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广西大学农业分子遗传农业部重点开放实验室: 作品数：19 被引量：59H指数：5; 相关作者：何曙光蓝乐夫更多>>; 相关机构：中国科学院沈阳应用生态研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划广西壮族自治区自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学更多>>

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中国科学院沈阳应用生态研究所

水稻黄单胞菌水稻变种的rpfA基因的定位和次级克隆被引量：2: 1999年; 水稻黄单胞菌水稻变种产生两种顺乌头酸酶（ＸｏｏＡｃａｎＡ和ＸｏｏＡｃａｎＢ），编码ＸｏｏｃａｎＡ的ｒｐｆＡ基因已被克隆在重组质粒ｐＧＸＮ３０００中。本工作通过转座子Ｔｎ５Ｂ２０诱变ｐＧＸＮ３０００，鉴定了ｒｐｆＡ基因的位置及其转录方向，并进一步将含有完整ｒｐｆＡ基因的４．８ｋｂＡｓｐ７１８ＥｃｏＲⅠ片段次级克隆到了多用途载体质粒ｐＩＪ３２００。; 武波唐纪良马庆生; 关键词：水稻黄单胞菌变种基因克隆

与黄原胶生物合成相关的“1.9”kb EcoRIDNA片段的序列测定分析被引量：3: 1999年; 对Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓｃａｍｐｅｓｔｒｉｓｐｖ．ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ（下称Ｘｃｃ）８００４菌株染色体基因组中９．４ｋｂＨｉｎｄⅢＤＮＡ的“１．９”ｋｂＥｃｏＲＩ酶切片段的测序分析结果表明，该ＥｃｏＲＩＤＮＡ片段的实际长度为１．８８ｋｂ。在核苷酸水平上与Ｘｃｃ的ｇｕｍ基因有９８％的一致性；这一ＥｃｏＲＩ片段上有两个有意义的ＯＲＦ：ＯＲＦ１和ＯＲＦ２。ＯＲＦ１是一个不完整的ＯＲＦ；在氨基酸水平上，ＯＲＦ１和ＯＲＦ２的推断性编码产物蛋白分别与ｇｕｍＡ基因编码的ＧｕｍＡ及ｇｕｍＢ基因编码的ＧｕｍＢ蛋白有１００％的一致性。因此在１．８８ｋｂＥｃｏＲＩ片段上存在一完整的ｇｕｍＢ基因。; 李有志唐纪良冯家勋查冬兴马庆生; 关键词：黄原胶 DNA序列分析生物合成单胞菌

水稻黄单胞菌水稻致病变种rpfC缺失突变体在感病和抗病水稻品种中的繁殖和扩展: 1999年; 水稻黄单胞菌水稻致病变种（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓｏｒｙｚａｅｐｖ．ｏｒｙｚａｅ）中国菌株１３７５１和水稻品种广桂１１０和ＩＲ２６的相互作用分别为亲和和不亲和相互作用。１３７５１的ｒｐｆＣ基因缺失突变株ＳＬ３７５１在电镜下的形态和野生型没有显著差别，均为短杆状，大小为（０．５～０．８）×（１．０～２．０）μｍ。用１０８ｃｆｕ／ｍＬ或１０１０ｃｆｕ／ｍＬ的ＳＬ３７５１剪叶接种苗期和分蘖盛期的广桂１１０，接种后５ｄ内ＳＬ３７５１在广桂１１０中的生长繁殖和野生型相似，但接种５ｄ后ＳＬ３７５１在其中的活菌数均稳定在１０６－７ｃｆｕ／叶，最终ＳＬ３７５１的活菌数比１３７５１的低１００倍左右。在抗病品种ＩＲ２６上，接种后５ｄＳＬ３７５１也增殖到１０６－７ｃｆｕ／叶，之后也保持在这一水平，最终ＳＬ３７５１的活菌数比野生型的低１０倍左右。另外，ＳＬ３７５１在被接种到广桂１１０和ＩＲ２６后，它被主要局限在剪叶接种切口下３ｃｍ范围内。野生型接种在广桂１１０上，接种后３ｄ就迅速沿叶脉往下扩展，野生型１３７５１在抗病品种ＩＲ２６中的扩展速度显著慢于其在广桂１１０中的扩展速度。所有这些都进一步证实ｒｐｆＣ基因在１３７５１在致病过程中起?; 陆光涛唐纪良冯家勋; 关键词：黄单胞菌致病变种基因缺失繁殖

互补野油菜黄单胞菌野油菜致病型T113突变体胞外多糖产生的DNA片段的克隆被引量：2: 1999年; 以从野油菜黄单胞菌野油菜致病型（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓｃａｍｐｅｓｔｒｉｓｐｖ．ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ）胞外多糖突变体Ｔ１１３中克隆的含转座子Ｔｎ５ｇｕｓＡ５及其两侧相邻序列的１２．３ｋｂＥｃｏＲＩＤＮＡ片段为探针，从野生型菌株８００４中克隆到与突变位点相对应的６．５ｋｂＥｃｏＲＩ片段，克隆于载体ｐＬＡＦＲ３上的该片段能反式互补突变株Ｔ１１３的胞外多糖产生，说明该片段上含有至少一个与胞外多糖产生有关的基因。; 韦珂唐纪良冯家勋; 关键词：黄单胞菌致病型胞外多糖克隆

青枯假单胞菌的一段12.8kb DNA带有特异性控制病菌在花生上致病的基因被引量：2: 1999年; 在本工作中，通过平板筛选分离得到两个来自马铃薯的青枯假单胞菌菌株Ｔ２００２和Ｔ２０５３（对花生不致病）的利福平抗性自发突变株Ｔ２０１６和Ｔ２０１７，通过三亲本接合，ｐＧＸ１２５２分别以９．０７×１０－７、２．５４×１０－６频率被导入到Ｔ２０１６和Ｔ２０１７中，所得接合子Ｔ２１２３（Ｔ２０１６／ｐＧＸ１２５２）和Ｔ２１２４（Ｔ２０１７／ｐＧＸ１２５２）均分别能使花生汕油５２３发生青枯病，但它们侵染的植株出现病症的时间比Ｔ２００５晚３～５ｄ，说明ｐＧＸ１２５２能扩大Ｔ２０１６和Ｔ２０１７的寄主范围使之包括花生。从侵染Ｔ２１２３、Ｔ２１２４的病株中重新分离病菌，四环素抗性检测和质粒检测表明所有细菌均含有ｐＧＸ１２５２，说明在植物体内无抗生素选择压力情况下ｐＧＸ１２５２能在Ｔ２０１６、Ｔ２０１７中稳定存在。本工作进一步证实ｐＧＸ１２５２带有特异性控制青枯假单胞菌在花生上致病的与寄主专一性有关的基因。; 段承杰冯家勋唐纪良唐纪良马庆生; 关键词：青枯假单胞菌花生基因 DNA 致病

慢生大豆根瘤菌与竞争结瘤相关的lrp基因的克隆被引量：3: 2002年; 通过对重组质粒 pGXN30 0中的 2 .3kbEcoRI片段测序分析发现 ,其中含有一完整的lrp基因和部分 putA基因 ,与King等报道的B .japonicum的lrp基因DNA序列有 88%同源性。应用Tn5gusA5定位诱变的方法获得了gusA基因表达的根瘤菌lrp基因突变体GX2 0 10 8。植株试验表明 ,突变株结瘤时间明显推迟。; 武波唐咸来柏学亮唐东阶吕安国唐纪良马庆生; 关键词：竞争结瘤 LRP基因克隆

茄假单胞菌寄主花生特异性毒性基因的定位被引量：4: 2000年; 通过对从茄假单胞菌中克隆的 p GX12 52进行亚克隆分析 ,发现含 p GX12 52右边4 .5kb K pn I/ Eco RI片段的亚克隆 p GX140 4仍象 p GX12 52一样能使对花生不致病菌株 T2 0 14在花生上致病 .用转座子 Tn5- lac对 p GX140 4进行了饱和插入诱变 ,一共分离得到 6个在 p GX140 4上不同位置的独立插入突变 ,其中离 p GX140 4右末端约 1.4 kb、2 .2 kb的两个 Tn5- lac插入使p GX140 4丧失了扩大 T2 0 14寄主范围的能力 ,证实 hsv基因位于 p GX140; 蓝乐夫冯家勋段承杰马庆生唐纪良; 关键词：寄主花生

慢生型大豆根瘤菌nfe基因的分子克隆被引量：5: 1999年; ｎｆｅＣ基因是从慢生型大豆根瘤菌中克隆到的，与竞争结瘤有关的基因。本研究从慢生型大豆根瘤菌菌株ＧＸ２０１的ｐＬＡＦＲ３为载体的基因文库中，筛选出与ｎｆｅ同源基因克隆。以转座子Ｔｎ５ｇｕｓＡ５诱变获得了ｇｕｓ基因表达的Ｔｎ５ｇｕｓＡ５插入突变质粒。; 周刚林武波唐东阶柏学亮马庆生; 关键词：大豆根瘤菌结瘤基因分子克隆

外源nfeC基因导入快生型大豆根瘤菌菌株HN01的行为分析被引量：9: 1998年; nfeC基因是从慢生型大豆根瘤茵中克隆到的、与竞争结瘤有关的基因．将含nfeC基因的质粒pGXN100导入快生型大豆根瘤菌菌株HN01后，构建了重组快生型大豆根瘤菌GX301．与HN01相比较，GX301的竞争结瘤能力增强．; 马庆生武波唐东阶柏学亮何曙光周刚林; 关键词：大豆根瘤菌竞争结瘤

PCR技术在快生型大豆根瘤菌菌株鉴别上的应用: 1997年; 以基因外重复的回文因子（ｒｅｐｅｔｉｔｉｖｅｅｘｔｒａｇｅｎｉｃｐａｌｉｎｄｒｏｍｉｃ，ＲＥＰ）和肠杆菌基因间重复一致序列（ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｌｒｅｐｅｔｉｔｉｖｅｉｎｔｅｒｇｅｎｉｃｃｏｎｓｅｎｓｕｓ，ＥＲＩＣ）的碱基顺序设计出的引物为引物，用ＰＣＲ（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ）技术分别扩增了８株快生型大豆根瘤菌（Ｓｉｎｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍ）的总ＤＮＡ，得出了具有菌株特异性的扩增产物电泳图谱，称ＲＥＰ－ＥＲＩＣＰＣＲ指纹图谱，将所得图谱进行性状编码后，用计算机数值分类系统进行平均连锁聚类分析，得出这８个菌株的聚类树状图。这一聚类结果与用其它方法聚类结果基本一致，说明ＲＥＰ－ＥＲＩＣＰＣＲ是一种鉴别快生型大豆根瘤菌菌株的经济、快速而又可靠的新方法。; 唐东阶柏学亮武波冯家勋马庆生李阜棣周俊初M.MuilenburgT.A.Lie窦新田; 关键词：PCR技术根瘤菌大豆

广西大学农业分子遗传农业部重点开放实验室

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