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河南农业大学牧医工程学院河南省动物性食品安全重点实验室: 作品数：12 被引量：98H指数：6; 相关作者：王亚斌更多>>; 相关机构：南京农业大学动物医学院更多>>; 发文基金：国家科技支撑计划河南省杰出人才创新基金国家科技重大专项更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生更多>>

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南京农业大学动物医学院

猪α干扰素在杆状病毒中表达及其对PRRSV的抑制作用被引量：4: 2009年; 猪α干扰素具有抗病毒作用,临床上具有广阔的应用前景。为获得重组猪α干扰素,本研究应用Bac-to-Bac杆状病毒/昆虫细胞表达系统,将编码成熟猪α干扰素基因插入供体质粒pFastBacTMⅠ多克隆位点,置于pH启动子控制下,在C端融合6个组氨酸标签以利于纯化。将重组转移载体质粒转化DH10感受态细胞获得重组穿梭质粒rBacmid,转染对数生长期的Sf9昆虫细胞获得重组杆状病毒。重组蛋白通过间接免疫荧光、Western-blotting证明在重组杆状病毒感染的昆虫细胞中获得表达。镍亲和层析柱纯化的重组蛋白经SDS-PAGE电泳相对分子质量为19 000。通过在猪肾细胞(PK-15)上抑制猪水泡性口炎病毒(VSV)致病变作用检测其抗病毒活性为9.67×104U/mL。昆虫培养上清及细胞裂解液经28稀释在Marc-145细胞上能够抑制猪蓝耳病病毒增殖。从而为进一步作为抗病毒药物应用于猪疫病的防治研究奠定了基础。; 王彦彬黄艳群崔保安陈红英王亚宾张红英; 关键词：干扰素杆状病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒

猪干扰素α和γ在杆状病毒中共表达及对PRRSV抑制作用被引量：16: 2011年; 【目的】制备复合型猪干扰素α和γ进行应用抗病毒研究。【方法】本研究应用Bac-to-Bac杆状病毒/昆虫细胞表达系统,将编码猪干扰素α和γ成熟蛋白基因插入供体质粒pFastBacDual,分别置于PH和P10启动子控制下,引入蜂素信号肽(honeybee melittin signal peptide,HBM)基因取代猪干扰素α和γ原有信号肽基因以实现分泌型表达,并在C端分别融合6个组氨酸标签以利于纯化。将构建质粒转化DH10感受态细胞进行同源重组,获得重组穿梭质粒Bacmid,转染对数生长期的Sf9昆虫细胞获得重组杆状病毒。重组杆状病毒感染昆虫细胞,鉴定重组蛋白的活性。【结果】通过间接免疫荧光、Western-blot证明猪干扰素α和γ重组蛋白在重组杆状病毒感染的昆虫细胞中均获得表达,表达产物主要分布在培养上清中。通过在猪肾细胞(PK-15)上抑制水泡性口炎病毒(VSV)致病变作用检测重组蛋白的抗病毒活性,结果表明:昆虫细胞上清的抗病毒效价达到3.24×107 U.mL-1。在Marc-145细胞,昆虫细胞上清经2-11稀释能够抑制100个TCID50的PRRSV的致细胞病变作用。【结论】应用杆状病毒表达系统实现猪干扰素α和γ在昆虫细胞上分泌共表达,重组蛋白在细胞上对PRRSV具有抑制作用。; 王彦彬孙向丽魏战勇陈红英杨明凡崔保安; 关键词：干扰素杆状病毒繁殖与呼吸综合征病毒

中药在兽医临床中应用的研究进展被引量：13: 2009年; 许多中药具有抗细菌、抗病毒、抗真菌和提高机体免疫力等作用,中药以其独特药理作用愈来愈受到人们的关注,其在兽医临床上得到越来越多的应用,并取得了良好效果。笔者就近年来中药药理学作用研究与其在兽医临床中的应用相结合作一简要概述,对目前中药研究存在的问题作了分析,并对中药在兽医临床中的应用前景作了展望。; 李双亮崔保安张红英; 关键词：中药兽医临床

猪干扰素α在昆虫细胞中分泌表达及其抗病毒活性检测被引量：12: 2009年; 【目的】为获得重组猪干扰素α。【方法】本研究应用Bac-to-Bac杆状病毒/昆虫细胞表达系统,将编码成熟猪干扰素α基因插入供体质粒pFastBacⅠ多克隆位点,置于pH启动子控制下,昆虫可识别的蜂素信号肽(honeybeemelittinsignalpeptide,HBM)取代猪干扰素α原有信号肽以实现分泌型表达,并在C端融合6个组氨酸标签以利于纯化。将构建质粒转化DH10感受态细胞进行同源重组,经抗性和蓝白斑筛选,获得重组穿梭质粒Bacmid,转染对数生长期的Sf9昆虫细胞获得重组杆状病毒。【结果】重组蛋白通过间接免疫荧光、Western-blot证明重组蛋白在重组杆状病毒感染的昆虫细胞中获得分泌表达。通过在猪肾细胞(PK-15)上抑制水泡性口炎病毒(VSV)致病变作用检测重组蛋白的抗病毒活性,结果表明:昆虫细胞上清的抗病毒效价达到1.07×105U·ml-1,昆虫细胞裂解液的抗病毒效价为3.15×104U·ml-1。【结论】应用蜂素信号肽实现猪干扰素α在昆虫细胞上分泌表达,为临床上防治猪病毒性疫病奠定了基础。; 王彦彬崔保安陈红英王亚宾张红英魏战勇; 关键词：干扰素杆状病毒昆虫细胞抗病毒活性

板蓝根多糖对猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫猪T细胞亚群的影响被引量：30: 2007年; 目的:研究板蓝根多糖对猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗免疫猪T细胞亚群及抗体的影响。方法:以板蓝根多糖作为免疫增强剂联合猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗免疫仔猪,通过流式细胞仪检测猪外周血CD3+、CD4+、CD8+细胞百分数,并用ELISA法检测猪血清中抗猪繁殖障碍与呼吸道综合征病毒抗体水平。结果:板蓝根多糖能显著提高仔猪的CD3+、CD8+淋巴细胞的百分数和特异性抗体滴度。结论:板蓝根多糖能显著增强猪对常规灭活病毒疫苗的免疫应答能力。; 张红英赵现敏崔保安夏平安邱妍胡梅王远阁; 关键词：板蓝根多糖免疫增强剂仔猪猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗 T细胞亚群

转移因子与重组转移因子及其在疾病防治中的应用被引量：11: 2006年; 转移因子是来自于免疫淋巴细胞的一类可透析小分子多肽,它能够将致敏淋巴细胞的免疫信息传递给未致敏的受体淋巴细胞。转移因子具有特异性和非特异性免疫活性,特异性转移因子具有转移特异性细胞免疫的能力,非特异性转移因子具有促进淋巴细胞活化增殖,增强其免疫活性,并可诱导靶细胞产生大量的细胞因子。重组转移因子是利用基因工程技术将编码具有免疫增强活性的转移因子基因,进行克隆和体外表达,表达产物经纯化制备而成,试验表明其具有增强细胞免疫活性的作用。转移因子和重组转移因子是一种具有免疫增强活性的新型高效安全的生物药品,在临床上用于疾病的防治,具有广阔的应用前景。; 王彦彬崔保安康相涛夏平安王亚斌张红英; 关键词：生物学活性

猪α干扰素基因在乳酸杆菌中的表达及活性检测: 引言猪α-干扰素(IFN-α)作为一种有效抗病毒细胞因子,是猪体抵御病原入侵的早期防御系统之一。干酪乳酸杆菌(L.casei)能够有效调节肠道微生物之间的平衡,增强机体的免疫力和抵抗力。本研究首先将信号肽基因与猪α干扰素...; 马世杰李坤付朋飞郭晓庆高晓云陈红英; 关键词：猪Α干扰素抗病毒活性

表达猪圆环病毒2型ORF2基因的重组猪伪狂犬病病毒的免疫原性: 引言猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)全病毒灭活油乳苗虽对PCV2感染的控制发挥了重要作用,但由于PCV2生长慢,培养难度大,效价的测定需要借助免疫学试验,并且需要多次接种,因...; 付朋飞陈红英钞安军郭晓庆马世杰崔保安; 关键词：猪圆环病毒2型 ORF2基因猪伪狂犬病病毒免疫原性

PPV感染PK-15细胞后IL-6和IL-12表达量的研究: 宋月何潇湘曹贝贝于鹏飞徐卫松魏战勇; 关键词：PPV PK-15细胞 IL-6 IL-12

猪伪狂犬病毒河南分离株gE全基因的克隆与序列分析: 猪伪狂犬病病毒(PRV)主要引起妊娠母猪流产、产死胎和木乃伊胎；哺乳仔猪出现神经症状,麻痹,衰竭死亡,对养猪业危害严重.2012春季以来河南省多地规模化猪场发生疑似PR,为确定河南猪群中PRV流行毒株的遗传变异情况,本研...; 高晓云马世杰郭官鹏陈龙彪陈红英; 关键词：猪伪狂犬病毒 GE基因克隆

河南农业大学牧医工程学院河南省动物性食品安全重点实验室

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