重庆医科大学附属儿童医院儿童发育疾病研究省部共建教育部重点实验室
- 作品数：188 被引量：877H指数：14
- 相关作者：曾佑群马超赵利华徐明灯吴扬更多>>
- 相关机构：复旦大学附属儿科医院重庆大学生物工程学院生物医学工程系重庆大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- PEG3启动子启动铁蛋白报告基因在干细胞瘤变时特异表达及体外磁共振成像被引量：2
- 2019年
- 目的探讨利用肿瘤特异性启动子PEG3驱动MRI报告基因铁蛋白重链(ferritin heavy chain 1, FTH1)在干细胞瘤变时特异性表达并进行MRI检测的可行性。方法构建PEG3启动子控制FTH1表达的病毒载体PEG3-FTH1-LV,感染大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs),获得MSCs-PEG3-FTH1细胞,MSCs和MSCs-CMV-FTH1作为对照,通过与大鼠胶质瘤细胞C6间接共培养2周诱导其瘤变为TMSCs、TMSCs-PEG3-FTH1、TMSCs-CMV-FTH1。观察细胞形态,检测细胞迁移能力、细胞增殖速度及细胞表面抗体CD29、CD34、CD45、CD90的表达,裸鼠皮下成瘤实验验证细胞瘤变,Western blot、普鲁士蓝染色、细胞透射电镜和磁共振成像(MRI)检测细胞诱导前后FTH1基因的表达。结果 TMSCs细胞较MSCs细胞变小,多呈纺锤状,增殖速度加快,迁移能力增强,CD34、CD45表达增加,CD90表达减少(P<0.05),裸鼠皮下成瘤阳性;Western blot结果显示:MSCs、MSCs-PEG3-FTH1、TMSCs细胞不表达或少量表达FTH1蛋白,而MSCs-CMV-FTH1、TMSCs-PEG3-FTH1、TMSCs-CMV-FTH1细胞均大量表达FTH1蛋白(P<0.05);普鲁士蓝染色和细胞透射电镜观察到MSCs-CMV-FTH1、TMSCs-PEG3-FTH1、TMSCs-CMV-FTH1细胞内铁颗粒,而在MSCs、MSCs-PEG3-FTH1、TMSCs细胞内无明显铁颗粒,MRI显示TMSCs-PEG3-FTH1细胞信号较MSCs-PEG3-FTH1细胞信号明显降低。结论 PEG3启动子可驱动报告基因FTH1在干细胞瘤变时特异性表达并能被MRI检测。
- 孙君蔡金华秦勇李晓朦仇嘉文
- 关键词：磁共振成像骨髓间充质干细胞
- 糖原合成酶激酶3β与白血病被引量：1
- 2013年
- 糖原合成酶激酶3B（GsK3β）是一种保守的胞质丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶，既可以负调控与白血病相关的经典Wnt、Akt等信号通路，也可以正调控转录核因子（NF—κB）、非经典Wnt、溶酶体凋亡等信号通路，从而调节白血病细胞的增殖、分化和凋亡。目前，多种GSK3β抑制剂以及激活剂在白血病研究中均有报道，它们在减少化疗不良反应、逆转耐药、增强对白血病细胞的杀伤等方面发挥重要作用。GSK3β有望成为白血病分子靶向治疗的靶点。
- 王妍徐酉华
- 关键词：糖原合成酶激酶3白血病信号传导分子靶向治疗
- 中重度儿童支气管哮喘与生长发育指标关系对照研究分析被引量：9
- 2011年
- 目的 观察中重度儿童支气管哮喘与生长发育的关系.方法 选择3～10岁中重度持续状态的哮喘患儿389例,并且按病情严重程度分为中度组（226例）和重度组（163例）,各组按年龄又分为3～岁（85例和63例）、5～岁（76例和52例）和7～10岁（65例和48例）3个组,选择同期同年龄段正常儿童298名作为对照组,其中3～岁96名、5～岁92名和7～10岁110名,分别测量其身高、体重及肺功能.结果 3～岁重度组身高值、体重值、身高百分位数、体重百分位数、身高标准差的离差法（SDS）数值、体重SDS[分别为（98.54±7.75）cm、（14.87±2.46）kg、50.30%±16.31%、50.27%±18.29%、0.11±0.66、0.06±0.49]均低于同年龄段的中度组[分别为（103.58±5.48）cm、（16.60±2.21）kg、65.80%±18.54%、65.10%±18.92%、0.46±0.53、0.45±0.54]及对照组[分别为（105.60±6.29）cm、（17.82±2.82）kg、72.37%±11.37%、71.92%±2.82%、0.66±0.62、0.66±0.52],差异具有统计学意义（F值分别为7.295、8.034、15.246、10.745、8.026、10.864,P值均＜0.05）.5～岁重度组身高值、体重值、身高百分位数、体重百分位数、身高SDS、体重SDS[分别为（110.10±7.36）cm、（18.76±3.20）kg、45.86%±18.92%、41.69%±12.50%、-0.95±0.42、-0.23±0.34]均低于同年龄段的中度组[分别为（117.76±6.35）cm、（21.63±2.75）kg、61.81%±20.75%、61.79%±18.92%、0.36±0.62、0.38±0.56]及对照组[分别为（119.90±5.78）cm、（22.80±3.07）kg、68.97%±18.59%、66.27%±18.35%、0.57±0.65、0.48±0.63],差异具有统计学意义（F值分别为8.351、7.864、15.037、13.921、12.116、11.725,P值均＜0.05）.重度组7～10岁身高值、体重值、身高百分位数、体重百分位数、身高SDS、体重SDS[分别为（123.50±9.52）cm、（23.82±5.72）kg、45.81%±15.51%、42.63%±14.91%、-0.06±0.48、-0.02±0.61]均低于同年龄段的中度组[分别为（129.10±8.41）cm、（26.70±5.72）kg、66.84%±16.09%、64.
- 吴雪郡黄英王莹龚财惠
- 关键词：哮喘儿童
- 超声微泡介导ABCB1a基因siRNA质粒转染的效率及对ABCB1a和P-gp表达的影响
- 2012年
- 目的研究超声微泡介导ABCB1a基因siRNA质粒转染L2RYC细胞的效率以及对ABCB1a水平和P-糖蛋白(P glycoprotein,P-gp)表达的影响。方法制备脂质微泡;设计4对siABCB1a序列,并构建4种真核表达质粒pSES-siABCB1a;转染L2RYC细胞(单纯质粒组、质粒+微泡组、质粒+超声组、质粒+微泡+超声组),另设空白对照组。采用流式细胞术检测质粒的转染效率;实时荧光定量PCR及Western blot检测转染后L2RYC细胞中ABCB1a基因及P-gp的表达。结果 4种pSES-siABCB1a质粒经PCR、双酶切及测序证实构建正确;质粒+微泡+超声组pSES-siABCB1a质粒可高效转染L2RYC细胞,可见荧光表达,转染效率为(49.35±5.89)%;转染后ABCB1a基因mRNA及P-gp的表达均明显降低(P<0.05)。结论超声微泡可促进外源基因体外转染L2RYC细胞,siABCB1a能有效抑制ABCB1a基因和P-gp的表达。
- 何昀李奇林温晟刘东尧李明勇王强魏光辉
- 关键词：超声微泡转染P-糖蛋白
- 磁共振报告基因magA的慢病毒载体质粒构建及体外表达
- 2011年
- 目的构建携带磁共振报告基因magA的慢病毒载体质粒,初步检测其体外转铁效应。方法采用人工DNA合成技术合成目的基因magA,DNA重组技术将magA基因连接入慢病毒表达载体质粒pLenti-EGFP,酶切及DNA测序鉴定重组质粒pLenti-EGFP/magA的准确性。包装、包膜及重组质粒共转染293FT细胞包装慢病毒,收集包被magA基因的慢病毒上清并感染293T靶细胞,细胞培养基内加入500μmol/L枸橼酸铁连续4次传代,荧光显微镜观察并提取细胞行台盼蓝排除实验和普鲁士蓝染色,同时设立对照组行同样方法实验。结果酶切和DNA测序分析证实magA基因准确克隆入慢病毒表达载体设计位点,合成目的基因序列与GenBank中magA序列完全一致。荧光显微镜下观察包装细胞293FT细胞质内有大量绿色荧光表达,病毒滴度达到108 Tu/μl。慢病毒感染293T靶细胞后,细胞内稳定表达EGFP,且效率>80%。实验组及对照组台盼蓝拒染率分别为(92.80±2.65)、(93.50±1.29),2组拒染率差异无统计学意义(P>0.05)。普鲁士蓝染色发现实验组细胞内有大量蓝染铁颗粒形成,对照组呈阴性。结论 成功构建了携带磁共振报告基因magA的慢病毒表达载体,证实了magA基因在哺乳动物293T靶细胞内的转铁作用。
- 秦勇蔡金华郑鹤琳刘官信王世一刘波
- 关键词：报告基因磁共振成像慢病毒载体
- 德氮吡格影响人肝癌细胞株QGY-7701亚细胞的蛋白质组学研究
- 2011年
- 目的观察德氮吡格（TNBG）对人肝癌细胞QGY-7701亚细胞蛋白表达的影响，探讨其影响脂代谢的分子机制。方法分别提取TNBG处理前后人肝癌细胞QGY-7701的细胞质、细胞膜和细胞核蛋白进行双向电泳，PDQuest7．4．0软件分析比对图像，采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术（MALDI—TOF-MS）鉴定差异蛋白质点。结果TNBG作用于人肝癌细胞QGY-770172h后，细胞质的差异表达蛋白质点有56个，细胞膜的差异表达蛋白质点有65个，细胞核的差异表达蛋白质点有34个，共计155个。利用MALDI—TOF-MS技术鉴定出其中33个差异表达蛋白质点，其中包括与脂质合成有关的10个蛋白质点和与脂质降解、转运有关的7个蛋白质点，如3-羟基-3甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶、角鲨烯合成酶、低密度脂蛋白受体、三磷酸腺柠檬酸裂解酶、甘油醛-3-磷酸脱氢酶、甘油-3-磷酸酰基转移酶、长链酯辅酶A脱氢酶等，这些都是固醇调节元件结合蛋白调控的靶基因。结论TNBG可能通过固醇调节元件结合蛋白途径增加胆固醇和甘油三酯合成，导致肿瘤细胞内脂滴大量聚积。
- 袁拥华杨晓兰李伟郑小红谷容余瑜
- 关键词：肝细胞蛋白质组学脂代谢障碍德氮吡格
- 出生时抗氧化维生素及重金属水平对两岁幼儿智力发育影响的相关分析被引量：14
- 2011年
- 目的 分析出生时抗氧化维生素和重金属水平与2岁时智力发育的关系,探讨早期抗氧化维生素对重金属损害智力发育的保护作用.方法 采取前瞻性队列研究,随机选取重庆远郊150对产妇及其新生儿.分别采用反相高效液相色谱法（HPLC）、AMA-254液/固相水银分析仪和PE-800 Zeeman原子吸收光谱仪测定母血和脐血维生素A、E、C及铅、镉和汞水平,对产妇问卷调查,幼儿2岁时用Gesell发育量表评估智力发育.结果 资料齐全共111对,校正混杂因素后,脐血汞水平与Gesell各能区发育商（DQ）均呈负相关（β=-0.486,β=-0.716,β=-0.846,p=-0.935,β=-0.702,P均＜0.05）;脐血维生素E水平与运动、适应、语言和平均DQ均呈正相关（β=0.475,β=0.458,β=0.403,β=0.395,P均＜0.05）.将重金属和维生素水平同时纳入回归模型后,脐血维生素E水平与运动、适应和平均DQ仍呈正相关（β=0.449,β=0.412,β=0.349,P均＜0.05）;脐血汞水平与适应、语言、个人-社会及平均DQ均呈负相关（B=-0.397,β=-0.727,β=-0.935,β=-0.628,P均＜0.05）,与运动DQ的相关性无统计学意义（P=0.0890）.维生素A和维生素c不同水平组对Gesell各能区发育商均无明显影响（P均＞0.05）;而维生素E水平＞14.8 μmol/L组各能区发育商均高于≤14.8 μmol/L组,除个人-社会发育商外,差异均有显著意义（t=2.93,t=2.06,t=2.13,t=2.27,P均＜0.05）;脐血铅水平高组,其个人-社会DQ较低（x2=5.56,P=0.015）;脐血镉水平高组,其脐血维生素C水平较低（x2=7.62,P=0.006）;脐血汞水平高组,其维生素A胎盘转运率较低（x2=8.02,P=0.005）.结论 抗氧化维生素A、E、C与重金属铅、镉、汞之间可能有交互作用,出生时抗氧化维生素在重金属对儿童早期智力发育的影响中可能具有保护作用.
- 李廷玉张萱魏小平刘永芳瞿平刘友学陈洁
- 关键词：智力测验抗氧化维生素
- 儿童慢性咳嗽纤维支气管镜检查110例分析被引量：11
- 2011年
- 目的分析慢性咳嗽患儿纤维支气管镜(纤支镜)检查结果,探讨纤支镜术在儿童慢性咳嗽中的病因诊断价值和安全性。方法选取2009年1月至2009年12月在重庆医科大学附属儿童医院呼吸科住院,对常规治疗效果不佳并且咳嗽持续时间超过4周的110例患儿进行纤维支气管镜检查,并对结果进行回顾性分析。结果 110例患儿纤维支气管镜诊断依次为内膜炎症50例(45.5%)、气管支气管软化27例(24.5%)、气管支气管开口异常16例(14.5%)、气管支气管狭窄12例(10.9%)、气管支气管异物3例(2.7%)、支气管管壁囊泡样变性1例(0.9%)、喉软骨发育不良1例(0.9%);且在不同年龄组中,纤支镜检查结果不同(P<0.01)。特异性慢性咳嗽与非特异性慢性咳嗽的纤支镜诊断结果构成差异没有统计学意义(P>0.05)。纤支镜术后96.4%患儿未出现任何副反应,3.6%出现轻度副反应,未见任何严重副反应。结论纤支镜术对儿童慢性咳嗽的病因诊断具有重要价值,是一种安全有效的检查方法。
- 杨方方黄英李渠北代继宏舒畅袁小平赵华符州
- 关键词：慢性咳嗽儿童病因诊断
- 红光照射对大鼠缺氧缺血性脑损伤急性期凋亡因子表达的影响被引量：1
- 2013年
- 目的观察红光照射对大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）急性期凋亡因子Caspase名及Caspase-3表达的影响。方法采用随机数字表法将45只SD大鼠分为假手术组、缺氧缺血性脑损伤组（简称模型组）及红光照射组。采用经典Rice法将模型组及红光照射组大鼠制成HIBD模型，假手术组仅分离左颈总动脉后缝合。红光照射组于HIBD损伤后立即对其额顶部进行红光照射，连续照射3d。于制模后第3天时取各组大鼠损伤侧海马组织，采用实时PCR技术检测Caspase-8及Caspase-3 mRNA表达，采用Western blot技术检测Caspase-8及Caspase-3蛋白表达；采用免疫荧光法观察各组大鼠Caspase-8及Caspase-3定位并进行半定量分析。结果制模后第3天时发现模型组和红光照射组Caspase-8、Caspase-3基因及蛋白表达均较假手术组明显增强（P〈0．05）；红光照射组Caspase-8基因表达（1．55±0．12）及蛋白表达（0．70±0．18）、Caspase-3基因表达[（1．48±0．16）×10^-4]及蛋白表达（0．74±0．13）均较模型组显著降低（P〈0．05）。结论红光照射可通过抑制细胞凋亡因子Caspase-8、Caspase-3表达，减轻HIBD急性期神经细胞凋亡，从而发挥HIBD治疗作用。
- 陈龙江伟张小建李献超陈洁肖农
- 关键词：缺氧缺血性脑损伤红光照射细胞凋亡因子
- 660nm红光对大鼠坐骨神经钳压损伤的修复作用被引量：1
- 2013年
- 目的研究不同治疗参数的660nm红光照射对大鼠坐骨神经损伤修复作用。方法选取成年SD雄性大鼠45只，按随机数字表法分为对照组与治疗1、2、3、4组，每组9只。采用钳压法建立大鼠坐骨神经损伤模型，治疗1、2、3、4组分别采用不同参数（不同的功率密度和照射时间）的660nm红光照射损伤部位，每日1次，连续治疗21d。5组大鼠均于术前和术后第7、14、21天进行神经电生理测定，测定其坐骨神经复合肌动作电位（CMAP）潜伏期、波幅、坐骨神经传导速度，并于术前和术后第4、7、14、21天采用坐骨神经功能指数（SFI）进行行走功能评价。结果术后第21天，治疗1、2、3、4组大鼠的CMAP潜伏期和波幅与对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；治疗3组和对照组坐骨神经传导速度分别为（36．06±1．84）m／s和（30．60±5．04）m／s，差异有统计学意义（P〈0．05）；治疗2组、治疗3组和对照组SFI负值分别为（-10．88±11．16）、（-11．91±7．11）和（-21．26±4．79），组间差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论红光照射可促进大鼠坐骨冲经损伤修复，改善其行走功能。
- 李松赵阳李献超陈龙陈玉霞刘玲肖农
- 关键词：神经传导速度坐骨神经功能指数
