第二军医大学药学院生化药学教研室
- 作品数：161 被引量：688H指数：15
- 相关作者：肖振宇道书艳吕岩吴堂明田媛更多>>
- 相关机构：上海师范大学生命与环境科学学院华东理工大学生物工程学院上海中医药大学穆拉德中药现代化研究中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“重大新药创制”科技重大专项上海市教育委员会创新基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 商陆皂苷甲对兔滑膜细胞产生IL-1和TNF的影响被引量：30
- 2001年
- 目的 :研究商陆皂苷甲 (Es A)对脂多糖 (L PS)刺激兔滑膜细胞产生白介素 1(IL - 1)和肿瘤坏死因子 (TNF)的影响。方法 :用胸腺细胞增殖法和用 L92 9细胞作靶细胞的生物测定法 ,分别检测与 Es A共育的受 L PS刺激的兔滑膜细胞培养上清中 IL- 1和 TNF的含量。结果 :Es A在 5～ 40 μg/ m l范围内能明显抑制 L PS诱导兔滑膜细胞产生 IL- 1和 TNF。结论 :Es A可抑制滑膜细胞产生 IL - 1和 TNF的作用提示其可能有助于消除类风湿性关节炎的关节炎症。
- 郑钦岳王慧峰郑向民肖振宇易杨华
- 关键词：商陆皂苷甲白细胞介素1滑膜细胞
- 小檗碱促树突状细胞凋亡及其防治类风湿性关节炎的作用
- 研究目的:小檗碱(berberine,Ber)作为清热解毒药和抗菌药在临床上已应用多年。随着对Ber研究的不断深入,初步明确了小檗碱具有抗炎和免疫抑制作用,但相关的机制尚未完全阐明。树突状细胞(dendritic cel...
- 胡振林焦晴刘芳张卫东张俊平
- 文献传递
- 生物芯片－基因功能研究新的技术平台
- 2001年
- 郭葆玉
- 关键词：生物芯片基因表达谱
- PRDM5基因抑制前列腺癌细胞22Rv1生长被引量：2
- 2016年
- 目的探讨PRDM5基因在前列腺癌细胞中的抑癌作用。方法采用聚合酶链反应(PCR)、限制性内切酶酶切、T4DNA连接酶连接等方法,克隆PRDM5基因并插入慢病毒载体中。将携带PRDM5基因的慢病毒质粒(或阴性对照质粒)与慢病毒包装质粒通过脂质体法共转染293T细胞,收集病毒上清,感染人前列腺癌细胞株22Rv1。用蛋白质印迹法检测细胞PRDM5的表达,细胞倍增实验和平板克隆实验检测细胞增殖和克隆形成能力,软琼脂克隆形成实验检测细胞非锚着依赖性生长能力。结果成功构建PRDM5重组慢病毒载体,并包装获得慢病毒上清。将PRDM5重组慢病毒载体感染22Rv1细胞后,筛选得到稳定表达细胞株,蛋白质印迹法结果显示该细胞株能稳定表达外源性PRDM5蛋白。过表达PRDM5的前列腺癌22Rv1细胞的增殖能力[倍增时间:(52.5±1.4)h vs(44.0±1.3)h]、克隆形成能力[克隆形成数:(1 114±98)/皿vs(1 361±123)/皿]和非锚着依赖性生长能力[克隆形成数:(94.6±8.7)/孔vs(154.0±3.5)/孔]均低于阴性对照组(P<0.05)。结论前列腺癌22Rv1细胞中PRDM5的过表达具有抑制肿瘤细胞增殖、克隆形成和非锚着依赖性生长的能力。
- 王洋夏梓元黄美金任善成朱焱高莉贺湘洁徐光丁桂龄陆斌孙颖浩
- 关键词：前列腺肿瘤细胞增殖克隆形成
- 商陆皂苷甲对自身免疫综合征模型小鼠的疗效被引量：14
- 2003年
- 目的:研究商陆皂苷甲(EsA)对自身免疫综合征模型小鼠的疗效。方法:采用ELISA、3H-TdR掺入和病理学检测3种方法,分别观察EsA对模型小鼠抗ds-DNA抗体水平、淋巴细胞转化水平及内脏炎症的影响。结果:EsA在5～20 mg/kg剂量范围内能降低模型小鼠升高的抗ds-DNA抗体和淋巴细胞转化水平,且能显著地改善模型小鼠内脏组织的炎症。结论:EsA对自身免疫综合征模型小鼠有显著的治疗作用,EsA有希望成为治疗自身免疫疾病的有效药物。
- 肖振宇郑钦岳张俊平陆峰张大志
- 关键词：自身免疫综合征商陆皂苷甲疗效小鼠ELISA
- 人胸腺素a原cDNA序列多态性分析
- 目的：通过对人胸腺素a原cDNA测序来分析胸腺素a原的序列多态性。
方法：利用RT—PcR技术从外周血及脐带血中扩增胸腺素原cDNA，纯化后与克隆载体DMDl8一T连接，经克隆测序，通过与标准序列比对，测定其多...
- 弓雪莲郭葆玉郭满盈吕岩
- 关键词：CDNA片段缺失
- 文献传递
- GST-pulldown验证转录因子ZNF24与c-Myc的相互作用被引量：1
- 2014年
- 目的:前期酵母双杂交实验中,我们以转录因子ZNF24的SCAN结构域为诱饵,筛选到的一个阳性克隆为原癌基因c-Myc,在此进一步验证ZNF24与c-Myc间的相互作用。方法:将ZNF24与c-Myc分别构建到p GEX-4T-2和pc DNA3.1表达载体上,利用GST-pulldown技术体外验证两者表达蛋白的相互作用。结果:电泳鉴定与测序分析表明目的基因克隆正确,载体构建成功;用GST-pulldown技术检测到ZNF24与c-Myc相互作用的蛋白条带。结论:GST-pulldown实验进一步表明ZNF24与c-Myc的相互作用,为验证ZNF24与c-Myc之间存在相互作用奠定了基础。
- 赵靖凯王聪张籍鹏厉建中
- 融合表达pGEX-Tα1的发酵研究被引量：1
- 2003年
- 为了研究重组人胸腺素α1(Tα1)工程菌的发酵工艺 ,在NBS MICROS15L自动控制发酵罐中 ,利用分批培养和补料分批培养技术培养含融合表达载体 pGEX Tα1的大肠杆菌DE3 (lys)。采用分批培养 ,得到的最终菌体密度OD60 0 为 8,GST Tα1融合蛋白的含量为 0 .1g L(发酵液 ) ;通过限制性流加补料 ,促进体系溶解氧能使发酵菌体密度及融合蛋白的含量显著提高 ,OD60 0 可达 3 2 ,融合蛋白的含量为 0 .7g L(发酵液 ) ,且融合蛋白主要以可溶形式表达 ,为后续蛋白纯化工作提供了便利。本研究确定了周期短、产率高且稳定的发酵工艺 。
- 苗红郭葆玉
- 关键词：发酵大肠杆菌胸腺素Α1
- 融合表达β趋化因子受体5NH_2端膜外第一襻及其特异抗体F(ab′)_2的制备被引量：3
- 1999年
- 目的：研究β趋化因子受体５（ＣＣＲ５）ＮＨ２端膜外第一襻结构域的功能及其特异抗体Ｆ（ａｂ′）２的制备。方法：计算机分析趋化因子超基因家族，定位超基因家族中同源顺序最低的结构域ＮＨ２端膜外结构域，ＰＣＲ扩增出该结构域１１４个核苷酸序列。构建融合表达载体ｐＧＥＸ－ＩＮ／ＮＲ５，经测序鉴定正确后，在Ｅ．ｃｏｌｉ中表达，经纯化后免疫新西兰兔。蛋白Ａ亲和层析和胰蛋白酶消化ＩｇＧ，经Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－１２柱层析制备Ｆ（ａｂ′）２。结果：经还原和非还原聚丙烯酰胺凝胶电泳和ＦＡＸ分析证明得到抗ＣＣＲ５ＮＨ２端的特异性抗体。结论：本方法为一简捷快速的特定功能结构域抗体Ｆ（ａｂ′）２制备方法，对研究该基因在体内的表达及生物学功能提供了重要的实验材料，同时也对超基因家族中亚家族特异抗体研制提供了一种研究思路和方法。
- 郭葆玉张淑英程振球程振球松岛纲治
- 关键词：融合蛋白抗体CCR5
- 纤维蛋白原降解产物对大鼠主动脉血管细胞的作用及蛋白激酶C抑制剂的影响被引量：9
- 1999年
- 目的：研究蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂对纤维蛋白原降解产物（ＦＦＤＰ）引起的大鼠主动脉血管内皮细胞（ＲＡＥＣ）损伤的保护作用和平滑肌细胞（ＲＡＳＭＣ）增殖的抑制作用。方法：ＲＡＥＣ损伤以乳酸脱氢酶释放测定，ＲＡＳＭＣ增殖以结晶紫染色法测定。结果：ＦＦＤＰ能促进ＲＡＥＣ释放乳酸脱氢酶，诱导ＲＡＳＭＣ增殖；ＰＫＣ抑制剂槲皮素、Ｒｏ３１－８２２０剂量依赖性地抑制ＦＦＤＰ对ＲＡＥＣ的损伤，并抑制ＦＦＤＰ诱导的ＲＡＳＭＣ增殖。结论：ＰＫＣ抑制剂对ＦＦＤＰ引起的ＲＡＥＣ有保护作用，对ＲＡＳＭＣ增殖有抑制作用。
- 周斌张俊平胡振林钱定华
- 关键词：平滑肌细胞主动脉蛋白激酶C
