安徽桑尼生物技术研究所
- 作品数：19 被引量：26H指数：3
- 相关作者：智强朱年春赵丽萍陈晓明朱高刚更多>>
- 相关机构：安徽医科大学中国科学技术大学安徽省医学科学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组人白细胞介素10单克隆抗体的制备被引量：2
- 2000年
- 目的 制备重组人白细胞介素 10 (rhIL 10 )单克隆抗体。方法 应用鼠 鼠杂交瘤技术建立分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系 ,ELISA检测杂交瘤细胞培养上清、腹水效价 ,双向免疫扩散试验进行亚类鉴定 ,Giemsa染色镜下计数杂交瘤染色体数目。结果 获得了 2株能分泌抗rhIL 10单克隆抗体的杂交瘤细胞系 (1D3、2A3) ,无血清培养液效价为 1∶5 12、1∶2 5 6 ,腹水效价 1∶10 5、1∶10 4 。单克隆抗体为IgG2 亚类 ,染色体数目 98～ 10 3条。 2株杂交瘤细胞体外传代培养6个月以上 ,ELISA检测抗体滴度无明显降低。结论 制备的 2株单克隆抗体效价高 。
- 陈飞虎盛晓蓉吴亦伦陈敏珠智强
- 关键词：重组人白细胞介素10单克隆抗体杂交瘤
- 人内抑素在大肠杆菌中表达纯化及其抗肿瘤效应被引量：1
- 1999年
- 血管内皮细胞抑制素(简称内抑素,Endostatin)是XⅧ见胶元C端片段蛋白,分子量为20Kd,主要是通过抑制血管内皮细胞的生长和肿瘤血管的形成来达到抑制肿瘤的作用.内抑素对各种肿瘤模型均具有极强的抑制效果,且无耐药性和毒副作用,因此该药已成为肿瘤治疗的一个崭新的治疗途径和新药开发热点.我们通过PCR的方法先从人胚肝cDNA库中扩增得到0.54Kb的内抑素基因片段,将其克隆入pETz原核表达载体中,得到pET/ENDO重组表达质粒,将该质粒导入BL21宿主菌后进行诱导表达,结果表明:经IPTG诱导后,细菌表达的重组内抑素蛋白量占菌体蛋白的50%以上.将工程菌进行扩大培养和诱导,按常规提取包含体的方法制备包含体蛋白,所得蛋白的纯度即可达90%以上.将粗蛋白固定在肝素-Scpharosc 6B柱上脱脲,氧化复性,然后用NaCI洗脱即得到重组内抑素纯品,纯度大于95%.以ECV304人胚胎血管内皮细胞为靶细胞,用MTT微量法测定重组内抑素的生物学活性。
- 朱高刚智强
- 关键词：大肠杆菌抗肿瘤效应副作用
- 重组葡激酶致突变作用研究
- 2001年
- 目的 研究重组葡激酶的致突变作用。方法 CHL细胞染色体畸变试验 (±S9) ,剂量为 412 5、82 5 0、165 0 0AU/ml、Ames试验 (±S9) ,剂量为 16 5、165、165 0、165 0 0、165 0 0 0AU/ml)和小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验 (肌肉注射剂量为83 5、167 0、334 0mg/kg)。 结果 CHL细胞染色体畸变率均小于 5 % ;各剂量组TA97、TA98、TA10 0 、TA10 2 各试验菌株MR<2 ;各剂量组小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率均小于 2 0 0‰。
- 孙美芳王取南魏凌珍佘素贞徐德祥朱年春
- 关键词：重组葡激酶染色体畸变试验AMES试验微核试验
- 重组人内抑素对内皮细胞增殖的影响
- 2002年
- 目的 探讨原核表达的可溶性重组人内抑素(rhEndo)对ECV 30 4内皮细胞和原代培养兔主动脉内皮细胞增殖的影响。方法 利用酶标仪进行噻唑蓝 (MTT)法检测 ,同时采用倒置相差显微镜、电子显微镜、流式细胞仪、半胱天冬酶 3活性分析观察该内抑素对碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)刺激的血管内皮细胞增殖的影响。结果 该rhEndo明显抑制ECV 30 4细胞的增殖 ,MultiCycleDNACycle软件分析表明细胞增殖阻滞在G1期 ,流式细胞仪检测发现该内抑素可诱导ECV 30 4细胞凋亡 ,且与半胱天冬酶 3活性增强有关 ,但对原代培养的兔主动脉内皮细胞增殖并未产生明显的作用。结论 内抑素可明显抑制ECV 30 4细胞增殖并诱导其发生凋亡 ,但对原代培养的兔主动脉内皮细胞增殖没有明显的影响 ,这将有利于与血管新生有关的疾病如癌症等的治疗。
- 任斌朱年春智强罗昭锋王玉珍
- 关键词：重组人内抑素内皮细胞增殖细胞增殖细胞凋亡
- MTT法检测重组人内抑素对人内皮细胞增殖的影响被引量：2
- 2001年
- 目的 探讨观察重组人内抑素对人血管内皮细胞增殖影响的方法。方法 采用MTT法观察不同浓度重组人胎儿内抑素是否对碱性成纤维细胞生长因子刺激的人血管内皮细胞系ECV增殖产生抑制作用。结果 MTT法分析显示细胞活力与光密度改变之间存在线性关系 ,重组人内抑素可抑制胎儿血管内皮细胞ECV的增殖 ,半数抑制浓度约为 3 5 0mg·L-1。结论 MTT法检测重组人内抑素对人血管内皮细胞增殖的抑制作用准确可靠、操作简便。
- 智强任斌朱年春张礼秀刘建辉
- 关键词：内皮血管MTT法细胞增殖重组人内抑素血管生成抑制剂
- 重组人白细胞介素10对角朊细胞增殖及产生细胞因子的影响被引量：1
- 2004年
- 目的 :研究重组人白细胞介素 10 (rhIL 10 )对无血清培养的角朊细胞增殖和产生细胞因子的影响 ,探讨其治疗银屑病的作用机制。方法 :用四甲基偶氮唑蓝比色法 (MTT)测定其对细胞增殖的影响 ;小鼠胸腺细胞增殖法检测白细胞介素 1(IL 1) ;ELISA法检测白细胞介素 6 (IL 6 )、白细胞介素 8(IL 8)。结果 :重组人白细胞介素 10抑制角朊细胞增殖与IL 1、IL 6及IL 8的分泌 ,并呈剂量依赖关系。结论 :重组人白细胞介素 10抑制角朊细胞与细胞因子分泌 ,可能是治疗银屑病的作用机理之一。
- 陈飞虎陈敏珠李俊汪光宝智强
- 关键词：重组人白细胞介素10角朊细胞细胞因子银屑病
- rhIL-10对小鼠T淋巴细胞及NK细胞活性的影响被引量：2
- 1999年
- 目的 研究ｒｈ Ｉ Ｌ１０ 对小鼠免疫功能的影响。方法 用 Ｍ Ｔ Ｔ 还原法检测 Ｃｏｎ Ａ 诱导的 Ｔ 淋巴细胞增殖试验，中性红染色法检测 Ｎ Ｋ 细胞活性。结果 ｒｈ Ｉ Ｌ１０ 能抑制小鼠 Ｔ 淋巴细胞及 Ｎ Ｋ 细胞活性（ Ｐ＜ ００１） ，这种抑制作用随剂量增加而加强。结论 ｒｈ Ｉ Ｌ１０ 能抑制小鼠 Ｔ 淋巴细胞及 Ｎ Ｋ 细胞活性，并呈剂量依赖关系。
- 陈飞虎路景涛陈敏珠智强
- 关键词：白细胞介素10T细胞NK细胞RHIL-10小鼠
- 重组葡激酶及其在大肠杆菌中高效表达与纯化被引量：2
- 2001年
- 目的 研究高效表达葡激酶载体的构建及其体外表达与产物的纯化。方法 用PCR方法扩增葡激酶cDNA ,插入质粒pET 2 2b中构建成表达载体 ,转化入大肠杆菌BL2 1(DE3) ,经IPTG诱导表达 ,表达产物用Q Poros和S Sepharose纯化。 结果 经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列测定证明所构建质粒为葡激酶重组质粒 ,体外表达产物经离子交换纯化后HPLC纯度达 98%以上 ,SDS PAGE和WesternBlot实验证实该产物为葡激酶。结论 成功构建了重组葡激酶表达载体 ,并经表达纯化获得高纯度葡激酶 ,为产业化和临床应用奠定了良好基础。
- 智强周青任斌朱年春赵丽萍
- 关键词：聚合酶链反应大肠杆菌质粒HPLC离子交换重组葡激酶
- 重组人白细胞介素-10对银屑病患者外周血单个核细胞的作用
- 2000年
- 陈英智强朱年春
- 关键词：银屑病外周血单个核细胞
- 重组人白细胞介素10
- 重组人白细胞介素10治疗银屑病的新药研究项目。白细胞介素10是一种多功能细胞因子，与银屑病的发生密切相关，用其治疗银屑病FDA已进入Ⅱ期临床。该所采用基因工程技术，成功地进行了人白细胞介素10基因的克隆、表达与纯化并进行...
- 关键词：
- 关键词：银屑病药物
