何琼
- 作品数：2 被引量：9H指数：2
- 供职机构：中山大学附属第三医院更多>>
- 发文基金：广州市科技计划项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 锁核酸探针实时荧光定量PCR检测HBV基因变异被引量：3
- 2011年
- 目的描述并评价锁核酸(locked nucleic acid,LNA)探针实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测乙型肝炎病毒(HBV)204位基因突变的方法及特点。方法分别用直接测序法、LNA探针实时荧光定量PCR检测109例接受拉米夫定(LAM)治疗6个月以上的慢性乙型肝炎患者的血清样本。结果 LNA探针实时荧光定量PCR能检测HBV野生型YMDD和其突变型YVDD、YIDD,而且这种方法还可以检测HBV野生型和变异型的混合。LNA探针相比普通探针在检测野生型和突变型混合样本方面更敏感,区分度更好。结论 LNA探针实时荧光定量PCR检测YMDD变异具有快速、灵敏等特点,可以用于大量临床样本的快速筛查,在监测拉米夫定治疗疗效及发现新耐药突变型等方面具有广泛的应用前景。
- 江洁丁渭陈华云何琼何蕴
- 关键词：荧光定量PCRYMDD乙型肝炎病毒
- MS-HRM检测游离甲基化SEPT9在结直肠癌早期诊断中的应用被引量：6
- 2012年
- 目的建立一种稳定的甲基化敏感高分辨率熔解曲线(MS-HRM)定量检测血浆游离甲基化SEPT9的方法,并初步探讨利用此方法进行结直肠癌早期诊断的可行性。方法按照不同比例混合甲基化和未甲基化DNA建立标准品,复管反应作出标准熔解曲线,定量检测36例结直肠癌患者血浆样本和20例正常人血浆样本甲基化SEPT9,并与Methylight进行比较。梯度稀释其中1例结直肠癌血浆游离DNA,分析其甲基化程度与DNA量是否独立。随机取2例结直肠癌样本重复甲基化修饰至MS-HRM分析,以排除修饰不完全对实验结果的影响。结果 SEPT9 MS-HRM法可检出混合甲样本中1%的甲基化,其检测灵敏度达1%。36例结直肠癌患者血浆中检测到25例(69.44%)有不同程度SEPT9基因甲基化,20例正常人血浆样本有2例(10%)呈现1%～5%甲基化。不同DNA量甲基化程度恒定,初步确定检测范围可达皮克级DNA。2例独立重复检测样本检测结果基本符合初次实验结果。结论 MS-HRM法检测游离的甲基化SEPT9简单易行,快速,稳定,敏感性高,检测样本范围广,有望为结直肠癌筛查开拓一个新平台。
- 王侦陈嘉昌何琼彭焕玉朱振宇陈华云李明
- 关键词：结直肠癌甲基化高分辨率熔解曲线
