中南大学基础医学院微生物学系
- 作品数：23 被引量：134H指数：4
- 相关机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
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- 相关领域：医药卫生文化科学农业科学电子电信更多>>
- 16S rRNA基因序列分析法鉴定病原细菌被引量：87
- 2013年
- 目的:运用16S rRNA基因序列分析法鉴定14种细菌,为该方法的临床应用奠定基础。方法:提取细菌DNA,采用通用引物PCR扩增16S rRNA基因片段并测序。将测序结果用Blastn在线软件在Nucleotide数据库中进行序列同源性比对,根据序列同源性鉴定病原细菌。结果:12种细菌可以鉴定到"种",2种细菌可以鉴定到"属"。结论:16SrRNA基因序列分析是一种有效的病原细菌鉴定方法。
- 朱飞舟陈利玉陈汉春
- 关键词：RRNA病原细菌基因序列分析
- HCMV感染诱导血管平滑肌细胞同源盒基因表达改变及TLX2基因的克隆与原核表达被引量：1
- 2018年
- 目的研究人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染对人血管平滑肌细胞同源盒基因(homeobox gene,HOX)表达的影响,并克隆受HCMV诱导表达的同源框基因,为其功能研究奠定基础。方法以1MOI的HCMV感染人血管平滑肌细胞,分别于感染后24h,48h及72h用基因表达谱芯片检测血管平滑肌细胞基因表达水平的改变,筛选差异表达的同源框基因并进行全长cDNA的克隆和原核表达。结果人血管平滑肌细胞感染HCMV后24、48、72h有9个HOX基因的表达发生变化。其中上调基因3个(HHEX、ZEB2、HOXD8),下调基因6个(EMX2OS、SIX5、PKNOX1、IRX3、MEIS1、ESX1)。在HCMV感染后48、72h,TLX2基因表达上调。成功构建pGEX-4T-1/TLX2重组原核表达质粒,转化BL21后经IPTG诱导表达58×103的重组蛋白,该蛋白能被相应抗体识别。结论 HCMV感染可诱导人血管平滑肌细胞多个HOX基因表达的改变,构建的pGEX-4T-1/TLX2重组质粒获得体外表达,为进一步研究TLX2的功能及HCMV致血管平滑肌增生性疾病的分子机制奠定了基础。
- 杨长江苏颖慧赵婵玥曹家敏马琼山谭宇蓉邬国军
- 关键词：人巨细胞病毒血管平滑肌细胞同源盒基因
- 生殖器疱疹及其疫苗的研究进展
- 2015年
- 生殖器疱疹由单纯疱疹病毒（herpes simplex virus,HSV）感染所致,在世界范围内广泛流行.HSV可在宿主体内建立终身潜伏感染,并引起严重的复发性疾病.此外,HSV感染还能明显增加HIV感染的机率.虽然目前抗HSV药物有一定作用,但是不能防止潜伏HSV复活.因此,亟需研制有效的疫苗来控制HSV感染、限制疾病传播和复发.此文对生殖器疱疹的病原学、流行病学及疫苗的研究进展做一综述.
- 戴橄刘水平
- 关键词：疱疹生殖器疱疹病毒2型
- 人类巨细胞病毒在脐动脉血管平滑肌细胞中的增殖被引量：1
- 2010年
- 目的研究人类巨细胞病毒对血管平滑肌细胞的感染性,为人类巨细胞病毒致动脉粥样硬化及移植物血管病机制研究建立细胞模型。方法自脐动脉分离血管平滑肌细胞,以1个感染复数(MO I)的人类巨细胞病毒感染该细胞,观察细胞病变效应,以RT-PCR技术检测人类巨细胞病毒IE基因在平滑肌细胞内的表达,同时以电镜技术检测平滑肌细胞内的病毒颗粒。结果人类巨细胞病毒感染脐动脉血管平滑肌细胞后第3天即可出现细胞病变,至第8天已出现明显的细胞病变效应,以RT-PCR技术可从感染人类巨细胞病毒AD169株的平滑肌细胞内扩增出预期的产物,经测序验证为人类巨细胞病毒IE基因,以电镜技术可从感染人类巨细胞病毒AD169株的血管平滑肌细胞中观察到病毒颗粒。结论人类巨细胞病毒AD169株可以感染人血管平滑肌细胞,并复制出子代病毒颗粒。为人类巨细胞病毒致动脉粥样硬化及移植物血管病的机制研究提供了较好的实验依据及细胞模型。
- 李玲芳陈华邬国军
- 关键词：人类巨细胞病毒动脉粥样硬化血管平滑肌细胞移植物血管病
- 人巨细胞病毒感染对血管平滑肌细胞MMP-2表达的影响
- 目的研究人巨细胞病毒(HCMV)感染对人血管平滑肌细胞MMP-2表达的影响,以探讨HCMV致动脉粥样硬化的可能机制。方法培养血管平滑肌细胞并以HCMV AD169株感染,同时用含3%小牛血清的DMEM维持液进行模拟感染用...
- 陈华刘伟程洁李玲芳邬国军
- 金黄色葡萄球菌甲氧西林耐药辅助基因femB的克隆和原核表达被引量：1
- 2012年
- 金黄色葡萄球菌femB基因与甲氧西林高水平耐药密切相关,可能成为开发抗MRSA药物的新靶位.以金葡菌基因组DNA为模板,PCR扩增femB全长基因,所得片段与pGM-T载体连接并转化感受态大肠杆菌DH5α,阳性克隆以PCR、双酶切及测序鉴定.将鉴定正确的目的片段定向克隆到pGEX-4T-1表达载体中,转化至大肠杆菌BL21后经IPTG诱导表达GST/FemB融合蛋白;采用SDS-PAGE及Western blot对融合蛋白进行鉴定.结果显示,重组质粒在宿主菌中获得了高效表达,融合蛋白相对分子质量为75 kD,该融合蛋白可与抗GST-tag抗体特异结合;表明femB基因的原核表达系统构建成功,为进一步研究其生物学功能奠定了基础.
- 邹明祥武文君李军邬国军张宁洁刘文恩范学工
- 关键词：金黄色葡萄球菌基因克隆融合蛋白
- 人类巨细胞病毒感染与血脂代谢关键酶的关系被引量：5
- 2010年
- 目的研究人类巨细胞病毒(HCMV)感染与肝脂酶(HL)、脂蛋白脂肪酶(LPL)及卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)3个血脂代谢关键酶的含量或相对活性的关系,初步探讨HCMV致动脉粥样硬化的机制。方法利用ELISA技术检测研究对象HCMV-IgG、HL及LPL,用自身底物法检测LCAT的相对活性并对数据进行分析。结果 HCMV-IgG阳性组HL含量为(170.65±89.14)μg/mL,LCAT相对活性为(30.85±19.72)%,均明显低于HCMV-IgG阴性组(218.74±104.58)μg/mL及(39.16±22.44)%,t值分别为2.2316和2.2633,均P<0.05。HCMV-IgG阳性组与HCMV-IgG阴性组LPL差异无显著性(t=1.4834,P>0.05)。HCMV-IgG抗体指数在20.1以上或10.1以上者,血浆HL含量或LCAT相对活性均分别明显低于HCMV-IgG抗体指数20.0或10.0以下各组;相关性分析表明,HCMV-IgG抗体指数值与HL含量及LCAT相对活性存在明显的负相关关系,相关系数分别为-0.4612和-0.5541(均P<0.05)。结论 HCMV感染可通过改变宿主基因表达致HL及LCAT含量或相对活性下降,从而导致宿主脂代谢异常,最终导致动脉粥样硬化的形成。
- 陈华李玲芳程洁刘伟李娟徐玉芬王明达邬国军
- 关键词：人类巨细胞病毒肝脂酶脂蛋白脂肪酶卵磷脂胆固醇酰基转移酶
- 德氏乳杆菌保加利亚亚种发酵产物对常见病原菌的抑制作用被引量：4
- 2020年
- 目的探究德氏乳杆菌保加利亚亚种的发酵产物对常见病原菌的抑制作用。方法采用细菌共培养法及牛津杯药物敏感试验,分别探究德氏乳杆菌保加利亚亚种及其发酵产物对11种常见病原菌的抑制作用,并通过乙醇沉淀、透析、超滤离心及饱和硫酸铵盐析法,对德氏乳杆菌保加利亚亚种发酵产物中抑菌物成分进行了初步研究。结果德氏乳杆菌保加利亚亚种发酵产物对多种临床常见病原菌均有较强的抑菌活性,抑菌活性与该菌代谢产生的乳酸无关,且该抑菌活性具有良好的热稳定性;发酵产物的乙醇沉淀物及80%饱和硫酸铵盐析沉淀物均无抑菌活性,以相对分子质量3×103及10×103超滤离心管将发酵液进行超滤离心后进行抑菌试验,显示滤出液及上层液均具有良好的抑菌活性,发酵产物经截留相对分子质量为0.5×103的透析袋透析后失去抑菌活性。结论德氏乳杆菌保加利亚亚种发酵产物对于临床常见的多种革兰阳性、革兰阴性病原菌均具有较强的抑菌活性,其抑菌活性物质可能是相对分子质量0.5×103左右或以下的小分子物质。
- 陈华彭浩胡方兴梁伟张镓魏莎邬国军
- 关键词：微生物敏感试验抗药性细菌
- RSV非结构蛋白对支气管上皮细胞驱动的Th细胞分化的影响
- 目的人呼吸道合胞病毒(RSV)是引起严重性呼吸道疾病的主要原因之一,是引起后继哮喘发生的重要危险因素。筛选RSV的2个非结构蛋白NS1和NS2在支气管上皮中的相互作用蛋白,检测其诱发支气管上皮细胞异常信号转导,从而探究其...
- 秦岭谭宇蓉彭丹胡成平
- 槲皮素对HaCat细胞增殖及β-防御素和谷胱甘肽过氧化物酶表达的影响被引量：2
- 2017年
- 目的研究槲皮素(quercetin)对人永生化上皮细胞(HaCat细胞)增殖及其非特异性免疫分子表达的影响。方法利用MTT法检测不同浓度槲皮素溶液作用对HaCat细胞增殖的影响,利用ELISA法检测在不同浓度槲皮素干预下的HaCat细胞培养上清液中β-防御素(β-DF)及谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)的含量。结果 100μmol/L槲皮素对HaCat细胞的增殖有抑制作用,50μmol/L以下的槲皮素对HaCat细胞的增殖无明显影响。HaCat细胞经过不同浓度的槲皮素处理48、72h后,其细胞上清液中谷胱甘肽过氧化物酶的浓度与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),但β-防御素的表达在50.00μmol/L和25.00μmol/L槲皮素处理组上调。结论槲皮素具有增强细胞非特异免疫功能作用,其机制可能通过上调β-防御素的表达来实现。
- 林俊卿黄蔷如王弼思吴坷坷谭宇蓉彭程邬国军
- 关键词：槲皮素细胞增殖Β-防御素
