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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室: 作品数：296 被引量：913H指数：15; 相关作者：田国斌谭丹王晶张建林李印更多>>; 相关机构：东北农业大学动物医学学院内蒙古农业大学动物科学与医学学院华南农业大学动物科学学院更多>>; 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生环境科学与工程更多>>

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含氯复方消毒剂对禽流感病毒灭活效果的研究被引量：3: 2005年; 采用K le in-Defors悬浮灭活试验与鸡胚感染试验方法,对含氯复方消毒剂灭活H5N1和H9N2亚型禽流感病毒的效果进行了检测。结果,该含氯消毒剂在125 mg/L以上时,对两种禽流感病毒的杀灭率可达到99.99%以上。在实际应用中,推荐该消毒剂的使用浓度为有效氯167 mg/L。结论,该复方含氯消毒剂对两种禽流感病毒有很好的灭活效果。; 施建忠田国彬李雁冰冯菊艳陈化兰; 关键词：含氯消毒剂禽流感病毒

H5N1亚型禽流感病毒A／Anhui／2／2005活候选疫苗株的构建及其对鸡致病性的研究: 2008年; A/Ann Arbor/6/60ca(H2N2)冷适应疫苗供体株具有冷适应性、温度敏感性和致弱性表型。本研究利用基因工程技术体外合成A/Ann Arbor/6/60ca(H2N2)冷适应疫苗株具有冷适应性的内部基因PB2、PB1、PA、NP、M、NS,从A/Anhui/2/2005(H5N1)毒株获得HA、NA,并对HA基因上的多个连续碱性氨基酸基序进行了缺失修饰。将上述8个基因片段分别克隆至pBD双向表达载体中测序鉴定。利用质粒反向遗传操作系统,将构建正确的8个重组pBD质粒转染Vero细胞拯救病毒。经RT-PCR和序列测定鉴定,结果表明本试验成功获得了一株H5N1亚型A/Anhui/2/2005重组病毒,将其命名为AH/AAca,救获的重组病毒具有预期的温度敏感性和冷适应性生物学特性。随后进行了AH/AAca人工感染SPF鸡的感染性和致病性试验,结果表明其对鸡既无感染性,也无致病性。AH/AAca的获得为评价其在小鼠、非人类灵长目等动物模型上的保护效力的研究打下了坚实基础,为我国预防人禽流感的流行建立了技术储备。; 樊树芳许传田索永兵陈化兰; 关键词：禽流感病毒反向遗传操作温度敏感性

以GPT和GFP为双重筛选标记的禽痘病毒通用转移载体的构建及鉴定: 禽痘病毒作为活载体已经得到广泛的应用，转移栽体的构建是重组禽痘病毒构建的重要环节。本研究构建了禽痘病毒通用转移载体pSY681-gfp-gpt，该载体含有gfp和gpt两个报告基因及背对的痘苗病毒晚期启动子P11和早期启...; 王艳丽李俊辉姜永萍夏俊裴磊冉多良陈化兰; 关键词：禽痘病毒绿色荧光蛋白 HA基因

一株H4亚型禽流感病毒全基因组序列测定及遗传演化分析被引量：5: 2011年; 2008年对我国南方活禽市场进行流行病学监测时从鸭体内分离鉴定一株H4亚型禽流感病毒(AIV),命名为A/duck/Guangxi/912/2008(H4N2)(缩写为DK/GX/912/08)。为了解该株H4亚型AIV的来源、特征及其分子演化规律,本研究对其全基因序列进行测定,并与GenBank登录的相关病毒进行遗传演化分析。结果表明:DK/GX/912/08HA基因切割位点附近的氨基酸序列(PEKASR↓GLF)符合低致病力AIV的特征,其分子遗传演化关系属于东半球谱系的欧亚分支;NA基因与A/duck/Jiangxi/1286/2005(H5N2)在同一分支内,核苷酸同源性为98.1%;PB2基因与A/duck/Nanchang/4-165/2000(H4N6)处于同一分支;而NS基因与A/duck/Jiangxi/1786/03(H7N7)同源性最高。因此,推测DK/GX/912/08可能是不同来源的基因在鸭体内经过复杂重组演变的一株重组病毒。; 刘丽玲李雁冰张翼段振华施建忠田国彬曾显营刘娣华育平陈化兰; 关键词：禽流感病毒遗传演化分析

H5N1亚型禽流感病毒血凝素蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：4: 2011年; 为制备抗H5N1禽流感病毒(AIV)的单克隆抗体(MAb),本研究以灭活的H5N1亚型A/Chicken/Guangdong/S2261/2009(H5N1GD261)株免疫4周龄～6周龄BALB/c雌鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,经间接ELISA及HI筛选获得了3株能稳定分泌抗HA的MAb杂交瘤细胞,分别命名为1A4、2F5和3D3。MAb亚类鉴定表明,2F5为IgM类,其它为IgG2a亚类,轻链均为κ链。经血凝抑制检测,3株MAb均能与H5亚型的AIV结合,并具有较好的型广谱性。; 崔佳莹李印于扬张文亮邓国华陈化兰; 关键词：禽流感病毒血凝素单克隆抗体血凝抑制

环洞庭湖区活禽批发市场和水禽场H6亚型禽流感监测被引量：1: 2015年; 为了解环洞庭湖区活禽批发市场和水禽场H6亚型禽流感病毒的分布和流行情况,分别于2009—2011年对环洞庭湖地区活禽批发市场、2011—2013年对水禽场的H6亚型禽流感进行了系统监测。对在活禽批发市场上采集的拭子样品先由尿囊腔接种SPF鸡胚,然后用血凝试验(HA)测定所收集的尿囊液,对HA测定有滴度的再进行血凝抑制试验(HI),并与RT–PCT方法相结合鉴定病毒的亚型。检测结果显示:在环洞庭湖区的5个活禽批发市场上都分离到H6亚型禽流感,并且在鸡、鸭、鹅拭子中都分离到该病毒,总的分离率为6.49%;水禽场H6亚型禽流感病毒群体阳性率达3.6%,拭子的H6亚型病毒分离率为0.29%,活禽批发市场鸭拭子H6亚型禽流感病毒分离率为9.58%,表明市场环节水禽H6亚型禽流感的隐性带毒率比养殖环节高,在一定程度上说明禽流感在活禽批发市场存在水平传播的风险。; 黄建龙王昌建邓国华范仲鑫何世成朱春霞唐小明刘道新; 关键词：洞庭湖区

H5N1亚型AIV NS1基因在大肠杆菌中的表达: 2007年; 根据已测得的H5N1亚型禽流感病毒的NS基因序列,设计并合成一对特异性引物NS1U/NS1L,利用RT-PCR方法扩增出该毒株的NS1基因。将酶切处理后的基因片段定向克隆到原核表达载体pET-32a(+)上,通过酶切分析及序列测定,鉴定出了NS1基因片段的阳性重组子。转化BL21大肠杆菌感受态细胞后,经IPTG诱导和SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,成功表达出大小约45.0kD的NS1融合蛋白,表达产物主要存在于包涵体中。用West-ern-Blotting证实重组融合蛋白可以特异性地被标准阳性血清所识别。; 刘畅焦培荣刘威龙侯勇跃陈化兰; 关键词：H5N1亚型禽流感病毒非结构蛋白克隆

用鸡体偏嗜性密码子对H5亚型禽流感病毒HA基因的优化与构建及其DNA疫苗体外表达研究: 不同物种间细胞在蛋白翻译过程中具有密码子使用的偏嗜性,鸡与A型流感病毒保护性免疫原HA蛋白氨基酸密码子使用频率存在着明显差异.为此,利用寡核苷酸合成、重叠延伸PCR及限制酶切法构建了密码子优化的A/Goose/Guang...; 姜永萍李呈军张洪波步志高张芳芳于康震陈化兰; 关键词：HA基因重叠延伸PCR 间接免疫荧光 DNA疫苗; 文献传递