乔宇
- 作品数：3 被引量：54H指数：3
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- 里氏木霉内切-β-葡聚糖酶Ⅱ基因在毕赤酵母中的表达及酶学性质研究被引量：35
- 2004年
- 采用外显子拼接的方法,以里氏木霉Trichoderma reesei基因组 DNA 为模板,克隆出内切-1,4-β-D-葡聚糖酶II基因egl2的全编码序列,将其插入巴斯德毕赤酵母Pichia pastoris表达载体pPIC9K中,并位于α-因子信号肽序列的下游,获得重组质粒pQY2025。重组质粒线性化后用电穿孔法导入毕赤酵母Pichia pastoris菌株GS115中,经大量筛选,获得高效分泌表达内切葡聚糖酶II的毕赤酵母工程菌株Gp2025。用甲醇诱导培养基进行摇瓶发酵,培养基中内切葡聚糖酶II的活力可达1573.0U/mL,同时对重组内切葡聚糖酶II的性质进行了初步研究。
- 乔宇毛爱军何永志刘伟丰董志扬
- 关键词：里氏木霉基因毕赤酵母
- 里氏木霉内切-β-甘露聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达被引量：13
- 2005年
- 采用PCR方法从里氏木霉(Trichoderma reesei)基因组中获得含有两个内含子的内切β甘露聚糖酶全长基因,末端重叠延伸PCR去除内含子后,将其插入到巴斯德毕赤酵母(Picher pastoris)表达载体pPIC9K中,位于α因子信号肽序列的下游,并与之同框,获得重组质粒pM242。重组质粒线性化后用电击法转化毕赤酵母菌株GS115。经大量筛选,获得高效分泌表达内切甘露聚糖酶的毕赤酵母工程菌株Gpmf25。摇瓶发酵结果表明,培养基中甘露聚糖酶的活力可达12.5IUmL。重组酶最适pH和最适反应温度分别为5.0和80℃,在pH5.0～6.0时酶活稳定,在pH5.4时70℃保温30min酶活维持50%以上。
- 韦跃华毛爱军何永志乔宇董志扬
- 关键词：分泌表达酶学性质
