徐州医科大学生物化学与分子生物学研究中心
- 作品数：7 被引量：6H指数：1
- 相关机构：东北师范大学心理学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金徐州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学哲学宗教更多>>
- 小鼠Neto2基因克隆及生物信息学分析被引量：1
- 2018年
- [目的]克隆并生物信息学分析小鼠Neto2基因。[方法]]通过RT-PCR方法从小鼠脑组织中克隆Neto2基因,利用生物信息学工具对其理化性质、蛋白结构和系统进化进行分析。[结果]成功构建载体pMD19T-m Neto2。小鼠Neto2基因CDS全长1 662 bp,编码553个氨基酸,该蛋白分子式为C2776H4312N762O826S32,相对分子质量62.6 k Da,等电点为7.18。结构分析显示,小鼠Neto2蛋白二级结构以无规卷曲为主(54.25%),该蛋白有两个跨膜区域及磷酸化修饰位点,无信号肽。小鼠Neto2与Grik2、Necab3、Kars、Grip1等蛋白存在相互作用。[结论]小鼠Neto2蛋白是含553个氨基酸残基的亲水蛋白,含62个磷酸化位点,参与调节神经生长发育、兴奋性神经递质传递、学习记忆等生物学功能。
- 赵小峰吴桂梅金磊汪瑶颜景芝
- 关键词：克隆生物信息学
- 华支睾吸虫排泄分泌抗原诱导RAW264.7细胞IL-33表达的研究
- 2016年
- 目的探讨华支睾吸虫排泄分泌抗原(ESA)对巨噬细胞系RAW264.7白介素33(IL-33)表达的影响,并探讨其机制。方法分别在ESA(60μg/ml)与RAW264.7细胞作用2、4、8、12h时检测IL-33 mRNA表达水平。用抗TNF-α中和抗体阻断TNF-α作用,通过RT-PCR及Western blot检测对ESA诱导RAW264.7细胞IL-33表达变化的影响。结果 ESA诱导RAW264.7细胞IL-33mRNA水平增高(P<0.05);利用TNF-α中和抗体阻断TNF-α作用,可显著降低IL-33mRNA的含量(P<0.05)。但ESA对IL-33蛋白水平的表达无显著影响(P>0.05)。结论 ESA可诱导RAW264.7细胞IL-33mRNA高表达,该作用部分依赖于自分泌的炎性因子TNF-α作用。
- 于倩程晓丹马锐华慧颜超汤仁仙郑葵阳
- 关键词：华支睾吸虫巨噬细胞肿瘤坏死因子-Α
- 腹侧被盖区多巴胺能神经元调控LPS处理小鼠的焦虑样行为被引量：1
- 2022年
- 目的:通过激活腹侧被盖区(VTA)多巴胺能神经元后观察脂多糖(LPS)处理小鼠焦虑样行为的变化,探讨小鼠VTA多巴胺能神经元对LPS处理小鼠焦虑样行为的调控作用。方法:成年雄性C57小鼠随机分为对照组(control)和LPS组,LPS组为按照100μg/kg腹腔注射脂多糖。1 d后进行旷场实验和高架十字迷宫实验检测小鼠的焦虑情绪。免疫组织荧光染色观察两组小鼠VTA区胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和c-Fos表达。成年雄性DAT-cre小鼠随机分为两组,即LPS组与LPS+化学遗传组,LPS造模前3周LPS组双侧VTA注射rAAV-DIO-mCherry病毒;LPS+化学遗传组双侧VTA注射rAAV-DIO-hM3Dq-mCherry病毒,造模1 d后两组小鼠腹腔注射N-氧化氯氮平(CNO),30 min后进行旷场实验和高架十字迷宫实验。结果:旷场实验中,LPS组小鼠进入中央区域的距离与对照组相比明显减少(P<0.05),而运动距离无统计学差异(P>0.05)。高架十字迷宫实验中,LPS组小鼠在进入开放臂的探索时间与对照组比明显减少(P<0.05)。与对照组相比,LPS组小鼠脑内VTA区GFAP表达上调,c-Fos表达下降;化学遗传结果显示,与LPS组相比,激活小鼠VTA区多巴胺能神经元后LPS小鼠进入旷场中央区域的距离与进入高架十字迷宫开臂时间明显增加(P<0.05)。结论:LPS处理的小鼠VTA区星形胶质细胞活化增强,表现出焦虑样行为,激活VTA多巴胺能神经元改善了LPS处理小鼠的焦虑样行为。
- 井思琪仝坤王德娟
- 关键词：多巴胺能神经元小鼠
- 脯氨酸羟化酶抑制剂FG-4592抑制脂多糖诱导的星形胶质细胞炎症反应被引量：3
- 2022年
- 目的观察脯氨酸羟化酶抑制剂FG-4592对脂多糖(LPS)诱导的星形胶质细胞炎症反应的影响,并探讨其分子机制。方法①星形胶质细胞C8-D1A分为细胞对照组和FG-4592(10,20和40μmol·L^(-1))组,药物处理6 h后,采用CCK-8法检测细胞存活率,Western印迹法检测低氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白表达水平,实时定量多聚酶链反应(RT-qPCR)检测葡萄糖转运蛋白1(Glut1)、血管内皮生长因子(VEGF)和促红细胞生成素(EPO)mRNA表达水平。②C8-D1A细胞分为细胞对照组、FG-4592组(FG-459240μmol·L^(-1)处理7 h)、LPS模型组(LPS 100μg·L^(-1)处理6 h)和LPS+FG-4592组(FG-459210,20和40μmol·L^(-1)预处理1 h后加入LPS 100μg·L^(-1)共同处理6 h),采用RT-qPCR检测白细胞介素6(IL-6)、IL-1β和肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA表达水平。③原代小鼠星形胶质细胞分组和处理同②,LPS+FG-4592组FG-4592剂量为40μmol·L^(-1),采用Western印迹法检测HIF-1α蛋白表达水平,RT-qPCR检测HIF-1α,IL-6,IL-1β和TNF-αmRNA表达水平。④C8-D1A细胞分组和处理同③,Western印迹法检测Toll样受体4(TLR4)、磷酸化NF-κB抑制因子α(p-IκBα)和p-P65蛋白表达水平。结果①与细胞对照组相比,FG-459210,20和40μmol·L^(-1)组C8-D1A细胞存活率无显著差异,HIF-1α蛋白水平显著上升(P<0.01),Glut1,VEGF和EPO mRNA水平显著上升(P<0.05,P<0.01)。②与细胞对照组相比,LPS模型组C8-D1A细胞IL-6,IL-1β和TNF-αmRNA表达水平显著上升(P<0.01);与LPS模型组相比,LPS+FG-4592组IL-6,IL-1β和TNF-αmRNA表达水平显著下降(P<0.05,P<0.01)。③与细胞对照组相比,FG-4592组和LPS+FG-4592组原代小鼠星形胶质细胞HIF-1α蛋白水平显著上升(P<0.01),HIF-1αmRNA水平无显著差异;LPS模型组原代小鼠星形胶质细胞IL-6,IL-1β和TNF-αmRNA表达水平显著上升(P<0.01)。与LPS模型组相比,LPS+FG-4592组原代小鼠星形胶质细胞IL-6,IL-1β和TNF-αmRNA表达水平显著下降(P<0.01)。④与细胞对照组相比,LPS模型组C8-D
- 阮倩倩赵名耿亚楠胡月史子毕朱玲玲侯筱宇
- 关键词：星形胶质细胞脂多糖神经炎症
- 奖赏预测误差对项目和联结记忆影响的分离:元记忆的作用被引量：1
- 2023年
- 选取奖赏预测误差(reward prediction error,RPE)效价和凸显性为自变量,通过3个实验考察RPE对项目和联结记忆影响的差异及其元记忆机制。被试在对图片的奖赏猜测-奖赏反馈中形成RPE,且需要同时记忆图片(项目)以及图片-奖赏联结,最后进行记忆测试。结果表明,(1)联结记忆成绩存在RPE正效价和低凸显性优势,其信心判断准确性在RPE正效价时更高,而项目记忆成绩存在RPE负效价和高凸显性优势;(2)在编码过程中,RPE正效价和低凸显性提高了个体的瞳孔变化均值和峰值;RPE低凸显性增加了分值注视时间,缩短了图片注视时间;(3)增加RPE水平后,RPE对项目和联结记忆成绩的分离影响仍稳定存在。这些结果表明,RPE对项目和联结记忆的影响存在分离:编码阶段中,个体以RPE效价和凸显性为线索,通过元记忆控制对项目和联结记忆加工中的认知资源进行差异性分配;提取阶段中,RPE正效价提高了对联结记忆提取的元记忆监测水平。
- 龙翼婷姜英杰崔璨岳阳
- 关键词：眼动情景记忆元记忆
- 家兔Neto2蛋白质的生物信息学分析
- 2018年
- 为分析和了解家兔Neto2蛋白质的基本信息,研究其结构和功能。利用NCBI、Ex PASy和CBS网站中的各种分析工具,对家兔Neto2蛋白质的结构特征和功能进行分析。结果表明,家兔Neto2蛋白质由518个氨基酸残基组成,等电点为6. 34,分子量为58 742. 06 u,为不稳定的跨膜亲水蛋白质;二级结构主要由α-螺旋、折叠延伸链和无规卷曲构成,含2个CUB和1个LDLa保守结构域,有62个磷酸化位点和3个糖基化位点,三级结构中长链卷曲分布较多;系统进化树分析发现,家兔Neto2蛋白质与啮齿目Neto2蛋白质进化关系最近。家兔Neto2与Necab1、Necab2、NCK1、SHCBP1、Grik5等蛋白质存在相互作用。结果可为进一步研究家兔Neto2蛋白质的表达和生物活性提供试验依据。
- 赵小峰吴桂梅金磊汪瑶颜景芝
- 关键词：家兔生物信息学氨基酸序列
- 色素上皮衍生因子对缺氧条件下H9C2心肌细胞保护作用
- 2017年
- 目的探讨色素上皮衍生因子(PEDF)对H9C2心肌细胞在低氧无血清条件下的保护作用及其可能的机制。方法体外培养H9C2细胞进行低氧无血清处理,将细胞分为对照组(H9C2)、缺氧组(缺氧+H9C2)、PEDF组(缺氧+H9C2+PEDF)、残粒体分裂抑制剂(Medivi-1)组(缺氧+H9C2+Mdivi-1)。TUNEL染色检测H9C2心肌细胞凋亡率;Western blot检测动力相关蛋白1(Drp1)、活化半胱天冬酶-3(Cleaved-Caspase3)的蛋白水平;电镜及MitoTracker Red检测线粒体形态;采用线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测线粒体膜电位,MitoSOXTM检测线粒体活性氧簇(ROS)水平。结果缺氧诱导H9C2细胞线粒体分裂,缺氧组(6h)与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),PEDF减少缺氧条件下线粒体分裂,PEDF组与缺氧组(6h)比较差异有统计学意义(P<0.05),PEDF和Mdivi-1可以减少缺氧条件下(24h)细胞凋亡,与缺氧组(24h)比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PEDF通过抑制缺氧条件下H9C2细胞线粒体分裂减少细胞凋亡。
- 王柱周中新关秋华张昊刘志伟董红燕张中明
- 关键词：缺氧H9C2细胞色素上皮衍生因子
