广西大学生命科学与技术学院亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室
- 作品数：70 被引量：152H指数：7
- 相关作者：董学卫黄明月张子宇吴倩倩陈青云更多>>
- 相关机构：广西民族大学海洋与生物技术学院中国热带农业科学院热带生物技术研究所更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金国家自然科学基金广西科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程环境科学与工程更多>>
- 多年生长雄蕊野生稻感光性的遗传分析被引量：1
- 2020年
- 非洲的长雄蕊野生稻(Oryza longistaminata)具有多年生、抗病、抗虫、耐寒、耐旱等优良特性,可用于栽培稻的遗传改良。但其感光性强,长日照下不抽穗。为了在分子标记辅助育种过程中排除不需要的强感光性,须先找到长雄蕊野生稻中控制感光性的QTL。感光性是指水稻受日照长短的影响而改变其抽穗期的特性。抽穗期作为水稻重要的农艺性状,与产量有着密切的联系。本研究以长雄蕊野生稻(Oryza longistaminata)为父本,栽培稻巴利拉(Balilla)为母本杂交构建的F2群体为研究材料。对F2群体的抽穗期性状进行QTL定位分析,共得到6个控制水稻抽穗期的QTL,这些QTL分别位于第2号、第4号、第8号和第9号染色体上。在两年长日照下的F2群体中都检测到第8号染色体上的qDTH-8-1位点,但短日照下未检测到该位点,说明其跟感光性相关。qDTH-8-1是一个主效位点,对抽穗期表型贡献率最大,其中包含已被克隆的DTH8/GHD8基因。此外,我们还检测到另外4个已被定位但未被克隆的位点qDTH-4-1、qDTH-8-2、qDTH-9-1和q DTH-9-2,他们在本群体中的效应不大。结果表明,长雄蕊野生稻的感光性主要由qDTH-8-1控制,育种后代中要注意检测该位点的基因型。通过检测长雄蕊野生稻中的抽穗期QTL并进一步克隆到基因,这有助于深入了解野生稻强感光性的遗传机理,为水稻品种改良提供基因资源。
- 薄娜娜胡星辉周乐范优荣范智权蔡中全杨江义
- 关键词：感光性抽穗期基因定位
- 高产光学纯（R）-乙偶姻工程菌株的构建与发酵工艺优化
- 2020年
- 本研究拟在大肠杆菌中构建光学纯(R)-乙偶姻的合成途径和利用辅酶工程调控NADH/NAD+氧化还原平衡,并对工程菌发酵(R)-乙偶姻进行优化。将来源于Enterobacter cloacae的α-乙酰乳酸合成酶基因budB、α-乙酰乳酸脱羧酶基因budA和来源于Lactobacillus brevis的NADH氧化酶基因noxE进行密码子优化后组成基因簇,构建表达质粒并导入大肠杆菌,进一步优化工程菌的培养基成分和发酵条件,提高(R)-乙偶姻的合成能力。结果表明:获得专一性合成高光学纯(R)-乙偶姻的大肠杆菌工程菌株GXASR,对其发酵条件进行系统优化后,摇瓶发酵的(R)-乙偶姻产量为36.82g/L,光学纯度达99.1%,发酵罐补料发酵的(R)-乙偶姻产量达到67.65g/L。在大肠杆菌细胞中过表达外源基因簇budB-budA-noxE能够高效合成光学纯(R)-乙偶姻,经发酵优化后,工程菌的(R)-乙偶姻产量、生产强度和得率均显著提高,为代谢工程改造大肠杆菌生产高光学纯(R)-乙偶姻提供了理论基础。
- 马志林陈先锐叶柳健李检秀黄艳燕张云开蒙健宗
- 关键词：合成生物学工程菌株发酵优化
- 植物乳杆菌ZJ316高密度发酵条件优化被引量：12
- 2021年
- 以1株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)ZJ316为研究对象,在MRS液体培养基的基础上,以吸光度值(OD600 nm值)为响应值,通过单因素试验及响应面试验对其高密度发酵培养基组分和培养条件进行优化。结果表明,L.plantarum ZJ316高密度发酵的最优培养基组成为蔗糖43 g/L、玉米浆干粉60 g/L、Na2HPO4-柠檬酸0.12 mol/L、MgSO_(4)·7H_(2)O 0.20 g/L、MnSO_(4)·H_(2)O 0.10 g/L、吐温801 mL/L;最优发酵条件为接种量4%、发酵温度30℃、初始pH值6.5。在此优化条件下,采用发酵罐静置发酵24 h,植物乳杆菌ZJ316的OD600 nm值为5.13,活菌数可达8.01×10^(9) CFU/mL,较优化前分别提高1.65倍、3.44倍。
- 李娜杨江华韦宇拓
- 关键词：植物乳杆菌响应面优化高密度发酵发酵条件
- 利用深度测序技术鉴定淮山药病毒病新病原
- 淮山药(Dioscorea spp.)是一种具有良好市场前景的药食兼用的经济作物.目前国内外报道侵染淮山药的病毒共有15种，引致的症状包括花叶、斑驳、脉明、褪绿、生长迟缓和叶片扭曲等.我们连续4年对全国主要淮山药种植区进...
- 邹承武蒙姣荣韦本辉陈保善
- 关键词：病毒鉴定
- 拟康宁木霉聚半乳糖醛酸酶的酶学特征及潜在应用
- 2023年
- 从桂北果园土壤中筛选到1株产聚半乳糖醛酸酶(酶活力为29.2 U/mL)的丝状真菌,鉴定该菌为拟康宁木霉(Trichoderma koningiopsis)。以聚半乳糖醛酸为底物,测得该酶最适反应温度为50℃,且在50℃条件下保温1 h,仍能保持70%以上最大酶活力,属于中高温酶。该酶具有独特的弱酸性催化特征,最适反应pH 5.0,且在pH 6.0仍具有73%最大酶活力,并在pH 2.5~8.0条件下具有一定耐受性。Zn^(2+)对酶活性具有部分激活作用,Mn^(2+)则对该酶有一定抑制作用。针对5种弱酸性水果果浆(木瓜、香蕉、芭蕉及火龙果(红心和白心))脱胶实验结果显示,该酶对5种水果的脱胶效果都有不同程度提高,其中芭蕉果浆出汁率提高了24.4%,木瓜果浆黏度下降了82.5%,红心火龙果果浆透光率提高了31.9%,3种水果脱胶效果显著。本研究挖掘出一种新型产聚半乳糖醛酸酶菌株,对于热带、亚热带易腐烂水果的果汁生产具有较好的应用前景。
- 杨成玮朱婧韦云伊杨媚许文婷程忠
- 关键词：酶学性质
- 碳水化合物结合组件的点突变研究被引量：1
- 2014年
- 碳水化合物结合组件(carbohydrate-binding module,CBM)是某些碳水化合物活性酶(carbohydrate-active enzymes)上的非催化部分,主要负责与底物特异性结合以提高与之相邻的催化结构域对不可溶底物的催化效率。CBM中的保守芳香族氨基酸通常是这些蛋白的底物结合位点,利用氨基酸定点突变技术可用来寻找和验证CBM中的结合位点的关键氨基酸。本研究的前期工作发现CBM46200与其同家族的其它成员相比对底物结合的能力要弱很多,多重序列比对发现家族中某些保守的芳香族氨基酸在CBM46200被非芳香族氨基酸替代,这可能是CBM46200与底物结合能力弱的原因,探究这些原因对研究前期工作中所鉴定的新家族CBM的广泛特异性具有重要意义。在本研究中利用氨基酸定点突变技术、亲和凝胶电泳技术以及蛋白对不可溶多糖的吸附技术等对前面的推论予以验证。结果表明,CBM46200的定点突变体对多糖底物的结合能力并没有增强,有些甚至还减弱了,这说明这些非芳香族氨基酸在CBM46200中的替代不是造成CBM46200对多糖的结合能力弱于其它家族成员的原因,可能还存在其它的因素影响CBM46200对底物的结合能力,本文对这些可能的因素也做了推测。
- 冯玉亮黄明月王菲曹启龙冯家勋段承杰
- 关键词：定点突变
- 用氢氧化钾和过氧化氢从甘蔗渣中提取木聚糖的条件优化及甘蔗渣木聚糖酶解产低聚木糖的分析被引量：4
- 2017年
- 甘蔗渣含有约40%纤维素和20%半纤维素,是生物炼制生产高附加值生化产品的良好原料。本研究通过响应面分析实验优化了氢氧化钾和过氧化氢处理甘蔗渣从中提取木聚糖的工艺参数:氢氧化钾浓度、过氧化氢浓度和处理温度,以甘蔗渣木聚糖提取率为考察指标,获得处理甘蔗渣的最优条件:10.0%KOH,2.36%H_2O_2,50℃,处理时间6 h,甘蔗渣木聚糖提取率达到78%。用重组内切木聚糖酶水解提取的甘蔗渣木聚糖生产低聚木糖,主要包括木二糖和木三糖,在底物浓度36 g/L、反应温度36℃、p H 5.0、木聚糖酶添加量800 U/g的条件下,水解反应24 h,木聚糖产生低聚木糖的转化率为43%。
- 蒋随新卢春艳李成喜赵帅段承杰冯家勋
- 关键词：氢氧化钾过氧化氢低聚木糖
- 酸性木聚糖酶产生菌XYW5的筛选及酶学性质被引量：6
- 2018年
- 【目的】选育优良的产酸性木聚糖酶的微生物,考察酸性木聚糖酶的酶学性质(尤其是pH值为4.0),为实现纤维素乙醇低成本清洁生产打下基础。【方法】从广西大学农场采集土壤,富集后经产酸性木聚糖酶的培养,比较酸性木聚糖酶酶活力,选育酸性木聚糖酶高产菌株,鉴定菌种,分析酶学性质。【结果】筛选出产酸性木聚糖酶酶活力较高的菌株XYW5。扩增菌株XYW5的ITS rDNA序列,经测序分析比对,将其初步鉴定为日本曲霉Aspergillus japonicus XYW5。菌株XYW5产酸性木聚糖酶和酸性木糖苷酶的酶活力最高分别达(26. 26±0. 97)U/mL和(0.63±0.02) U/mL,比活力分别为(85.50±0.63) U/mg和(1.80±0.01) U/mg;其酸性木聚糖酶最适温度和最适pH值分别为65℃和6.5,酸性木糖苷酶最适温度和最适pH值分别为70℃和4.5;酸性木聚糖酶兼有酸性CMCase酶活力,达到8.54 U/mL。【结论】菌株XYW5所产的酸性木聚糖酶具有开发成为优良工业酸性木聚糖酶的潜力。
- 吴仁智黄俊黄俊芦志龙陈小玲陈英陆琦陈东王青艳
- 关键词：日本曲霉酶学性质纤维素乙醇
- 新鞘氨醇杆菌属9-1的纤维素酶基因Nspcel8A的克隆表达与酶学特性被引量：1
- 2021年
- 木质纤维素转化成燃料酒精是缓解能源和环境危机的途径之一。降低将木质纤维素转化成生物燃料的生产成本,需要提高纤维素酶产量或筛选到具更高酶活性的纤维素酶。新鞘氨醇杆菌(Genus Novosphingobium)属于鞘氨醇杆菌科(Sphingomonads),该科的细菌新陈代谢多样化,能够降解有机化合物,也可应用于木质素的降解,但目前新鞘氨醇杆菌属细菌的纤维素酶基因的研究未见报道。本研究对新鞘氨醇杆菌属细菌菌株9-1的纤维素酶基因Nspcel8A进行了克隆表达和酶学特性鉴定。Nspcel8A含有属于糖基水解酶家族8的催化结构域。该酶在大肠杆菌中实现了异源表达并获得了表达产物。Nspcel8A对羧甲基纤维素(carboxymethylcellulose, CMC)的最适作用pH值和温度分别为4.0和40℃,Nspcel8A具有良好的pH值稳定性,在pH值3.5~11.0范围内放置24 h后能够保持60%以上的酶活力。Nspcel8A对CMC的K_(m)值为10 mg/mL,V_(max)为14μmol·min^(-1)·mg^(-1)。底物特异性测试显示Nspcel8A对CMC有最高的酶活力(8.40 U/mg),但对不可溶纤维维如磷酸膨胀纤维素和Avicel只有较低的酶活力或没有酶活。高效液相色谱法分析显示Nspcel8A不能降解纤维二糖、纤维三糖、纤维四糖,能把纤维五糖部分降解成纤维二糖和纤维三糖,能把纤维六糖降解为纤维二糖、纤维三糖和纤维四糖,并以纤维三糖为主。以上结果显示Nspcel8A是一个内切葡聚糖酶,由于它不能水解结晶纤维素,说明它不是Novosphingobium sp.9-1主要的纤维素降解酶。
- 卢春艳覃洁李明栋冯家勋段承杰
- 关键词：内切葡聚糖酶酶学特性
- 生物酶法合成1,5-戊二胺的研究进展被引量：7
- 2017年
- 随着经济的飞速发展,全球每年对聚酰胺、聚氨酯等多聚物产品的需求量呈现逐年增长的趋势。1,5-戊二胺是合成聚酰胺等多聚物的重要单体,生物法合成1,5-戊二胺是一种具有潜在竞争力的绿色环保、资源可持续利用的方法。本文将从代谢途径中的关键酶,大肠杆菌、谷氨酸棒状杆菌以及甲醇芽孢杆菌中戊二胺代谢途径工程改造的最新研究进展4个方面进行综述,并对其前景进行展望。
- 邓洁高震高华吴巧芬蒋承建
- 关键词：大肠杆菌谷氨酸棒状杆菌
