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新疆生产建设兵团绵羊繁育生物技术重点实验室: 作品数：35 被引量：103H指数：6; 相关作者：李静唐红郭延华宋志强郭燕更多>>; 相关机构：石河子大学新疆生产建设兵团四川农业大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划新疆生产建设兵团绵羊繁育生物技术重点实验室开放课题更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生经济管理更多>>

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牛病毒腹泻病毒(BVDV)E2重组蛋白ELISA检测方法的初步建立被引量：4: 2010年; 【目的】为牛病毒性腹泻病毒抗体快速检测提供敏感、特异检测方法。【方法】重组质粒pET-(1-345)转化宿主菌BL21(DE),以IPTG进行诱导表达,使外源基因获得了较高水平的表达;Westem一blot检测表达产物反应原性,同时进行特异性检测;将收集的纯培养物进行超声波裂解后以His bind kit蛋白质纯化试剂盒纯化回收目的蛋白,再以纯化后的目的蛋白作为包被抗原进行方阵滴定试验,确定目的蛋白作为包被抗原的最佳稀释度。【结果】重组蛋白表达可达菌体蛋白总量的19.7%,且具有较好的反应原性和特异性,以此方法建立的间接ELISA方法对收集的约43头份血清样品进行检测,检测阳性结果与进口试剂盒检测结果符合率达到93.55%。【结论】以BVDV E2重组蛋白作为抗原建立的间接ELISA检测方法是可行的,为其进一步的标准化莫定基础。; 钟发刚黄新王新华李娜; 关键词：牛病毒性腹泻病毒 ELISA

牛病毒性腹泻病毒玛纳斯株E2基因的克隆及其主要抗原表位区的分段表达被引量：5: 2009年; 应用RT-PCR方法扩增了牛病毒性腹泻病毒(BVDV)新疆玛纳斯分离株的E2基因,应用软件对序列进行分析,预测了可能存在的抗原表位;分别扩增了包含预测抗原位点的片段(1～118)-(144～340)-(100～300)-(1～345),并将其克隆到pMD18-T Si mple载体中;将重组质粒pMD-(1～118)、pMD-(144～340)、pMD-(100～300)、pMD-(1～345)的HindⅢ+BamHI双酶切产物分别插入pET28a(+),构建了原核表达载体pET-(1～118)、pET-(144～340)、pET-(100～300)、pET-(1～345)。将这些原核表达载体分别导入BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,收集菌液进行SDS-PAGE分析,结果显示,4个重组质粒在BL21(DE3)中均成功表达,表达融合蛋白的分子质量分别为18.6、28.2、29.2和43.9 ku,与预测蛋白质分子质量一致,Western-blot分析结果表明,28.2、29.2和43.9 ku的融合蛋白可被牛抗BVDV阳性血清识别。; 黄新王新华钟发刚; 关键词：牛病毒性腹泻病毒 E2基因克隆抗原表位

乳及乳制品中朊蛋白及其安全性研究进展被引量：2: 2010年; 朊蛋白(prion proteins,PrP)是近年来确认的引起人畜共患病的新型蛋白质类传染源,其在乳及乳制品中的存在直接关系到乳产品安全和人类健康。本文对朊蛋白生物学特点、乳及乳制品中朊蛋白的来源和含量以及安全性进行了综述,以便为乳制品加工和安全评价提供参考。; 管峰石国庆赵进杨利国; 关键词：朊蛋白乳制品安全性

电穿孔转染制备绵羊诱导多潜能干细胞条件的优化被引量：3: 2015年; 为优化获得绵羊诱导性多潜能干细胞(iPS cell)的诱导条件,通过4-D电转染仪,将含有人Oct4、Sox2及Klf4、c-Myc及lin28基因的3个质粒共转染绵羊成纤维细胞,从EH-100、EN-150、CZ-167、CA-137电转程序筛选出适合绵羊成纤维细胞的电转染程序;探讨不同细胞密度、质粒质量浓度、质粒质量浓度比及维生素C对诱导性多潜能干细胞克隆形成的影响。结果表明,采用EH-100电转程序,在细胞密度为5×106 mL-1、质粒质量浓度比为1∶1∶1、质粒总质量浓度为0.1mg·L-1、培养液中添加维生素C的质量浓度为0.05mg·L-1时,AP染色阳性(AP+)克隆形成的效率可达到14.0%。说明,优化后的电转染方法和培养方案可有效提高绵羊诱导性多潜能干细胞的制备效率。; 王聪慧赵帅张译元王立民李炜杰赵兴旺丁新平张银国周平; 关键词：电穿孔转染

新疆石河子地区隐性乳房炎致病菌调查及分离鉴定被引量：8: 2014年; 针对新疆石河子地区不同牛场（A牛场、B牛场）7—9月奶牛隐性乳房炎的发病情况以及主要致病菌进行调查,采用CMT法和体细胞分析仪（SCC）法相结合,随机抽取122头处于泌乳期的奶牛,对2种检测方法均为阳性的奶牛再进行致病菌的分离与鉴定。结果表明,新疆石河子地区A牛场、B牛场7—9月奶牛隐性乳房炎阳性率分别为86.1%、44.0%,阳性乳区率分别为41%、26%。SCC法检测结果显示,A牛场0-30万个/mL占8.3%,31万-60万个/mL占22.2%,61万-100万个/mL占18.1%,101万-200万个/mL占20.8%,200万以上个/mL占30.6%;B牛场0-30万个/mL占30%,31万-60万个/mL占32%,61万-100万个/mL占12%,101万-200万个/mL占14%,200万个/mL以上占12%。采用CMT和SCC检测仪相结合的方法提高了隐性乳房炎检出率,且隐性乳房炎的检测由定性检测转向了定量检测。由以上结果可见,新疆石河子地区7—9月是奶牛隐性乳房炎的高发季节。; 刘长彬钟发刚卢春霞康立超李永刚姜志涛刘岗罗小玲; 关键词：奶牛隐性乳房炎高发季节致病菌

利用CRISPR-Cas9技术获得绵羊FecB基因定点突变的研究: 多胎性基础母羊的经济性状有着重要的影响,目前已发现多个绵羊品种由于FecB基因座外显子7上一个A-G突变,明显增加了产羔数.本实验的利用CRISPR-Cas9与Oligo Donor DNA注射技术对绵羊FecB基因进行...; 王立民李伟周平; 关键词：绵羊 FECB基因定点突变

捻转血矛线虫Hc38基因RNA干扰效果被引量：2: 2009年; 荣光赵军明王新华薄新文; 关键词：捻转血矛线虫基因功能 RNAI DSRNA FIRE

羔羊口蹄疫母源抗体和免疫抗体消长情况的观察(初报)被引量：1: 2008年; 李静刘让邢玫张鲁安周亚陈少平袁立刚蒲敬伟陆敬文张怀生李岩; 关键词：口蹄疫抗体消长母源抗体羔羊二价灭活疫苗防制工作

牛病毒性腹泻病毒单克隆抗体捕获ELISA方法的建立: 以纯化的牛病毒性腹泻病毒（BVDV）作为抗原免疫BALB/C系小鼠，通过细胞融合和克隆筛选出稳定分泌BVDV抗体的杂交瘤细胞株，将杂交瘤细胞接种BALB/C系小鼠的腹腔内诱生腹水，腹水单抗与BVDV均呈阳性反应。将5A9...; 钟发刚程安春王新华邓宇郭燕; 关键词：牛病毒性腹泻病毒单克隆抗体 ELISA法杂交瘤细胞株; 文献传递

转IGF-1基因超细毛羊培育的研究: 为进一步培育高产超细毛羊新品种,利用转基因体细胞克隆获得的转IGF-1基因超细毛羊,采用染色体步移、基因组重测序的方法明确插入基因的位点,结合定量PCR和western-blot,检测了IGF-1基因在不同组织和不同代次...; 周平王立民唐红郭延华张译元刘守仁王新华