暨南大学生命科学技术学院免疫生物学系
- 作品数：23 被引量：96H指数：6
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- 相关机构：广西医科大学药学院广州中医药大学基础医学院广州中医药大学基础医学院中西医结合基础研究中心更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 伊立替康对RAW264．7巨噬细胞增殖和细胞凋亡的影响被引量：2
- 2015年
- 目的分析抗肿瘤药伊立替康(CPT-11)对RAW 264.7巨噬细胞增殖及细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法WST-1法检测CPT-11对RAW 264.7细胞增殖的作用,倒置显微镜观察CPT-11对RAW 264.7细胞形态的影响,Hoechst33342染细胞核观察RAW 264.7细胞的核形态,流式细胞术检测亚二倍体(凋亡峰)的变化,免疫印迹法检测Caspase-3活化、PARP及细胞周期相关蛋白的变化。结果 CPT-11能明显抑制RAW 264.7细胞增殖,并呈时间和剂量依赖性。在CPT-11作用下RAW 264.7细胞体积增大,细胞核增大,部分细胞发生核碎裂(细胞凋亡),并且原本贴壁生长、具有伪足的细胞变圆脱落。流式细胞术结果也显示,CPT-11可诱导RAW 264.7细胞产生亚二倍体峰(凋亡细胞),且细胞凋亡率呈浓度依赖性上升。同时,处于G2/M期细胞也明显增多,且呈浓度依赖性。免疫印迹分析显示,CPT-11可活化Caspase-3,使PARP水平下降,同时上调细胞周期蛋白Cyclin B1,下调Cyclin D1的表达。结论伊立替康通过诱导细胞周期阻滞而抑制RAW 264.7细胞增殖,通过激活Caspase-3通路诱导细胞凋亡。
- 黄美云潘浩徐丽慧侯小凤查庆兵施资坚何贤辉欧阳东云
- 关键词：伊立替康RAW细胞增殖细胞周期细胞凋亡
- 环氧合酶1是化学肝损伤的重要保护因子
- 环氧合酶-1(COX-1)是COX 家族中组成性表达的成员。为探讨COX-1 在急性肝损伤中的作用和机制，通过注射四氯化碳(CCl4)诱导野生型或COX-1 敲除小鼠的急性肝损伤，研究各种损伤表征的变化。结果表明，完全或...
- 肖佳邢飞跃George L.Tipoe
- 关键词：细胞生物学环氧合酶四氯化碳前列腺素急性肝损伤
- 脱细胞的细胞外基质材料植入小鼠腹腔不影响小鼠固有免疫应答
- 2016年
- 目的研究脱细胞的细胞外基质(ECM)材料植入小鼠后对其固有免疫(包括巨噬细胞和中性粒细胞)的影响,初步建立一套以小鼠为实验动物的动物源材料免疫原性去除效果的测试评价方法。方法将新鲜膜材料和新工艺制备的脱细胞和除DNA的ECM材料移植到小鼠腹腔中,7 d后,检测脾脏指数的变化,采用BD绝对计数管检测小鼠外周血中性粒细胞和腹腔液巨噬细胞的绝对数量,采用小鼠Th1、Th2、Th17细胞因子流式微球分析技术检测小鼠血浆和腹腔液白细胞介素2(IL-2)、IL-4、IL-6、γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-17A和IL-10分泌。结果使用新鲜膜材料的小鼠体质量不增加、但脾脏指数增加,小鼠外周血中性粒细胞和腹腔液巨噬细胞的数量明显增加,IL-6和IFN-γ的分泌水平增加。而使用脱细胞的ECM材料小鼠以上参数仅有微弱的影响或无影响。结论脱细胞、除DNA的ECM材料对小鼠的固有免疫应答无明显影响。
- 徐斌黄秀艳韦晓慧曾耀英
- 关键词：细胞外基质固有免疫中性粒细胞
- 葫芦素E对脂多糖诱导RAW264.7巨噬细胞炎症反应的影响及作用机制被引量：8
- 2012年
- 分析葫芦素E(CuE)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞炎症反应的影响,研究其抗炎作用的分子机制。采用改良MTT法检测RAW264.7细胞的增殖;以碘化丙锭染色检测CuE对细胞周期的影响;采用细胞内细胞因子染色法分析肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达;免疫荧光染色分析胞内Actin的结构;应用免疫印迹法检测CuE对G-肌动蛋白(G-ac-tin)及核转录因子NF-κB核转位的影响。实验结果显示CuE对RAW264.7细胞的增殖具有剂量依赖性抑制作用,并降低细胞内G-actin的水平;CuE明显阻止LPS诱导的细胞伸展和伪足形成,使细胞周期阻滞于G2/M期。同时,CuE还明显抑制LPS活化的RAW264.7细胞表达促炎因子TNF-α,并显著降低LPS诱导的转录因子NF-κB的核转位作用。这些结果表明,CuE通过破坏RAW264.7巨噬细胞的肌动蛋白细胞骨架,引起细胞周期阻滞,并抑制LPS诱导的NF-κB核转位以及TNF-α的表达,从而发挥抗炎作用。
- 乔静徐丽慧何健欧阳东云何贤辉
- 关键词：RAW264.7细胞脂多糖肌动蛋白细胞骨架
- 柯里拉京抑制LPS和ATP激活的NLRP3炎症小体和巨噬细胞焦亡被引量：3
- 2023年
- 目的探讨柯里拉京对细菌脂多糖(LPS)联合腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)诱导的巨噬细胞内NLRP3炎症小体活化和细胞焦亡的调控作用和机制。方法采用CCK8试剂检测不同浓度柯里拉京对J774A.1细胞活力的影响;碘化丙啶(PI)染色和乳酸脱氢酶(LDH)释放检测柯里拉京对LPS+ATP诱导的细胞死亡的影响。Western blot法检测细胞上清液中炎症小体活化标志物caspase-1 p20(Mr20000)和成熟IL-1β(Mr17000)的表达水平,以及检测细胞内NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β前体(pro-IL-1β)和焦亡执行蛋白GSDMD的表达。ELISA检测细胞培养上清液中IL-1β的水平。活性氧(ROS)荧光探针H2DCFDA染色观察柯里拉京对ROS产生的影响。结果柯里拉京浓度小于40μmol·L-1时对细胞活性影响较小。柯里拉京减少LPS+ATP刺激的细胞内PI阳性细胞的比例和LDH的释放。柯里拉京抑制LPS+ATP刺激的巨噬细胞内GSDMD蛋白N末端(GSDMD-NT)的表达,以及减少细胞释放caspase-1 p20和成熟IL-1β到培养上清。柯里拉京抑制细胞分泌炎症因子IL-1β和减少ROS的产生。然而ROS的诱导剂鱼藤酮能拮抗柯里拉京抑制NLRP3炎症小体活化和细胞焦亡的作用。结论柯里拉京抑制LPS+ATP诱导的巨噬细胞内NLRP3炎症小体活化和细胞焦亡依赖于抗氧化作用。
- 罗甜裕周小艺秦敏燕张莹潘浩黄晓迪
- 关键词：柯里拉京巨噬细胞抗氧化
- 葫芦素E对人外周血单个核细胞体外活化及细胞因子表达的影响被引量：1
- 2015年
- 目的:分析葫芦素E(Cuc E)对二丁酸佛波醇酯(PDB)和离子霉素(Ion)刺激的人外周血单个核细胞(PBMC)活化及促炎因子表达的影响,探讨其潜在的抗炎效应及作用机制.方法:利用流式细胞术分析人外周血PBMC活化抗原CD69和CD25表达,用流式微球陈列检测白介素2(IL-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和干扰素γ(IFN-γ)表达的变化.结果:Cuc E能明显抑制PDB和Ion刺激引起的CD3+T细胞早期活化标志分子CD69和中期活化分子CD25的表达;同时,Cuc E以剂量依赖方式抑制PDB和Ion诱导的IL-2、TNF-α和IFN-γ的表达.结论:Cuc E对人外周血CD3+T细胞的活化具有明显抑制作用,同时减少炎症相关细胞因子的表达,提示其通过对适应性免疫的调控发挥抗炎效应.
- 王力先张晓钰潘浩徐丽慧欧阳东云何贤辉
- 关键词：人外周血单个核细胞CD69CD25细胞因子
- 靶向作用G-四链体DNA的金属配合物的研究进展
- 2013年
- 富含鸟嘌呤(G)碱基DNA能够通过Hoogsteen氢键形成四螺旋结构,该结构被称为G-四链体。诱导端粒DNA形成G-四链体并稳定该结构能起到抑制端粒酶活性,从而达到促进肿瘤细胞凋亡的作用。近年来,G-四链体DNA已成为设计抗肿瘤药物的重要靶点,文章综述铂(Ⅱ)配合物、钌(Ⅱ)配合物、镍(Ⅱ)配合物、铜(Ⅱ)配合物、锌(Ⅱ)配合物及其他金属配合物靶向作用G-四链体DNA的研究进展。
- 夏钰邢飞跃
- 关键词：端粒酶抗肿瘤金属配合物铂钌
- 葫芦素E抑制HeLa细胞mTORC1的活性并诱导细胞自噬被引量：3
- 2014年
- 目的研究葫芦素E诱导HeLa细胞发生细胞自噬的作用机制。方法改良MTT法测定葫芦素E对HeLa细胞增殖的影响,免疫印迹法检测mTORC1下游信号蛋白的磷酸化以及自噬相关蛋白的表达。结果葫芦素E对HeLa细胞增殖有剂量依赖性抑制作用,其24 h的IC50为4.01μmol·L-1。通过对mTORC1底物磷酸化水平的检测发现,葫芦素E对p70S6K的磷酸化(活化)作用有明显的剂量和时间依赖性抑制作用。同时,葫芦素E增加自噬小体标志物LC3-Ⅱ的表达,氯喹能进一步提高其水平;葫芦素E还能降低p62/SQSTM1的水平,表明诱导了完整的细胞自噬过程。细胞自噬的诱导与mTORC1下游底物ULK1S757磷酸化水平的下降有正相关性。结论葫芦素E可能通过抑制mTORC1活性而诱导细胞发生自噬作用。
- 张晓钰徐丽慧赵高翔潘浩周单欧阳东云何贤辉
- 关键词：P70S6KHELA细胞细胞自噬
- 雪胆素甲通过破坏微丝结构诱导LPS活化的RAW264.7细胞凋亡被引量：8
- 2012年
- 目的分析雪胆素甲(CuIIa)对脂多糖(LPS)活化的RAW264.7巨噬细胞的影响,探讨其潜在的抗炎效应及作用机制。方法MTS法检测CuIIa对RAW264.7细胞增殖的作用,相差显微镜观察CuIIa对LPS活化的细胞形态的影响,荧光显微镜观察CuIIa对细胞骨架的影响,流式细胞仪检测亚二倍体(凋亡)峰的变化,免疫印迹检测Cleaved caspase-3、生存素以及G-actin与F-actin的变化。结果 CuIIa能明显抑制RAW264.7细胞的增殖,并呈时间和剂量依赖性,但单独CuIIa不能有效诱导细胞凋亡。CuIIa使LPS活化的伸展细胞收缩变圆,伪足突起消失,G-actin水平下降,细胞内发生严重的Actin聚集,说明微丝结构被破坏。随着CuIIa浓度的增加,其诱导LPS活化的RAW264.7细胞处于sub-G0/G1(凋亡峰)的数量明显增加。免疫印迹分析显示CuIIa使Caspase-3明显活化,生存素急剧下降。结论 CuIIa可能通过引起Actin聚集而破坏微丝细胞骨架,诱导LPS活化的RAW264.7细胞发生凋亡,从而发挥其抗炎效应。
- 何健徐丽慧乔静欧阳东云何贤辉
- 关键词：RAW264.7细胞凋亡生存素微丝
- 二甲双胍增强LPS激活的腹腔巨噬细胞在ATP刺激下的炎症小体活化被引量：9
- 2017年
- 目的以脂多糖(LPS)激活的腹腔巨噬细胞为炎症细胞模型,探讨糖尿病常用药物二甲双胍对胞外ATP诱导炎症小体活化并释放白细胞介素-1β(IL^(-1)β)的影响。方法C57BL/6小鼠腹腔注射30 g·L^(-1)巯基乙酸盐(thioglycollate,TG)诱导腹腔巨噬细胞大量产生;利用LPS+ATP处理激活炎症小体,采用碘化丙锭(PI)染色法检测二甲双胍对LPS+ATP诱导的腹腔巨噬细胞焦亡的影响,免疫印迹法检测该细胞胞内及上清中IL^(-1)β和caspase-1的表达水平;免疫荧光技术检测巨噬细胞P_2X_7嘌呤能ATP受体7(P_2X_7R)的亚细胞分布及荧光强度。结果单独二甲双胍不会导致LPS激活细胞发生焦亡,但二甲双胍呈剂量依赖性促进LPS+ATP诱导的细胞焦亡;免疫印迹法显示,在蛋白水平上,单独LPS(或LPS+二甲双胍)刺激不能诱导细胞释放成熟IL^(-1)β(17 ku)到细胞外;当加入ATP刺激后,成熟IL^(-1)β和活化caspase-1(10 ku)释放到胞外;而二甲双胍可以剂量依赖性地促进LPS激活、ATP刺激下腹腔巨噬细胞释放成熟IL^(-1)β和活化caspase-1的水平。结论二甲双胍增强LPS激活的腹腔巨噬细胞在ATP刺激下的炎症小体活化,提高caspase-1活化和成熟IL^(-1)β释放,促进炎症反应。
- 魏红霞李陈广梁译丹徐丽慧潘浩何贤辉欧阳东云
- 关键词：二甲双胍腹腔巨噬细胞白细胞介素-1Β
