广东医科大学公共卫生学院东莞市环境医学重点实验室
- 作品数：22 被引量：27H指数：3
- 相关机构：福建医科大学附属协和医院广州医科大学公共卫生学院南方医科大学公共卫生与热带医学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学环境科学与工程生物学更多>>
- 二氯乙腈诱导HepG2细胞凋亡及机制研究
- 2018年
- 目的研究二氯乙腈(DCAN)对人肝肿瘤Hep G2细胞凋亡的作用及其机制。方法用二甲基亚砜(DMSO)溶解DCAN,以DMSO处理的Hep G2细胞作为对照组,50和800μmol/L的DCAN处理的Hep G2细胞作为处理组,采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒检测细胞活力,流式细胞术(FCM)检测细胞周期分布情况,Annexin V-FITC/PI双标记法测定细胞凋亡率;荧光测定法检测Hep G2细胞内天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)活性。结果DCAN处理浓度和处理时间存在交互效应(P<0.001),与对照组比较,DCAN可明显抑制Hep G2增殖,呈现时间和剂量效应(P<0.05);与对照组比较,800μmol/L DCAN处理组G_0/G_1期比例明显减少,G_2/M期细胞比例明显增加;DCAN诱导的Hep G2细胞凋亡随着浓度的增加而增加,呈剂量-效应关系,回归方程为y=0.031x+5[决定系数(R^2)=0.915,F=64.782,P<0.001];DCAN诱导的Hep G2细胞内caspase-3酶活性随着处理浓度的增加而增加,呈剂量-效应关系,回归方程为y=0.001 6x+1(R^2=1.000,F=21 266.064,P<0.001)。结论DCAN可抑制Hep G2细胞增殖并诱导细胞凋亡,其机制可能与G_2/M期细胞阻滞、抑制RNA和蛋白质的合成并激活细胞内caspase-3凋亡途径有关。
- 翟璐梁海荣罗皓
- 关键词：CASPASE-3细胞凋亡
- CCK-8试剂用于测定活细胞数量的细节研究被引量：4
- 2016年
- Cell Counting Kit-8(CCK-8)是一种用于测定活细胞数量的常用方法。本文以宫颈癌Hela细胞、肺腺癌细胞A549细胞、人脐静脉血管内皮HUVEC12细胞为例研究了CCK-8试剂用于测定活细胞数量实验中OD值与细胞数量的关系、OD值与CCK-8孵育时间的关系。
- 邵军丽李林秋戴娟秀陈婷婷翟璐
- 关键词：CCK-8HELAA549孵育时间
- 污水处理厂中典型内分泌干扰物的去除效果研究被引量：5
- 2018年
- 内分泌干扰物(Endocrine Disruption Chemicals,EDCs)在水中极低浓度下即会引起水生生物生殖发育、神经和免疫系统的异常,对人群的健康危害不容忽视。EDCs在污水厂中具有低浓度、难去除的特点,为进一步阐明污水处理厂不同处理工艺对此类EDCs的去除效果,采用化学分析法(气质联用法)和生物学方法(H295R和MVLN细胞实验法)分析东莞市2个城市污水处理厂中8种典型EDCs的分布特征和去除效果。结果显示,两污水厂进水中壬基酚(Nonlyphenol,NP)、辛基酚(Octylphenol,OP)、双酚A(Bisphenol A,BPA)浓度较高,NP质量浓度分别高达10 782 ng·L^(-1)和2 664 ng·L^(-1),而雌激素类物质雌酮(Estrone,E1)、雌二醇(17β-Estradiol,E2)与雌三醇(Estriol,E3)、17α-乙炔基雌二醇(17α-Ethinglestradiol,EE2)、己烯雌酚(Diethylstilbestrol,DES)浓度较低,经处理后,去除效率均超过90%。两污水厂进水及出水处理后H295R细胞内雌二醇(E2)水平显著升高,睾酮(Testosterone,T)水平呈下降趋势,类固醇合成基因HMGR、CYP11B2和CYP19表达量显著增加。MVLN细胞试验结果显示,两污水厂出水中雌激素当量(Estradiol Equivalency quotient,EEQ)分别达19.25ng·L^(-1)和14.21 ng·L^(-1)。本研究表明,即使化学分析结果显示EDCs去除率高达90%,且出水中雌激素化合物低于检出限,但是出水中类固醇激素干扰活性及雌激素活性依然存在。类固醇激素水平与水中酚类物质浓度没有显著相关性,A、B两个污水厂出厂水中除酚类化合物外,其他产生雌激素效应的化合物或类固醇合成干扰物也不容忽视。
- 周开茹龚剑熊小萍许素哗唐焕文刘小山
- 关键词：污水处理厂内分泌干扰物
- 一种具有琼胶酶活性的海洋细菌淀粉酶的表达和分析
- 2017年
- 旨在验证海洋新种细菌ZC1中可能存在的具有琼胶酶活性的淀粉酶。对菌株ZC1中的淀粉酶编码基因amy440进行基因克隆和重组原核表达,并用活性电泳法验证重组蛋白的淀粉酶和琼胶酶活性。结果显示,基因amy440的重组蛋白在淀粉酶和琼胶酶活性电泳上均出现活性显色条带。菌株ZC1中基因amy440的编码蛋白是一种具有琼胶酶活性的淀粉酶。
- 林伯坤宋燕陆国永赵敏钟名其胡忠
- 关键词：琼胶酶淀粉酶多功能酶
- 临床医学研究生死亡认知和临终关怀态度调查分析与比较研究
- 2023年
- 目的调查分析临床医学研究生的死亡认知现状与临终关怀态度,比较博士、硕士群体间的差异,探讨其死亡认知与临终关怀态度的相关性,为我国高等医学院校死亡观与临终关怀教育改革建设提供借鉴与参考。方法采用《一般社会学情况调查表》、中文版《死亡态度描绘量表》、中文版《佛罗梅尔特临终关怀态度B量表》对496名临床医学博、硕士研究生的死亡认知、临终关怀认知态度等进行调查。同时,对博、硕士两类人群的调查结果进行分类比较。利用t检验、Pearson相关分析等统计学方法对本研究结果予以统计学分析。结果剔除27份不合格问卷,共回收469份有效问卷。统计分析得知,博士研究生《死亡态度描绘量表》中各维度得分排序依次为:趋近接受(4.28±0.53)、中立接受(3.99±0.41)、死亡逃避(2.74±0.63)、死亡恐惧(2.65±0.57)、逃离接受(2.47±0.69);硕士研究生《死亡态度描绘量表》中各维度得分排序依次为:中立接受(3.96±0.52)、趋近接受(2.84±0.61)、死亡恐惧(2.78±0.65)、死亡逃避(2.62±0.73)、逃离接受(2.39±0.77)。同时,博士群体临终关怀态度得分高于硕士群体([110.63±8.96)vs.(106.78±6.52)],差异有统计学意义(P<0.001)。此外,博、硕士研究生群体“死亡恐惧”得分与临终关怀态度得分均呈负相关(r=-0.25,r=-0.21),而临终关怀态度得分与死亡认知中的“中立接受”得分均呈正相关(r=0.50,r=0.32)。然而,博士群体临终关怀态度得分与死亡认知中的“死亡逃避”得分呈负相关(r=-0.27)。结论博、硕士研究生群体已具备一定的临终关怀意识,但其死亡认知与临终关怀态度仍需从社会学、心理学、伦理学等多角度予以提升和加强,在满足我国老龄化社会需求的同时促进医患和谐。
- 刘彦权洪晓梅黄涛黄劲龙殷悦刘昕熠陈玉婷杨慧唐焕文
- 关键词：临终关怀安宁疗护医学人文
- 二氯乙腈对LO2细胞周期的影响及其相关调控机制的研究被引量：1
- 2018年
- 目的探讨二氯乙腈(dichloroacetonitrile,DCAN)对细胞周期的影响及其相关的调控机制。方法用二甲基亚砜(DMSO)溶解DCAN,以DMSO处理人胚肝细胞(LO2细胞)为对照组,采用Cell Counting Kit-8试剂盒检测0~5 000μmol/L DCAN对细胞存活率的影响,分别用10、50、100、500μmol/L DCAN处理LO2细胞为染毒组,以碘化丙啶(PI)标记的流式细胞技术检测细胞周期分布情况,以实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测chkl基因、chk2基因、p53基因和bcl-2基因m RNA表达的改变。结果 CCK-8结果显示:随DCAN浓度增加LO2细胞存活率降低,DCAN引起LO2细胞的IC_(50)为583.25μmol/L;与对照组比较,500μmo I/L DCAN处理组G1期细胞比例明显减少,G2期细胞比例明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05);500μmo I/L DCAN作用于LO2细胞后上调了p53的表达,下调了bcl-2和chk2的表达,差异有统计学意义(P<0.05),而对chkl的表达没有影响。结论 DCAN可能通过上调p53和下调bcl-2的表达使细胞阻滞于G_2期。
- 翟璐梁海荣刘雨果罗皓
- 关键词：细胞周期P53BCL-2
- PARP-1通过p16参与氢醌诱导TK6恶性转化细胞周期信号的调控
- 2022年
- 目的探讨聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶1(PARP-1)和p16/视网膜母细胞瘤(Rb)信号通路在氢醌(HQ)诱导的TK6细胞中的表达及其相关调控机制。方法按照2×2析因设计模型,将TK6细胞按HQ染毒水平分为磷酸缓冲盐溶液(PBS)-TK6组和HQ-TK6组,再按照多柔比星(DOX)干预水平分为无DOX干预组和DOX干预组,共4组。PBS-TK6组细胞以PBS处理,HQ-TK6组细胞予终浓度为20.0μmol/L的HQ染毒处理;无DOX干预组细胞加入体积分数为0.05%的二甲基亚砜,DOX干预组细胞加入终浓度为0.5μmol/L的DOX。采用流式细胞术检测细胞周期分布情况,蛋白免疫印迹法检测p16/Rb信号通路p16、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、多功能蛋白E2转录因子1(E2F1)、Rb、p-Rb蛋白表达水平,免疫荧光和免疫共沉淀法检测p16核糖化水平。结果主效应分析结果显示,与PBS-TK6组比较,HQ-TK6组细胞G0/G1期细胞周期分布百分比和p16蛋白相对表达水平均下调(P值均<0.05),S期细胞周期分布百分比和cyclinD1、p-Rb蛋白相对表达水平均上升(P值均<0.05);与无DOX干预组比较,DOX干预组细胞在G0/G1期、G2/M期的细胞周期分布百分比和p16蛋白相对表达水平均上升(P值均<0.05),在S期细胞百分比和cyclinD1、p-Rb蛋白相对表达水平均下调(P值均<0.05)。交互效应分析结果显示,与PBS-TK6细胞无DOX干预组比较,PBS-TK6细胞DOX干预组中Rb和E2F1蛋白相对表达水平均下调(P值均<0.05),HQ-TK6细胞无DOX干预亚组的Rb蛋白相对表达水平均下调(P<0.05),E2F1蛋白相对表达水平上调(P<0.05);与PBS-TK6细胞DOX干预组比较,HQ-TK6细胞DOX干预组的Rb蛋白相对表达水平下调(P<0.05),E2F1蛋白相对表达水平上调(P<0.05);与HQ-TK6细胞无DOX干预组比较,HQ-TK6细胞DOX干预组的Rb蛋白相对表达水平上调(P<0.05),E2F1蛋白相对表达水平下调(P<0.05)。结论PARP-1可能通过调控p16/Rb信号通路参与TK6细胞的周期调控。
- 邱伟峰陈林崔哲明杨慧罗皓李华文
- 关键词：氢醌P16恶性转化
- miRNAs与非酒精性脂肪肝相关信号通路被引量：3
- 2016年
- 非酒精性脂肪性肝病（nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD）是指除酒精及其他明确的肝损害因素所致的，以弥漫性肝细胞大泡性脂肪变为主要特征的临床病理综合征。近年来NAFLD已成为危害人类健康的常见病，可增加患心血管疾病、2型糖尿病及代谢综合征等的风险，它是许多慢性肝脏疾病的早期阶段，其疾病谱包括单纯性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎（non-alcoholic steatohepatitis，NASH）、肝纤维化及肝硬化，进一步可发展为肝癌。
- 朱姗姗何太平邹堂斌
- 关键词：非酒精性脂肪肝MIRNAS信号通路非酒精性脂肪性肝炎慢性肝脏疾病单纯性脂肪肝
- 沉默PARP-1对氢醌所致大鼠骨髓间充质干细胞凋亡影响被引量：2
- 2017年
- 目的探讨沉默聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)对氢醌所致大鼠骨髓间充质干细胞(BMMSCs)凋亡的影响。方法①PARP-1基因RNA干扰表达质粒转染BMMSCs后,经新霉素筛选获得PARP-1沉默BMMSCs,以免疫印迹法鉴定所构建的细胞。②以空载体BMMSCs为对照组,以PARP-1沉默BMMSCs为实验组。分别以质量浓度为0.0、2.5、5.0、10.0、20.0、40.0、80.0、160.0和320.0μmol/L的氢醌(溶于磷酸盐缓冲液)作用于2组细胞24 h,以噻唑蓝法检测细胞活力,根据细胞活力检测结果选择后续实验氢醌染毒剂量。③以浓度为0.0~20.0μmol/L的氢醌作用于2组细胞24 h后,以流式细胞技术检测细胞凋亡情况,以实时荧光定量-聚合酶链反应检测PARP-1 mRNA表达情况。结果①用质量浓度为400 mg/L的新霉素成功筛选出PARP-1沉默BMMSCs和空载体BMMSCs,PARP-1沉默BMMSCs中PARP-1蛋白表达量较BMMSCs下降85.00%,成功建立PARP-1沉默细胞。②根据细胞活力检测结果,后续实验选择氢醌染毒剂量为0.0~20.0μmol/L。3与氢醌染毒剂量为0.0μmol/L时比较,对照组及实验组细胞早期凋亡率分别在氢醌染毒剂量为10.0和5.0μmol/L时即出现有统计学意义的升高(P<0.05);且在浓度为0.0~10.0μmol/L时,随着氢醌染毒剂量的增加,2组细胞早期凋亡率均增加(P<0.01),均呈剂量-效应关系。③与氢醌染毒剂量为0.0μmol/L比较,对照组和实验组细胞的PARP-1 mRNA相对表达水平均在氢醌染毒剂量为5.0μmol/L时即出现有统计学意义的升高(P<0.05),且在每个氢醌染毒剂量下实验组细胞PARP-1 mRNA相对表达水平均低于对照组(P<0.05);在浓度为0.0~20.0μmol/L时,随着氢醌染毒剂量的增加,2组细胞PARP-1 mRNA相对表达水平均增加(P<0.01),均呈剂量-效应关系。结论 PARP-1沉默BMMSCs在氢醌作用下更易发生凋亡,PARP-1可能参与了氢醌诱导的细胞凋亡。
- 高羽亭杜进林杨慧唐焕文
- 关键词：氢醌骨髓间充质干细胞凋亡
- 金黄色葡萄球菌肠毒素C及其突变体在抗肿瘤和骨科治疗中的应用进展被引量：3
- 2019年
- 金黄色葡萄球菌肠毒素C(SEC)是一种由金黄色葡萄球菌产生的超抗原,具有强大的T细胞活化增殖能力,中国SEC生物制剂(金葡素注射液)应用于临床抗肿瘤及骨科疾病的治疗。但SEC作为一种天然肠毒素,具有一定的免疫毒性,可导致发热、呕吐、腹泻等不良反应,一定程度上限制了金葡素注射液的临床应用。为提高SEC的超抗原特性,减少毒性,现已开发出多种SEC突变体蛋白,未来可生产出更安全、高效、低毒性或无毒性的生物制剂,扩大SEC的临床应用范围,治疗更多疾病。
- 陈欣林施明杰林泽桁张玉明石明
- 关键词：超抗原突变体蛋白
