凌华
- 作品数：4 被引量：13H指数：2
- 供职机构：东北农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：哈尔滨市科委攻关项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 防御素基因克隆和表达载体构建被引量：1
- 2004年
- 人防御素(HNP)是一类广谱抗菌阳离子小肽的总称,一般具有3个分子内二硫键。防御素对于细菌、真菌乃至某些被膜病毒有广谱杀伤作用,是免疫系统中的重要组分。实验根据已发表的HNP-1cDNA序列,设计并合成了一对引物。以HL-60细胞总RNA为模板,利用RT-PCR技术扩增目的片段并克隆到pUC18载体上,经筛选获得阳性重组子pUC18-HNP-1(pDFS1)。测序分析证实,扩增片段即为HNP-1cDNA。pDFS1再经SmaI与SalI酶切、插入pGEX-6p-1质粒构建HNP-1表达载体。利用PCR技术和酶切反应筛选转化子最终获得pGEX-6p-1-HNP-1(pDFS2)重组质粒。
- 凌华李璐韩放于艳波李景鹏
- 关键词：RT-PCR克隆
- 防御素基因原核表达载体构建及表达被引量：6
- 2004年
- 目的 :为了获得人防御素多肽 ,实验构建了防御素基因原核表达载体并使其在大肠杆菌中表达。方法 :采用从pUC18载体上回收HNP 1外源基因片段 ,使其与载体pET30b连接 ,获得pET30b HNP 1重组质粒 ,并在大肠杆菌BL 2 1(DE3)株中表达。结果 :发现人防御素融合蛋白得到表达。结论 :人防御素基因 (HNP 1)可在大肠杆菌BL 2 1(DE3)株中表达 。
- 李景鹏任桂萍郝艳秋凌华吴丹李璐于艳波韩放郝妍周文婷
- 关键词：融合蛋白
- 一步法快速纯化mRNA被引量：7
- 1999年
- 介绍一种针对 Ｒ Ｎ Ａ、ｍ Ｒ Ｎ Ａ 的理化及生物学特性，在酸性胍一步抽提法基础上加以改进，并配合ｏｌｉｇｏ （ｄ Ｔ）） 纤维素亲和层析法纯化提取ｍ Ｒ Ｎ Ａ 的方法， 此法具有简便、经济、快速、重复性好等多种优点。本实验通过对 Ｈｅｌａ 细胞、兔脾脏组织、菜豆苗ｍ Ｒ Ｎ Ａ 的分离提取， 并运用甲醛变性凝胶电泳及分光光度计检测， 证明采取此法所获得的ｍ Ｒ Ｎ Ａ 完全符合实验要求， 可广泛应用于ｃ Ｄ Ｎ Ａ 文库的建立、核酸探针制备、逆转录 Ｐ Ｃ Ｒ 多项生物学技术。
- 李景鹏何成强吴丹任桂萍凌华吕韵哲
- 关键词：MRNA一步法纯化
- 防御素基因克隆及其表达载体构建
- 人防御素是一类广谱抗菌阳离子小肽的总称,一般具有3~4个分子内二硫键.防御素对于细菌、真菌乃至某些被膜病毒有广谱杀伤作用,是免疫系统中的重要组分.该实验根据已发表的HNP-1 cDNA序列,设计并合成了一对引物.以HL-...
- 凌华
- 关键词：RT-PCR克隆
- 文献传递
