山东信得药业有限责任公司
- 作品数：16 被引量：13H指数：3
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- 猪IFN-γ基因的克隆与在大肠杆菌的高效表达与复性研究
- 根据Gene Bank中猪IFN-γ基因设计引物对,利用RT-PCR技术克隆并测定了猪外周血白细胞IFN-γ基因,定名为poIFNR1,其ORF长度为501个核苷酸,其成熟肽包含144个氨基酸。将其成熟肽基因序列根据大肠...
- 马凤龙李朝阳乔彦良傅兴伦赵怀龙贾世玉陈如明陈国柱
- 关键词：包涵体复性
- 猪IFN-γ基因的克隆与在大肠杆菌的高效表达与复性研究
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- 马凤龙李朝阳乔彦良傅兴伦赵怀龙贾世玉陈如明陈国柱
- 关键词：包涵体基因克隆原核表达
- 重组胸腺素α1在大肠杆菌中的表达与活性检测
- 重组胸腺素alpha 1(Tα1)基因在大肠杆菌中进行表达。根据大肠杆菌密码子偏爱性合成Tα1基因并连接到pMD18-T载体上,双酶切回收的Tα1插入到pET32a后,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导,经15%SDS-...
- 马凤龙崔雪志傅兴伦刘焕奇
- 关键词：胸腺素Α1大肠杆菌可溶性表达淋巴细胞增殖
- 文献传递
- 鸡β-防御素在大肠杆菌中的高效表达及复性被引量：3
- 2007年
- 鸡β-防御素(gallinacin-3,Gal3)是鸡体内重要的防御因子,本试验研究了鸡Gal3融合蛋白在大肠杆菌中高效表达的规律,并探索了重组蛋白质的复性工艺.结果表明,加入诱导剂后1h,开始有可检出量的重组蛋白质表达,2h的表达水平已接近最大量;化学诱导剂IPTG 0.2～1.2mol/L对重组蛋白的产量没有明显影响.经Lablmage软件分析,融合蛋白的产量可达菌体总蛋白的35%以上,且主要以包涵体形式存在.将所获包涵体用8mol/L尿素溶解后,分步稀释于含有氧化型谷胱甘肽和还原型谷胱甘肽的复性系统中,重组蛋白得到完全复性.12mg/L复性的重组鸡Gal3能抑制肠炎沙门氏菌的生长,24mg/L能抑制肠致病型大肠杆菌的生长.
- 邢海云高英杰宁官保赵建增乔彦良李朝阳
- 关键词：大肠杆菌融合蛋白抑菌作用
- 蛋鸡α-干扰素基因的克隆与在大肠杆菌的高效表达与复性研究
- 根据GeneBank中鸡IFN-α基因设计引物对,利用PCR技术克隆并测定了莱航鸡(SPF)的IFN-α基因,定名为ChIFN-Sl,与GeneBank中IFN-α比较,ORF长度均为582个核苷酸,其成熟肽包含162个...
- 马凤龙李朝阳乔彦良傅兴伦赵怀龙贾世玉陈如明陈国柱
- 关键词：包涵体PCR技术
- 蛋鸡α-干扰素基因的克隆与在大肠杆菌的高效表达与复性研究
- 根据Gene Bank中鸡IFN-α基因设计引物对,利用PCR技术克隆并测定了莱航鸡(SPF)的IFN-α基因,定名为ChIFN-Sl,与GeneBank中IFN-α比较,ORF长度均为582个核苷酸,其成熟肽包含162...
- 马凤龙李朝阳乔彦良傅兴伦赵怀龙贾世玉陈如明陈国柱
- 关键词：包涵体复性
- 文献传递
- 牛乳素Lfcin B基因的合成及其在酵母菌中的表达研究被引量：6
- 2008年
- [目的]为临床研究和治疗某些病原微生物引起的感染提供依据。[方法]参照LfcinB的氨基酸序列,利用化学合成法合成LfcinB基因并克隆到pPIC9K载体中,转化到酵母菌GS115感受态细胞中,用抗性选择标记G418筛选出高拷贝酵母菌转化子。利用甲醇诱导表达重组LfcinB,经Tricine-SDS-PAGE电泳检测目的蛋白牛乳铁蛋白素的表达情况,同时通过体外抑菌试验检测表达产物的抑菌活性。[结果]提取的酵母菌DNA扩增出1条预期的560bp左右的特异性条带。目的基因已经成功克隆到pPIC9K载体中,并转到酵母菌GS115中而且获得了表达。重组酵母表达上清中牛乳铁蛋白素抗菌肽对沙门氏肠炎杆菌的抗菌活性为42.857IU/ml,表明LfcinB基因的酵母表达载体构建成功。[结论]该研究证明利用化学合成法直接合成编码LfcinB的DNA构建真核表达载体、通过生物发酵工程来制备LfcinB是可行的。
- 马凤龙张瑜刘焕珍乔彦良傅兴伦李朝阳
- 关键词：基因表达抑菌活性
- 猪IFN-γ基因的克隆与在大肠杆菌的高效表达与复性研究
- 根据GeneBank中猪IFN-γ基因设计引物对,利用RT-PCR技术克隆并测定了猪外周血白细胞IFN-γ基因,定名为poIFNRl,其ORF长度为501个核苷酸,其成熟肽包含144个氨基酸。将其成熟肽基因序列根据大肠杆...
- 马凤龙李朝阳乔彦良傅兴伦赵怀龙贾世玉陈如明陈国柱
- 关键词：包涵体复性
- 文献传递
- 牛乳素Lfcin B基因的合成及其在酵母菌中的表达研究
- 利用化学合成法直接合成编码牛乳素Lfcin B的DNA序列并克隆入pPIC9K中,然后通过化学转化法导入酵母菌GS115中,用G418筛选高拷贝转化子,利用甲醇诱导表达重组Lfcin B。通过Tricine-SDS-PA...
- 马凤龙张瑜傅兴伦乔彦良李朝阳刘焕珍
- 文献传递
- 蛋鸡α-干扰素基因的克隆与在大肠杆菌的高效表达与复性研究
- 根据Gene Bank中鸡IFN-α基因设计引物对,利用PCR技术克隆并测定了莱航鸡(SPF)的IFN-α基因,定名为ChIFN-Sl,与Gene Bank中IFN-α比较,ORF长度均为582个核苷酸,其成熟肽包含16...
- 马凤龙李朝阳乔彦良傅兴伦赵怀龙贾世玉陈如明陈国柱
- 关键词：包涵体复性
