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刘一苇

作品数：2 被引量：6H指数：2
供职机构：清华大学生命科学学院结构生物学中心更多>>
相关领域：生物学理学更多>>

合作作者

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学
  • 1篇理学

主题

  • 2篇纯化
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白表达
  • 1篇毒素
  • 1篇毒素蛋白
  • 1篇衍生物
  • 1篇质谱
  • 1篇突变体
  • 1篇晶体
  • 1篇晶体结构
  • 1篇甲硫氨酸
  • 1篇氨酸
  • 1篇硒

机构

  • 2篇清华大学

作者

  • 2篇刘一苇
  • 2篇刘斌斌
  • 1篇江凡
  • 1篇饶子和
  • 1篇刘进元
  • 1篇何红珍
  • 1篇孙蕾
  • 1篇赵南明
  • 1篇徐峰
  • 1篇庞海
  • 1篇曹振波
  • 1篇陈宇航
  • 1篇唐洪
  • 1篇娄智勇

传媒

  • 1篇科学通报
  • 1篇生物化学与生...

年份

  • 1篇2004
  • 1篇2001
共 2 条 记 录，以下是 1-2
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排序方式：
硒代甲硫氨酸抗烟毒素蛋白衍生物的制备被引量：4
2001年
为利用硒原子的反常散射获取抗烟毒素蛋白晶体Ｘ射线衍射的相位信息，以质粒 ＰＱＥ－３０为表达载体，Ｅ．ｃｏｌｉ　Ｍ１５为宿主菌，在含有硒代甲硫氨酸的Ｍ９培养基中用ＩＰＴＧ诱导表达硒代甲硫氨酸抗烟毒素蛋白衍生物．通过 Ｎｉ－ＮＴＡ金属亲合层析和 Ｍｏｎｏ Ｑ阴离子交换层析纯化目标蛋白．产物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检验纯度达９５％以上，经 ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ和 ＥＳＩ－Ｑｕａｄｒｕｐｏｌｅ质谱检测证实抗烟毒素蛋白硒代甲硫氨酸标记成功．采用与抗烟毒素蛋白晶体生长类似的条件，获得了衍生物可供衍射的晶体．
何红珍邵煜陈宇航刘斌斌曹振波江凡刘一苇唐洪刘进元赵南明饶子和
关键词：纯化质谱
P450cam突变体蛋白表达、纯化与结晶的改进及其四突变体(F87L/Y96F/L244A/V247A)晶体结构被引量：2
2004年
在P4 5 0cam突变体蛋白纯化过程中使用 2 80nm/ 392nm双波长比值检测蛋白质纯度 ,采用 β 巯基乙醇对蛋白质进行还原性保护 ,有效地缩短了纯化进程 ,纯化效率相应提高 .以PEG 80 0 0为沉淀剂经悬滴汽相扩散法筛选得到适合衍射的P4 5 0cam四突变体 (F87L/Y96F/L2 4 4A/V2 4 7A)晶体 ,在Mar Research面探测器系统上收集了0 2 2nm分辨率的X射线衍射数据 .采用同晶差值傅立叶法解析结构 ,最后的晶体学R因子和Rfree分别为 0 197和 0 2 4 7,键长偏差为 0 0 0 177nm ,键角偏差为 1 96°.结构测定显示P4 5 0cam四突变体 (F87L/Y96F/L2 4 4A/V2 4 7A)和P4 5 0cam野生型的整体构象无重大变化 ,突变后活性口袋变大而疏水性增加 ,这与突变设计预期目标一致 .
刘斌斌孙蕾徐峰娄智勇庞海L.L.WONG刘一苇
关键词：纯化晶体结构
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