王宾
- 关键词：实验动物动物疾病模型异种器官移植生物反应器核移植
- 甜菜坏死黄脉病毒内蒙分离物RNA3序列分析及编码25kD蛋白基因在大肠杆菌中的表达被引量：10
- 1998年
- 以甜菜坏死黄脉病毒（ＢＮＹＶＶ）内蒙分离物的总ＲＮＡ为模板，通过反转录－ＰＣＲ扩增获得ＢＮＹＶＶＲＮＡ３全长ｃＤＮＡ。将其克隆到ｐＧＥＭ－７Ｚｆ（＋）上，得到重组质粒ｐＧＢＹ５６。序列分析结果表明，内蒙分离物ＲＮＡ３基因组全长为１７７５ｎｔ，其中包含３个开放阅读框架，分别编码２５ｋＤ蛋白、４．６ｋＤ蛋白和一种由５９个氨基酸组成的Ｎ蛋白。与法国Ｆ２分离物、德国Ｇ１分离物和日本Ｓ分离物相比，其核苷酸序列的同源性分别为９６．４％、９６．８％和９７．３％。将２５ｋＤ蛋白编码基因克隆到ｐＪＷ２上，构建了该基因的原核表达载体。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ分析结果表明，２５ｋＤ蛋白基因在Ｅ．ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）中经温度（４２℃）诱导后。
- 李大伟于嘉林韩成贵韩成贵刘仪邢怡明
- 关键词：甜菜坏死
- 兔转基因单细胞克隆株的分离培养及其染色体倍性分析被引量：4
- 2002年
- 为检测原代二倍体细胞转基因后单细胞克隆的增殖能力及其染色体倍性稳定性 ,用脂质体介导的转染方法将质粒DNApEGFP -C1(带有报告基因GFP和Neor)导入体外培养的兔胎儿成纤维细胞中 ,经G4 18药物筛选后 ,分离出 73个GFP阳性细胞克隆 ,最后存活 13个 (18% ) ,对其中 9个克隆的染色体倍性进行分析 ,结果只有 2个 (2 2 % )克隆的染色体倍性正常率在 75 %以上 ,分别为 80 %和 75 % ,其余 7个克隆的染色体倍性正常率均在 70 %以下。这表明 ,当使用转基因单细胞克隆株作为供核细胞生产克隆动物时 ,单细胞克隆的增殖代数和染色体倍性的稳定性需要进一步研究提高。
- 侯健安晓荣关宏苟克勉林爱星陈永福
- 关键词：染色体倍性核型分析
- 猪肝脏组织表达序列标签(ESTs)的初步分析被引量：10
- 2002年
- 构建了猪肝脏组织cDNA文库 ,并对文库中随机挑选的 4 38个克隆的表达序列标签 (ESTs)进行了研究。结果表明 ,在所研究的 4 38个ESTs中 ,186个在猪种中已有匹配序列 ,37个在人类及其它物种中可以找到同源序列 ,2 15个为未知功能基因。试验还测定了文库中 4 5个cDNA克隆的全长插入序列 ,结果表明 ,19个为已知功能基因 ,11个没有发现开放阅读框 ,其它 15个具有开放阅读框 ,但基因的功能未知。这些结果初步代表了肝脏组织的功能基因表达谱。
- 李宁赵志辉刘兆良赵兴波连正兴吴常信
- 关键词：肝脏组织表达序列标签ESTSCDNA文库功能基因组
- 耐低温木质纤维素降解菌群的特性与种群结构分析
- 罗立津万立袁红莉
- 鲁西黄牛皮肤成纤维细胞分离与培养的研究被引量：11
- 2004年
- 研究了鲁西黄牛耳皮肤成纤维细胞的分离与培养、纯化方法及生长特征 ,获得了传代培养的鲁西黄牛皮肤成纤维细胞和上皮细胞。鲁西黄牛耳皮肤细胞在体外培养时呈贴壁生长 ,其原代或早期传代培养物由上皮样细胞与成纤维细胞混合组成。传代培养混合生长的细胞用 0 .2 5 %胰蛋白酶液 37℃下消化处理 3～ 4 min,脱壁悬浮的主要为成纤维细胞。采用反复消化法在传代过程中将二者逐步分离纯化 ,获得了可正常传代的鲁西黄牛耳上皮细胞系和成纤维细胞系。通过绘制生长曲线研究了鲁西黄牛耳皮肤成纤维细胞的增殖规律。传代培养至 12代的鲁西黄牛皮肤成纤维细胞染色体倍性正常。利用第 6代成纤维细胞作核供体克隆试验结果证明重构胚体外发育正常 ,囊胚发育率为 2 7.3%。
- 孙秀柱李青旺戴蕴平程金华龚国春万荣朱化彬
- 关键词：体外培养皮肤组织鲁西黄牛
- 猪、牛IgD CSR表达机制研究
- 自半世纪前Rowe等从骨髓瘤患者血清中首先发现IgD以来，人们对IgD一直知之甚少。随着在越来越多物种中发现不同形式的IgD存在，一些研究者认为IgD是较为古老的免疫球蛋白类型，但是关于IgD的表达机制和其生物学功能仍然...
- 徐蓓蕾赵要风
- 关键词：免疫球蛋白基因序列实验动物分子免疫学
- 文献传递
- 鸡下丘脑组织表达序列标签初步分析被引量：6
- 2002年
- 为了鉴定所构建的鸡下丘脑组织 c DNA文库能否用于下丘脑表达谱的建立 ,从 c DNA文库中随机挑取 12个克隆 ,对其表达序列标签 (expressed sequence tags,ESTs)进行了测定和初步分析。经 BL ASTn和 FASTA3.1分析后发现 ,1个 ESTs在 Gen Bank中可以找到鸡的同源序列 ,4个在其他物种中也可以找到同源序列 ,1个在 ESTs database中有同源 ESTs序列 ,还有 6个为未知功能基因。 12个 ESTs序列均已录入 Gen Bank。
- 赵志辉李宁胡晓湘冯继东张玉静
- 关键词：下丘脑CDNA文库表达序列标签
- 转基因牛乳中重组人乳铁蛋白中试纯化工艺的建立及其活性分析被引量：4
- 2015年
- 目的建立转基因牛乳中重组人乳铁蛋白(recombinant human lactoferrin,rh LF)的中试纯化工艺,并分析纯化的rh LF的活性。方法以含rh LF的转基因牛乳为原料,通过陶瓷膜分离技术除菌,一步阳离子交换层析,非离子型去污剂与金属络合剂去除内毒素,以及超滤浓缩脱盐,冷冻干燥制备重组蛋白纯品等步骤纯化rh LF,采用SDSPAGE、凝胶过滤色谱(SEC-HPLC)法和反相色谱(RP-HPLC)法分析rh LF的纯度;ELISA法检测rh LF的含量;鲎试剂法检测rh LF的内毒素含量;圆二色谱技术分析rh LF的二级结构;并检测rh LF的铁结合能力和抑菌活性。结果纯化的rh LF的平均纯度可达96%,内毒素含量小于0.5 EU/mg,整个工艺回收率达75%,且具有与天然人乳铁蛋白(human lactoferrin,h LF)相近的二级结构及正常的铁结合能力和抑菌活性。结论建立的牛乳中rh LF的中试纯化工艺简便高效,适用于rh LF的规模化生产。
- 赵建敏王建武孟如杰付明波王慧敏汤波陈敏李宁
- 关键词：抑菌活性
