安徽医科大学基础医学院病理生理学教研室
- 作品数：32 被引量：73H指数：5
- 相关作者：王涛郭强董伟于丹丹更多>>
- 相关机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所中国科学技术大学生命科学与医学部更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省人才开发基金安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 人miR-100-3p抑制序列慢病毒载体及其稳定表达的小鼠胚胎成纤维细胞的建立被引量：1
- 2017年
- 目的构建携带针对人miR-100-3p抑制序列的慢病毒载体,建立稳定表达的该载体的小鼠胚胎成纤维(MEF)细胞。方法设计并合成特定的miR-100-3p抑制序列克隆入载体h U6-MCS-Ubiquitin-EGFP-IRES-puromycin构建重组载体,将该载体与p Helper1.0载体和p Helper2.0载体三质粒共感染293T细胞得到所需的病毒液,最后感染MEF细胞,并通过嘌呤霉素筛选出稳定感染的细胞株。检测MEF细胞中绿色荧光蛋白(GFP)的表达和hsa-miR-100-3p在MEF细胞中的表达水平,验证慢病毒在MEF细胞中的抑制表达效果。结果测序结果证明成功构建了重组质粒,并成功的包装成慢病毒,所得病毒液感染MEF细胞并筛选出稳定细胞株。流式分析提示,带有绿色荧光蛋白的目的重组质粒在小鼠胚胎成纤维细胞细胞中的表达(显著抑制miR-100表达)达到了97.4%和95.1%,PCR进一步验证这一结果。结论 hsa-MiR-100-3p抑制序列慢病毒沉默载体及抑制miR-100-3p表达的MEF细胞可被成功构建,为后续miR-100的功能研究奠定基础。
- 朱其苹郭强邓瑞晴董伟任海风倪芳汪思应
- 关键词：慢病毒
- 酒精通过增加VEGF的表达促进乳腺癌的生长与血管生成
- 目的目前饮酒已经是公认的影响乳腺癌的常见危险因素之一。流行病学研究表明饮用酒精性饮料可以增加乳腺癌发生的危险性,另外,有实验研究证实饮酒可以促进已发生肿瘤的生长与转移。然而酒精诱导乳腺癌生长转移的机制仍然不清楚。我们前期...
- 卢艳敏汪思应陈强谱杨金莲余科科桂照华
- 新式SOE PCR高效组装人单链抗体在高容量人天然噬菌体抗体库中的应用被引量：3
- 2006年
- 目的探讨新式SOEPCR高效组装人单链抗体在高容量人天然噬菌体抗体库中的应用。方法通过引物设计的改变,将6种人VH基因和11种人VL基因利用两步法直接互相两两连接为人scFv基因,并且与传统的SOE法进行对比。scFv基因用于构建噬菌体单链抗体库。结果新式SOEPCR法成功的将6种人VH基因和11种人VL基因连接成66种不同的人scFv基因,与传统的SOEPCR法相比,效率高且方法简便,经过约130次电转化后,抗体库的总库容为5·58×109。结论成功地改进了传统的SOEPCR方法,高效组装了66种不同的人scFv基因,提高了抗体库的多样性。
- 唐晓明杨俊涛王清明汪思应
- 关键词：抗体细菌免疫球蛋白类重链
- MiR-130a靶向调控CYLD基因及其对肝癌细胞增殖的影响被引量：4
- 2014年
- 目的:检测microRNA-130a(miR-130a)在肝癌中的表达水平及其对CYLD基因表达的调控,并探讨miR-130a对肝癌细胞增殖的影响.方法:采用qRT-PCR检测miR-130a在原发性肝癌组织及对应的癌旁组织、肝癌细胞系和正常肝细胞中的表达差异,利用靶基因预测分析软件预测miR-130a潜在靶基因CYLD后,构建携带靶基因CYLD野生型及突变型3'UTR序列的双荧光素酶报告基因质粒,应用双荧光素酶报告基因实验体系进行验证;采用miR-130a抑制剂下调肝癌细胞系HepG2中miR-130a的表达,Western blot检测CYLD蛋白的表达变化;MTT法检测肝癌细胞增殖的改变.结果:MiR-130a在原发性肝癌组织中的表达明显高于对应的癌旁组织(P<0.05),在肝癌细胞系中的表达也显著高于正常肝细胞(P<0.05);双荧光素酶报告基因系统验证CYLD是miR-130a的直接靶基因;HepG2细胞中转染miR-130a抑制剂下调miR-130a表达后.Western blot检测结果显示CYLD蛋白表达水平显著上调;miR-130a抑制剂转染的HepG2细胞其增殖受到明显抑制.结论:MiR-130a在肝癌中表达上调,下调miR-130a后可以促进靶基因CYLD的表达,并可以抑制肝癌细胞的增殖活性,miR-130a有可能成为原发性肝癌治疗的新靶点.
- 倪芳赵华汪心怡陈卓汪思应
- 关键词：原发性肝细胞癌增殖
- 苹果皮提取物及有效成分C3G对小鼠乳腺恶性肿瘤生长的影响
- 2015年
- 目的探讨苹果皮提取物及其有效成分矢车菊-3-葡萄糖苷(C3G)对乳腺恶性肿瘤生长的影响。方法建立E0771小鼠乳腺癌移植瘤模型,观察饮用苹果皮汁对小鼠乳腺恶性肿瘤生长的影响。免疫组化法分析饮用苹果皮汁与饮用普通无菌水组小鼠恶性肿瘤组织中CD31表达差异。HPLC法分析苹果皮提取物中的化学成分。3D Matrigel胶血管形成实验探讨苹果皮成分C3G对小鼠乳腺恶性肿瘤血管形成的影响。MTT法和Transwell实验观察C3G对血管内皮细胞SVEC增殖和迁移能力的影响。结果饮用含有1%和2%浓度的苹果皮汁无菌水对乳腺恶性肿瘤生长起到抑制作用。免疫组化法染色显示饮用苹果皮汁肿瘤中CD31表达低于未饮用苹果皮汁组。HPLC法分析显示C3G是苹果皮提取物的有效成分之一。3D Matrige胶实验显示C3G抑制小鼠乳腺癌细胞E0771血管生成。C3G血管形成抑制小鼠内皮细胞SVEC的迁移能力。结论苹果皮提取物及其有效成分C3G抑制小鼠乳腺癌生长,该作用可能通过抑制血管生成而实现。
- 郭强汪心怡朱其苹范楚苓朱佩任海风李菲菲汪思应
- 关键词：乳腺癌苹果皮
- EDAG-1在人髓系白血病细胞株中的表达被引量：6
- 2004年
- 目的 研究EDAG 1在人髓系白血病细胞株中的表达情况。方法 选取 4种人髓系白血病细胞株分别通过NorthernBlot、PCR、WesternBlot、SouthernBlot了解EDAG 1基因在mRNA、蛋白以及其基因组结构表达情况 ;通过凝胶阻滞实验分析选用白血病细胞系NF κBDNA结合活性。结果 发现向红系分化的K 5 6 2、HEL在mRNA、蛋白水平均高表达EDAG 1基因 ,但未发现突变、扩增和重排。HL 6 0细胞缺失EDAG 1基因。 4种白血病细胞株NF κBDNA结合活性是增强的 ,以高表达EDAG 1基因的细胞株明显。结论 红系白血病细胞株高表达EDAG 1基因 ,该基因的激活可能与编码区结构无关。
- 周颖许望翔郑红李菲菲詹轶群李长燕徐诚望杨晓明汪思应
- 关键词：白血病基因表达EDAG-1
- 获得性异位骨化的研究进展被引量：9
- 2017年
- 获得性异位骨化(aHO)是指正常骨骼系统之外出现的异常骨组织。aHO的创伤来源丰富且病因复杂,BMP信号通路、Hedgehog信号通路、Wnt/β-catenin信号通路和NF-κB信号传导通路在aHO的致病过程中发挥重要作用。
- 胡洋洋卢海妹刘亚坤姜玉阚立新
- 关键词：信号通路致病机制
- 嵌合抗原受体T细胞免疫疗法的研究进展
- 2020年
- 嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞是经基因工程修饰后表达靶向肿瘤细胞CAR分子的T细胞。CAR-T细胞治疗在血液肿瘤治疗中展现了显著的疗效而备受关注,是一种新的肿瘤免疫疗法。目前,CAR-T细胞治疗在实体瘤治疗中还面临着很大的挑战。而且,在临床应用的过程中仍会出现一些不良反应,如细胞因子释放综合征、神经毒性、归巢障碍、溶瘤综合征及脱靶效应等。本文就CAR-T疗法的基本原理及临床应用与不良反应展开做一综述。
- 罗宇希李菲菲刘康何治尧
- 关键词：肿瘤
- “三段式”机能学实验体系在整合课程中的应用被引量：2
- 2022年
- 整合课程中的机能学实验以动物实验为主,不能满足本科医学教育标准对临床医学专业学生培养的基本要求。医学实验教学要不断更新教学理念,改变教学模式,改善实验教学软硬件。为了提高人才培养质量,采用人体机能学实验、动物机能学实验和虚拟仿真病例构建“三段式”机能学实验新体系,分别以血压调节和呼吸运动为主线进行内容上纵向的联系,真正实现以系统为中心、生理-病理生理-疾病的有机整合,并应用于心血管系统和呼吸系统的实验教学中,通过虚实互动,实现了基础与临床的结合,提高学生的实践能力和创新能力,有利于自主学习能力的培养,为进一步提升机能学实验教学在整合课程中的教学水平,培养高素质医学人才奠定基础。
- 尹艳艳张骏艳范一菲刘珺陈昌锋余孝海范涛涛
- 关键词：机能学实验教学整合课程教学改革
- 异位骨化的预防与治疗被引量：4
- 2018年
- 异位骨化(HO)是正常骨骼系统之外的软组织出现异常新生骨。目前除使用常规药物外,还可以通过小分子受体兴奋剂/抑制剂、基因治疗、中和抗体和放射治疗等靶向异位骨形成的微环境、必要信号通路、关键中介及前体细胞等进行预防与治疗,此外手术切除是异位骨化最直接有效的治疗方法。本文还对不同防治方法的局限性做了总结,希冀为临床治疗提供新思路。
- 丁纳卢海妹刘亚坤姜玉阚立新
- 关键词：异位骨化
