东北师范大学生命科学学院膜通道实验室
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 水通道蛋白1-C末端肽段/GST融合蛋白的原核表达(简报)被引量：1
- 2008年
- 水通道蛋白（Aquaporin，AQP）是一类选择性高效转运水分子的细胞膜通道蛋白，广泛存在于原核和真核生物细胞的细胞膜上．主要介导自由水分子的被动跨膜转运．对保持细胞内外液环境的稳态平衡起着重要的作用。AQP1是第一个被发现鉴定的水通道蛋白．它是1988年Agre等从红细胞膜分离纯化Rh血型多肽时偶然发现的一个分子量为28KD的疏水性跨膜蛋白．称为形成通道整合膜蛋白28（CHIP28）。Agre因此获得了2003年的诺贝尔奖。水通道蛋白AQP1广泛地表达于红细胞、肾、眼、肺，脉络丛和血管内皮，在体液转运中发挥作用。
- 李晓萌李江杨南扬关新刚张淑芝惠伟丽麻彤辉
- 关键词：AQP1GST融合蛋白E.COLI
- EMMPRIN糖基化突变质粒的构建及功能检测被引量：1
- 2014年
- 目的:构建细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)糖基化位点突变质粒,探讨其与肿瘤细胞增殖的关系。方法:利用PCR定点诱变技术构建EMMPRIN糖基化位点突变质粒。突变成功后,对突变质粒进行功能检测,Western blotting法检测EMMPRIN蛋白表达;免疫荧光法检测细胞形态学变化;MTT法检测突变质粒与肿瘤细胞增殖的关系。结果:酶切鉴定和测序证实,将EMMPRIN序列中第44、152和186位的天冬酰胺突变成谷氨酰胺,成功构建EMMPRIN/GFP(N44Q)、EMMPRIN/GFP(N152Q)和EMMPRIN/GFP(N186Q)糖基化单点突变质粒;糖基化位点突变后,突变型细胞核分裂相显著减少,伪足数减少;MTT法检测,与对照组比较,野生型组细胞存活率明显升高(P<0.05);而EMMPRIN糖基化位点突变后,与野生型比较,EMMPRIN(N44Q)、EMMPRIN(N152Q)和EMMPRIN(N186Q)细胞存活率均明显降低(P<0.05)。结论:EMMPRIN突变型能抑制肿瘤细胞的增殖,且随作用时间增加,抑制作用减弱;EMMPRIN糖基化修饰与肿瘤细胞的增殖有关联。
- 赵超悦宋润敏秦晖王娜杨柳李江
- 关键词：细胞外基质金属蛋白酶诱导因子点突变糖基化细胞增殖
