贵阳医学院基础医学院多媒体形态学实验室
- 作品数：35 被引量：56H指数：4
- 相关作者：周灵贵刘玉江吴璇周筑兰代佳琳更多>>
- 相关机构：中山大学中山医学院中山大学中山医学院寄生虫学教研室毕节学院环境与生命科学系更多>>
- 发文基金：贵州省科技攻关计划国家自然科学基金贵州省农业科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学理学更多>>
- 亚洲牛带绦虫TaCRISP基因克隆、表达和序列分析被引量：11
- 2009年
- 目的通过筛选亚洲牛带绦虫(Taenia saginata asiatica)成虫cDNA质粒文库,识别半胱氨酸分泌蛋白(Ta CRISP),并进行克隆表达,为进一步研究其功能提供基础依据。方法用生物信息学方法从亚洲牛带绦虫成虫全长cDNA质粒文库中识别TaCRISP的全长编码基因并预测编码蛋白质的各种结构与功能;将其编码区序列克隆到原核表达载体pET-30a(+)上,测序鉴定重组质粒,之后进行诱导表达,表达产物经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定。结果该基因全长1090bp,编码239个氨基酸,1aa-16aa位为分泌信号肽,理论分子量为26973.8,等电点为5.96。生物信息分析揭示,Ta CRISP与中殖孔绦虫CRISP一致性为38%,相似性为54%;所构建的重组体经PCR、双酶切及测序鉴定与目标基因相符。SDS-PAGE结果表明,目的基因在大肠埃希菌BL-21/DE3中表达成功。结论发现亚洲牛带绦虫Ta CRISP基因,成功构建重组原核表达质粒并表达出融合蛋白。
- 戴鹏戴佳琳黄江廖兴江郎书源周灵贵申萍香
- 关键词：亚洲牛带绦虫分子克隆原核表达
- 猪带绦虫CDC37基因及其蛋白结构特征的生物信息学分析被引量：1
- 2012年
- 目的:分析和预测猪带绦虫细胞分裂周期蛋白37(Ts CDC37)基因及其编码蛋白的结构和特性,用于指导其生物学功能的实验研究。方法:利用生物信息学网站所提供的有关基因和蛋白序列和结构功能分析工具,以及专业的生物信息学软件包,从猪带绦虫成虫全长cDNA质粒文库中识别CDC37基因,对猪带绦虫CDC37基因编码的蛋白质进行生物信息学分析。结果:该基因全长1 203 bp,编码400个氨基酸,为全长基因。Genebank中与日本血吸虫的cell division side 37 homolog蛋白的一致性最高,达60%。相对分子量理论预测值为46 802.5 ku,预测其有6个主要的B细胞抗原表位,无亚细胞定位序列。结论:应用生物信息方法从猪带绦虫成虫cDNA文库中筛选出了猪带绦虫CDC37基因全长序列并预测得到其结构与功能方面信息。
- 刘玉江陈晓睿黄江戴佳琳廖兴江
- 关键词：猪带绦虫基因蛋白质结构
- 牛带绦虫成虫全长cDNA质粒文库的构建及EST测序
- 目的构建牛带绦虫(Teania saginata)成虫全长cDNA质粒文库,为寻找更多有效的牛带绦虫病疫苗候选抗原分子及对三种主要人体带绦虫的功能基因对比研究奠定基础。方法提取牛带绦虫成虫mRNA;进行反转录合成双链cD...
- 戴佳琳黄江廖兴江郎书源
- 文献传递
- 猪带绦虫腺苷酸激酶的克隆及其重组蛋白免疫反应性的评价
- 目的构建猪带绦虫腺苷酸激酶(adenylate kinase,ADK)基因原核表达载体,将表达的蛋白纯化,并对表达产物的免疫反应性进行评价。方法构建重组原核表达质粒pET28a(+)-ADK,再将该重组体转化到宿主菌大肠...
- 戴佳琳黄江廖兴江申萍香周灵贵刘玉江
- 关键词：猪带绦虫腺苷酸激酶基因克隆免疫反应性
- 文献传递
- 亚洲带绦虫EIFs3克隆与免疫反应性分析被引量：2
- 2010年
- 目的对亚洲带绦虫真核翻译起始因子3(eukaryotic translation initiation factor3 subunit,EIFs 3)进行克隆及免疫学初步研究。方法利用在线生物信息学工具从亚洲带绦虫成虫cDNA文库中筛选出含有EIFs3基因,并将该基因克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,在大肠埃希菌BL21/DE3中诱导表达,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,重组后的蛋白用His-镍蛋白纯化柱纯化,纯化的重组蛋白用蛋白印迹(Western blotting)进行免疫学分析。结果 PCR,双酶切及DNA测序均显示重组体构建成功,用亲和层析法得到高纯度的蛋白,且该重组蛋白可被亚洲带绦虫及牛带绦虫及猪带病人血清识别,表明其具有免疫反应性。结论亚洲带绦虫成虫EIFs 33基因可在原核表达系统中获得具有免疫活性的高效表达。
- 戴佳琳黄江廖兴江李波王宇江楠
- 关键词：亚洲带绦虫免疫反应性
- 牛带绦虫成虫钙调神经磷酸酶B基因生物信息学分析
- 2010年
- 目的从牛带绦虫(Teania saginata)成虫cDNA文库中克隆牛带绦虫钙调神经磷酸酶B(calcineurin B钙调神经磷酸酶B)基因,分析和预测其编码蛋白的结构和特性。方法构建牛带绦虫成虫cDNA质粒文库,从文库中识别钙调神经磷酸酶B基因并进行生物信息学分析。结果该基因全长510 bp,编码区为141～650,编码170个氨基酸,为全长基因。理论分子量、等电点分别为19119.3 Da和4.52;无跨膜区;三维结构建模图显示其线性表位的部位。结论应用生物信息方法从牛带绦虫成虫cDNA文库中筛选出钙调神经磷酸酶B基因的cDNA全长序列,并预测得到其结构与功能方面的信息。
- 骆强戴佳琳黄江廖兴江
- 关键词：牛带绦虫CDNA生物信息学
- 猪带绦虫谷胱甘肽转移酶GST的原核表达及免疫学研究被引量：7
- 2010年
- 目的通过对猪带绦虫谷胱甘肽转移酶GST的表达,对其免疫性进行初步研究。方法利用生物信息学从猪带绦虫成虫cDNA质粒文库中筛选出谷胱甘肽转移酶(GST)基因,将其克隆到原核表达载体pET28a(+),经过双酶切、PCR鉴定后,异丙基-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,重组后的蛋白用His-镍蛋白纯化柱纯化,纯化的重组蛋白用蛋白印迹进行免疫学分析,Western blotting鉴定该蛋白免疫反应性。结果成功构建了重组体,并得到高纯度蛋白,该蛋白可被感染猪带绦虫的病人及猪、感染牛带绦虫病人及感染亚带绦虫病人血清所识别。结论猪带绦虫谷胱甘肽转移酶可在原核系统中获得具有免疫反应性的高效表达。
- 戴佳琳黄江廖兴江江楠王宇刘玉江
- 关键词：猪带绦虫谷胱甘肽转移酶原核表达免疫反应性
- 猪带绦虫腺苷酸激酶基因及蛋白结构特性分析被引量：3
- 2009年
- 目的分析和预测猪带绦虫腺苷酸激酶（ADK）基因及其编码的蛋白结构和特性。方法利用各种在线生物信息网站及其它分析软件包,分析从猪带绦虫成虫cDNA质粒文库中识别的腺苷酸激酶基因的结构和编码区序列,分析、预测编码的蛋白质的理化特性、抗原表位、翻译后的修饰、功能域、亚细胞定位、拓扑结构、二级结构、三维空间构象等。结果该基因全长864 bp,编码区为110－758,编码215个氨基酸,为全长基因。理论分子量、等电点分别为23771.4 Da和6.86;没有跨膜区;三维结构建模图显示其线性表位的部位。结论应用生物信息方法从猪带绦虫成虫cDNA文库中筛选出了腺苷酸激酶基因的cDNA全长序列并预测得到其结构与功能方面的信息。
- 戴佳琳黄江廖兴江周灵贵申萍香刘玉江郎书源
- 关键词：猪带绦虫腺苷酸激酶CDNA
- 亚洲牛带绦虫Spef1-Like基因克隆、表达及纯化被引量：3
- 2009年
- 目的扩增、克隆和表达亚洲牛带绦虫(Taenia saginata asiatica)Spef1-Like基因全长cDNA,并进行表达产物的纯化。方法以亚洲牛带绦虫成虫cDNA文库中含Spef1-Like基因的质粒作为模板,扩增该基因,将其克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,测序鉴定重组质粒,在大肠埃希菌BL-21/DE3中用异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,重组后的蛋白用His-镍蛋白纯化柱纯化。结果PCR,双酶切及DNA测序见过均表明重组质粒pET-28a(+)-Spef1-Like构建成功,该基因在大肠埃希菌中以上清表达,纯化后蛋白通过SDS-PAGE鉴定结果表明该基因在大肠埃希菌BL-21/DE3得到高效表达。结论成功克隆了亚洲牛带绦虫Spef1-Like基因,并表达和纯化了Spef1-Like蛋白,为研究Spef1-Like的功能及其疫苗等研究提供了基础依据。
- 王杰戴佳琳黄江吴璇廖兴江申萍香周灵贵杜武英郎书源
- 关键词：亚洲牛带绦虫基因克隆原核表达
- 牛带绦虫亚洲亚种核糖体蛋白L10a基因分析被引量：1
- 2007年
- 目的：分析和预测牛带绦虫亚洲亚种成虫核糖体蛋白LlOa基因及其编码蛋白的结构和功能。方法：构建牛带绦虫亚洲亚种成虫eDNA文库，进行EST测序，将EST序列与GenBank中登陆的序列进行同源性比对及基因完整性判断；应用NCBI上的BLAST对所筛选基因的保守域进行搜索比对，利用PredictProtein分析、预测其功能域及二级结构。结果：BLASTX分析该基因为全长基因，全长698bp，编码区为24-681，编码218个氨基酸，无跨膜区，具有较稳定的理化性质。结论：从牛带绦虫亚洲亚种成虫cDNA文库中筛选出核糖体蛋白L10a基因。
- 申萍香黄江周灵贵廖兴江郎书源
