何洪斌
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
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- 发文基金：山东省农业重大应用技术创新课题山东省优秀中青年科学家科研奖励基金国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 牛结核杆菌mpb-83基因的扩增和表达
- 2010年
- 采用PCR方法扩增牛结核杆菌mpb-83基因,并将其连接到T3克隆载体,然后克隆到原核表达载体PET-32 a中,构建重组质粒PET-32 a-mpb-83。以重组质粒转化大肠杆菌BL21,用NI柱纯化,最后纯化产物在SDS-PAGE中检测。结果得到约664 bp的目的片段,且MPB-83可在大肠杆菌BL21中高效表达。
- 李树春斯肯达尔杨宏军何洪斌王长法杨少华高运东仲跻峰
- 关键词：克隆原核表达
- 金黄色葡萄球菌聚集因子A(Clfa A)功能区基因的克隆及真核表达质粒构建
- 2010年
- 粘附素蛋白是金黄色葡萄球菌感染早期最重要的致病因子,研究根据金黄色葡萄球菌聚集因子A(clfa A)基因,设计合成特异性引物,以国内奶牛乳腺炎临床分离株金黄色葡萄球菌基因组为PCR模板,进行clfa A基因的克隆,并连接入pMD18-T载体进行测序和序列分析,然后经BamHⅠ和XbaⅠ双酶切后构建真核表达载体并进行鉴定。结果表明,以金黄色葡萄球菌标准株为对照,国内分离株多数在990 bp处扩增到特异性条带,经测序鉴定,与Genebank发表的金黄色葡萄球菌clfa A序列同源性为99%;构建的真核表达质粒通过PCR和双酶切鉴定证明构建成功,为研究核酸疫苗奠定基础。
- 魏春梅杨宏军彭广能何洪斌王长法高运东仲跻峰
- 关键词：乳腺炎金黄色葡萄球菌
