延边大学医学院生物化学与分子生物学教研室
- 作品数：59 被引量：268H指数：10
- 相关作者：李迪赵薇申镐源李洁田野更多>>
- 相关机构：北华大学基础医学院吉林医药学院基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省教育厅科学技术研究项目延边朝鲜族自治州科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学轻工技术与工程更多>>
- 两种细胞建立肝细胞氧化损伤模型比较被引量：19
- 2015年
- 目的比较过氧化氢诱导人肝癌细胞株（Hep G2）与正常肝细胞株（Chang liver）建立的肝细胞氧化应激损伤模型。方法用不同浓度过氧化氢诱导Hep G2细胞和Chang liver细胞氧化应激损伤,采用噻唑蓝法检测细胞生长抑制率;分光光度法测定培养液中乳酸脱氢酶（LDH）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）活性,以及肝细胞中超氧化物歧化酶（SOD）活性、还原型谷胱甘肽（GSH）及丙二醛（MDA）含量。结果作用时间在0.5~4 h时,在75~600μmol/L浓度范围内,过氧化氢可浓度和时间依赖性地抑制2种肝细胞增殖,促使细胞内AST、ALT和LDH向培养液中释放;细胞中SOD和GSH活性明显降低,MDA含量明显升高,表明2种肝细胞氧化损伤模型构建成功;选择300μmol/L H2O2作用4 h为致Hep G2和Chang liver细胞氧化应激损伤的最佳条件,结果显示,Hep G2和Chang liver细胞的生长抑制率分别为62%和76%,培养液中ALT、AST、LDH活性分别为（18.2±0.2）、（34.2±4.6）、（544.2±26.8）和（19.1±0.1）、（30.3±2.5）、（536.8±22.3）U/L,细胞中MDA含量分别为（7.8±0.9）和（8.6±1.1）nmol/mgprot。结论Hep G2与Chang liver细胞均可用于氧化应激细胞损伤模型的制备。
- 金明王玉娇金梅花全吉淑
- 混合式教学模式在生物化学课程的应用探讨被引量：5
- 2017年
- 生物化学是生命科学的重要基础学科之一。如何在传统教学中及时变革、改进和完善原有的教学模式,是新时期应用型医学人才培养模式改革的核心问题,也是提高医学课程教学质量的关键。慕课教学具有网上互动、学生主导、移动学习等优势,但也存在一些不足。因此,构建基于慕课的混合式教学模式,实现优势互补,对探索生物化学教学方法具有重要意义。
- 陈丽艳金梅花全吉淑
- 关键词：生物化学混合式教学模式教学改革
- 心肌特异表达基因p93在四种心血管疾病中血清水平的差异及其意义被引量：3
- 2006年
- 目的研究心肌特异表达的新激酶基因p93在冠状动脉粥样硬化性心脏病(CAD)、扩张性心肌病(DCM)、先天性心脏病(CHD)和风湿性心脏病(RHD)中的作用。方法以杂交瘤技术制备p93单克隆抗体;应用酶联免疫吸附测定(ELISA)直接法检测正常人与上述4种疾病患者血清中p93的表达状况及血清浓度的差异。结果成功制备了人p93单克隆抗体,效价达1:100 000;正常人及CAD、DCM、CHD、RHD患者血清中均有p93的表达;正常人血清水平对数值为2．32±0．19;4种疾病患者的p93血清水平(对数值分别为2．46±0．22,2．47±0．20,2．58±0．26,2．49±0．19)均高于正常人(P<0．05)。其中CHD组明显高于正常对照组及CAD组(P<0．05)。结论p93基因与这4种疾病均有密切关系,以CHD尤为突出。推测该基因可能在上述各疾病的发生、发展过程中起着重要作用,但其机制亟待进一步探讨。
- 郑晓静刘冬青时娜曹慧青田野王来元孟宪敏
- 关键词：心血管疾病基因酶联免疫吸附测定细胞凋亡
- 人参皂苷Compound K通过Bcl-2相关转录因子1诱导人肝癌细胞SMMC-7721自噬的作用被引量：3
- 2020年
- [目的]探讨人参皂苷Compound K(人参皂苷CK)通过Bcl-2相关转录因子1(Bclaf1)诱导人肝癌细胞SMMC-7721自噬的作用.[方法]取人参皂苷CK(0,20,40,60,80μmol/L)分别作用于人肝癌细胞SMMC-772124,48,72 h,采用MTT法检测人参皂苷CK对人肝癌细胞SMMC-7721增殖的抑制作用;人参皂苷CK(40μmol/L)处理人肝癌细胞SMMC-772148 h后,单荧光GFP-LC3质粒转染细胞和透射电子显微镜观察敲除Bclaf1基因对细胞自噬的影响,采用Western blot法检测CRISPR/Cas9技术敲除Bclaf1基因后自噬相关蛋白LC3Ⅱ的表达情况.[结果]人参皂苷CK可抑制人肝癌细胞SMMC-7721增殖,与空白对照组比较,Bclaf1表达量明显减少(P<0.01).人参皂苷CK处理Bclaf1稳定敲除肝癌细胞,自噬更加明显,与空白对照组比较,LC3Ⅱ蛋白表达量显著增加(P<0.01).[结论]人参皂苷CK可通过Bclaf1诱导人肝癌细胞SMMC-7721自噬.
- 陈佳欣闫岩苏杰琳赵嘉琪张学武
- 关键词：肝癌自噬
- 珍珠梅提取物中活性成分的分离及对自由基的清除作用被引量：6
- 2003年
- [目的 ]探讨珍珠梅提取物中活性成分的分离方法及对自由基的清除作用 .[方法 ]用硅胶柱色谱法对珍珠梅提取物进行分离纯化 ,通过物理化学常数和光谱分析法鉴定分离出的化合物结构 .用四氯化碳制作急性肝损伤模型 ,观察珍珠梅活性成分对大鼠血清、肝匀浆、肝线粒体超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶活性及丙二醛含量的影响 .[结果 ]从珍珠梅提取物中分离出 4种化合物 ,分别为5,2′ ,4′ 三羟基 6,7,5′ 三甲氧基黄酮 (Ⅰ )、5,7 二羟基 8 甲氧基黄酮 (Ⅱ )、丁二酸 (Ⅲ )及对羟基苯甲酸(Ⅳ ) ;珍珠梅提取物中的活性成分对急性肝损伤大鼠血清、肝匀浆及线粒体超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶的活性具有明显的升高作用 ,并具有降低丙二醛含量的作用 .[结论 ]从珍珠梅提取物中分离出的 4种化合物中化合物Ⅰ ,Ⅲ是首次得到的 。
- 张学武关丽萍权迎春金明朴春梅崔长旭
- 关键词：自由基珍珠梅提取物活性成分
- 心肌特异表达基因p93的原核表达及鸡卵黄抗体的制备被引量：5
- 2005年
- 目的在大肠杆菌中高效表达心肌特异表达基因p93,以此作为抗原免疫产蛋母鸡,制备抗p93蛋白鸡卵黄抗体(IgY)。方法将p93基因分别插入原核表达载体pGEX-5X-1、pBV220、pET28a(+)中,选取表达量最高的载体进行表达纯化,其产物免疫产蛋母鸡。结果插入pET28a(+)中N端带有His标签的p93表达水平最高,且以包涵体形式存在,从含有pET28a-p93质粒的1L培养的菌液中可获得3mg纯化的p93蛋白。免疫产蛋母鸡,末次免疫后其卵黄抗体最高滴度达到1∶64000,Westernblot结果显示该抗体具有高度特异性。结论此抗体的制备为新基因p93的检测提供了良好的工具。
- 尤昕时娜赵秀文柳明洙刘冬青曹慧青孟宪敏
- 关键词：大肠杆菌蛋黄
- PKLR在胰腺癌中的表达水平及临床病理学意义被引量：2
- 2021年
- 背景与目的:胰腺癌是一种原发于消化系统的恶性肿瘤,发病率男性高于女性,且患者预后差。重组人丙酮酸激酶(pyruvate kinase isozymes R/L,PKLR)属于丙酮酸激酶家族,哺乳动物丙酮酸激酶同工酶有4种:L、R、M1和M2,其与肿瘤的发生、发展密切相关。已经有研究发现,PKLR会促进乳腺癌的转移。探究PKLR蛋白在胰腺癌中的临床病理学意义,分析PKLR对胰腺癌生物学行为的影响及分子机制。方法:运用免疫荧光染色检测PKLR蛋白在胰腺癌细胞中的定位;采用免疫组织化学染色EnVision法检测PKLR在胰腺癌组织中的阴性表达率、阳性表达率和强阳性表达率,并分析PKLR与胰腺癌患者临床病理学特征之间的关系;运用小干扰RNA转染技术敲减PKLR表达观察其在胰腺癌细胞中的蛋白表达水平;噻唑蓝实验检测敲低PKLR后细胞增殖活性的变化;平板克隆实验检测敲减PKLR后BxPC-3和MIA PaCa-2细胞菌落形成数量的变化;应用细胞划痕实验检测PKLR对胰腺癌细胞横向迁移能力的影响;transwell实验检测PKLR对胰腺癌细胞纵向迁移能力的影响;蛋白质印迹法(Western blot)检测PKLR对上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transformation,EMT)相关标志蛋白表达变化的影响。结果:免疫荧光结果显示,PKLR荧光信号定位于BxPC-3和MIA PaCa-2胰腺癌细胞的细胞质中;免疫组织化学染色结果表明,PKLR在胰腺癌组织中的阳性表达率(75.2%)和强阳性表达率(48.6%)显著高于正常胰腺组织(14.3%和7.1%)(P<0.01);且其表达与胰腺癌患者的组织学分级及淋巴结转移密切相关(P<0.05);小干扰RNA转染技术敲减PKLR表达后,PKLR在胰腺癌细胞中的蛋白表达水平明显下调;MTT结果显示,敲减PKLR后,细胞增殖活性明显受到抑制,且呈时间依赖性(P<0.05);平板克隆实验发现,敲减PKLR可显著减少BxPC-3和MIA PaCa-2细胞的集落形成数量;细胞划痕实验和transwell实验检测发现敲减PKLR后胰腺癌细�
- 杨士鹏刘颖刘颖杨洋全吉淑杨洋
- 关键词：胰腺癌增殖迁移上皮-间质转化
- 大鼠血浆、肝脏和腓肠肌亚细胞组分中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性和丙二醛含量分布被引量：7
- 1997年
- 对大鼠血浆、肝脏和腓肠肌亚细胞组分中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性和丙二醛含量进行了测定．结果，在大鼠血浆、腓肠肌和肝脏三者中，超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶的活性和丙二醛含量由高至低的顺序依次为肝脏、肌肉、血浆，均有显著性差异；在肌肉和肝脏亚细胞组分中超氧化物歧化酶则以胞浆中活性为最，线粒体次之，微粒体中谷胱甘肽过氧化物酶活性最低．肝脏胞浆中谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于线粒体中的活性．谷胱甘肽过氧化物酶在微粒体中的活性极低或无法测出．丙二醛含量在肝脏中的含量最高，肌肉中含量次之，最后为血浆．丙二醛含量在肝脏中的顺序依次为线粒体、微粒体和胞浆．在肌肉中丙二醛含量顺序为胞浆、微粒体和线粒体．
- 柳明洙崔勋
- 关键词：丙二醛肝脏
- 急性肺部感染患者血清中超氧化物歧化酶及丙二醛测定及其临床意义
- 2003年
- [目的 ]探讨自由基对急性肺部感染的影响及其意义 .[方法 ]检测了 2 8例急性肺部感染患者血清中超氧化物歧化酶的活性及丙二醛的含量 .[结果 ]急性肺部感染组超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量较对照组均明显升高 .[结论 ]急性肺部感染患者血清自由基一方面杀死细菌 ,另一方面也可以损伤机体 .
- 林冬岩金成赞陈丽艳
- 关键词：急性肺部感染超氧化物歧化酶活性丙二醛
- 组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA诱导人乳腺癌细胞凋亡及自噬被引量：5
- 2016年
- 目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古霉素(TSA)对人乳腺癌细胞凋亡及自噬的作用及其可能的分子机制。方法采用MTT法检测T47D细胞的增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡的变化;Western blot法检测凋亡及自噬相关蛋白的表达。结果 TSA对人乳腺癌细胞T47D具有增殖抑制作用(P<0.05);TSA诱导T47D细胞发生凋亡,下调BCL-2/Bax比值,上调Caspase-3的表达(P<0.05);同时自噬相关蛋白LC3B及Beclin-1的表达也明显增加(P<0.05,P<0.01)。结论 TSA体外能抑制乳腺癌细胞的增殖,其机制与诱导细胞凋亡和自噬作用有关。
- 周宪春朱坤徐明车拴龙陈丽艳
- 关键词：乳腺肿瘤TSA自噬
