华中农业大学生命科学技术学院农业微生物学国家重点实验室
- 作品数：1,412 被引量：6,611H指数：33
- 相关作者：周俊初李林杨尔宁陈超然王莉更多>>
- 相关机构：长江大学动物科学学院华中科技大学环境科学与工程学院武汉工程大学化工与制药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生环境科学与工程更多>>
- 适用于链霉菌大片段基因组DNA克隆和异源表达的细菌人工染色体(BAC)载体的构建及应用被引量：9
- 2012年
- 【目的】很多链霉菌来源的天然产物的生物合成基因簇往往很大,用传统的cosmid载体很难完整的克隆和异源表达。本研究通过载体改造,成功构建出一个新的细菌人工染色体(BAC)载体,用于链霉菌来源的天然产物生物合成基因簇的克隆及异源表达实验。【方法】从复合型载体pCUGIBAC1出发,通过λRED介导的PCR-targeting方法,用链霉素抗性基因替换掉原有的氯霉素抗性基因标记,同时插入链霉菌中常用的安普拉霉素抗性标记、转移起始位点oriT、φC31整合酶基因int、整合位点attP等元件。【结果】成功构建出可装载链霉菌大片段DNA的BAC载体pMSBBACs。使用pMSBBACs构建出链霉菌U27的基因组BAC文库,平均插入片段大小为100 kb。选取其中一个大小为140 kb的BAC质粒进行功能验证,实验证明通过接合转移和原生质体转化的方法都能够将这个大型BAC质粒导入链霉菌模式菌株,并通过位点特异性重组整合到染色体中进行异源表达。【结论】BAC载体pMSBBACs可成功用于放线菌大片段基因组DNA的克隆和异源表达实验。
- 黄胜李娜周俊何璟
- 关键词：生物合成基因簇链霉菌异源表达
- 侵染我国芋的杆状DNA病毒分子鉴定及特异性检测被引量：8
- 2013年
- 采用已报道杆状DNA病毒属（Badnavirus）的通用检测引物BadnaFP／BadnaRP，从7份芋样品中扩增到Badnavirus病毒的RT／RNaseH基因保守区域，获得12个克隆序列，长度为576bp。序列分析结果显示，来自不同样品的克隆间核苷酸和氨基酸序列相似性分别为78．8％～99．5％和81．3％～99．5％；来自同一样品扩增产物的克隆间在序列上也存在较大差异，核苷酸和氨基酸序列相似性分别为89．6％～100％和92．7％～100％。在系统进化树中，本研究所获序列与Badnavirus病毒的亲缘关系相对较近，聚在同一簇，表明此病毒为Badnavirus属病毒，但与芋杆状病毒（Tarobacillifo硎virus，TaBV）序列相似性较低，核苷酸和氨基酸相似性分别为58．0％～62．2％和58．5％～64．1％，推测为杆状DNA病毒属的一个新种。根据所测定序列设计了用于该病毒检测的引物P197／P433，对51份芋样品检测结果表明，该引物可有效检测来源于我国芋的Badna—virus病毒。
- 施世明王彦芬王国平王利平徐文兴洪霓
- 关键词：PCR
- 16株快生型大豆根瘤菌生物学与分子生物学特性的比较研究被引量：8
- 1997年
- 以快生型大豆根瘤菌标准菌株ＵＳＤＡ２０５为对照，对自我国吉林省和湖北省土壤中分离的１５株快生型大豆根瘤菌的培养特性，碳氮源利用、生长速度、耐盐性、ｐＨ适应范围、天然抗药性、质粒图谱、Ｇ＋Ｃ克分子％、血清学特性和共生固氮效率进行了系统的比较研究。
- 何正国周俊初李阜棣T.A.Lie
- 关键词：快生型大豆根瘤菌生物多样性
- 微生物活动对富营养化湖泊底泥磷释放的影响被引量：16
- 2016年
- 目前,影响内源磷释放的物理、化学因素已有较为系统的研究,而微生物对磷释放的影响一直以来并未有确切的结论。针对上述问题,文章首先研究能够有效抑制水体微生物增殖的方法,并建立了能有效控制微生物活性的对照模型,在此基础上进一步研究微生物的存在对底泥磷释放的影响。结果表明,按50 mg/L添加量分别加入铜、铬和镉3种重金属离子,无法抑制上覆水中微生物的活性,而40%的甲醛溶液是较好的微生物抑制剂;当底泥和上覆水中微生物数量增加时,微生物的活动会导致泥水界面氧化还原电位降低,同时细菌代谢过程产生的酸类会溶解底泥中难溶的磷酸盐,从而促进底泥磷的释放,释放量可达底泥总磷原有含量的20.11%;反之,底泥会吸附上覆水中的磷,增加量占底泥原有总磷的15.02%。
- 钱燕陈正军吴定心梁运祥
- 关键词：富营养化微生物甲醛磷
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒侵入和释放依赖细胞膜胆固醇被引量：2
- 2011年
- 胆固醇是细胞膜脂质的重要组成成分.目前的研究发现细胞膜胆固醇在病毒的感染中扮演十分重要的作用.本研究对细胞膜胆固醇在猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染MARC-145细胞中的作用进行了探讨.通过TCID50检测和Real-Time RT-PCR分析发现,用胆固醇萃取剂甲基-β-环糊精预处理消除细胞膜胆固醇可显著抑制PRRSV的感染,并呈剂量依赖性;而补充外源性胆固醇后可部分恢复PRRSV的感染性,提示PRRSV感染能力的下降确实是由于细胞膜胆固醇的去除而导致的.进一步的研究证实,细胞膜胆固醇的去除对PRRSV感染性的影响主要是通过影响PRRSV的侵入和释放过程.上述结果表明,细胞膜胆固醇是影响PRRSV感染的一个重要因子.
- 孙颖肖少波王荡罗锐李彬陈焕春方六荣
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒胆固醇
- 一种改性微生物吸附剂的制备及其对镉离子的吸附特性被引量：9
- 2021年
- 改性生物吸附剂具有更好的重金属离子去除能力,成为近年来研究热点.本研究通过向菌株拉乌尔菌Raoultella sp. X13生长培养基中添加特定盐获得改性吸附剂,并研究了其镉离子(Cd^(2+))吸附特性.研究结果表明,相比原始菌体X13,经KCl、K_(2)SO_(4)、KH_(2)PO_(4)、(NH_(4))_(2)SO_(4)和NH4Cl改进的生长培养基制备的吸附剂提高了对Cd^(2+)吸附效果.其中,NH4Cl改性的拉乌尔菌Raoultella sp. X13(命名为R5-1)对Cd^(2+)吸附能力显著增加,达66.40 mg·g^(-1),增加了47.30%.这一显著变化主要依赖于生长代谢引起的细胞表面结构变化.Cd^(2+)吸附特性研究结果表明生物吸附过程受溶液pH、初始金属浓度和接触时间的影响.Langmuir等温线模型和伪二级动力学模型更加符合吸附剂R5-l对Cd^(2+)的吸附数据. FTIR分析表明R5-l表面存在多种功能位点并可能参与金属离子的结合,例如-OH,-CH_(2),N-H,-COO,磷酸盐或硫酸盐等官能团.模拟实验结果表明吸附剂R5-l可以有效修复废水中多种金属离子.因此,本研究获得的改性吸附剂R5-l可以作为重金属Cd^(2+)的潜在微生物修复剂,并为高效,简便,环保地制备改性吸附剂提供一定的参考.
- 徐韶足王瑶毕文龙周珺陈雯莉
- 关键词：生物吸附剂生物吸附
- 一株自养硝化细菌培养条件的优化被引量：2
- 2013年
- 针对前期筛选的自养硝化杆菌(Nitrobacter)菌株y3-2,以实时荧光定量核酸扩增检测系统(qPCR)测定的菌液终浓度为指标,设计单因素试验和正交试验对其培养基和培养条件进行优化。结果表明,优化的硝化杆菌y3-2的培养基中CaCO3、Na2CO3、NaNO2浓度分别为0.5、1.0、0.5 g/L。最佳培养条件为培养温度28℃、pH 8.0、摇床转速200 r/min。优化后硝化杆菌y3-2的发酵周期由优化前的7 d缩短至4 d,菌液终浓度达到4.31×109CFU/mL。
- 雷禹吴定心梁运祥
- 关键词：培养基
- Escherichia coli O157:H7在校园土壤中的存活:表明小区域地质变化调控病原菌的存活
- Escherichia coli O157：H7是一种人畜共患的高致病性病原菌,它可以随着粪肥的施用从动物体内进入土壤,进而污染土壤和地下水,对公众的健康造成危害.它在大尺度的空间范围的存活与土壤的众多性质有关,但是在小...
- 马文婷罗雪松黄巧云蔡鹏
- 关键词：ESCHERICHIACOLIO157:H7存活土壤性质
- 茯苓菌丝体液体培养条件研究被引量：11
- 2010年
- 比较研究了两个茯苓菌株的菌丝生长速度,比较了固体接种、液体接种对茯苓菌丝体生物量的影响,采用正交试验探究了不同碳源浓度、不同氮源浓度和不同初始pH值对茯苓菌丝生物量和茯苓发酵液中胞外多糖的影响.结果表明:其作用大小是碳源>氮源>初始pH值.以菌丝体干重为指标,茯苓液体发酵的最适发酵培养基为:碳源(葡萄糖)3%,氮源(酵母浸膏0.51%,蛋白胨0.4%),K2HPO40.1%,KH2PO40.046%,MgSO4.7 H2O0.05%,水1L,最适初始pH值5.5;以多糖为指标,茯苓液体发酵的最适发酵培养基为:碳源(葡萄糖)3.5%,氮源(酵母浸膏0.637%,蛋白胨0.5%),K2HPO40.1%,KH2PO40.046%,MgSO4.7 H2O0.05%(以上百分数均为质量分数),水1 L,最适初始pH值5.0.
- 胡国元游慧珍董兰兰戴欣鹏李伟伟胡婧李友国
- 关键词：茯苓碳源氮源初始PH值正交试验
- 多糖水解酶处理烟叶的香气成分鉴定被引量：2
- 2012年
- 以α-淀粉酶、纤维素酶和果胶酶组成的多糖水解酶处理烟叶,运用蒸馏萃取法提取烟叶中的香气成分,并结合气相色谱-质谱法(GC-MS)对香气成分进行了定性定量分析。结果表明,多糖水解酶处理的烟叶中水溶性糖含量提高4.29%;烟叶中的香气物质总量提高11.8%;整体口感得到改善,香气的质和量均得到提高,烟气细腻柔和,刺激性、杂气和余味残留有所降低。
- 胡璇魏敏罗诚浩刘剑峰李丹陈守文
- 关键词：多糖水解酶烟叶香气成分水溶性糖
