刘怀然
- 作品数：7 被引量：12H指数：2
- 供职机构：郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肝细胞肝癌中DNMT3b、STAT3的表达及其相关性被引量：4
- 2008年
- 目的探讨DNA甲基转移酶3b(DNMT3b)、信号转导子与转录激活子3(STAT3)在肝细胞肝癌(HCC)中的表达及其意义。方法用免疫组化SP法检测48例HCC组织,25例癌旁组织和15例正常肝组织中DNMT3b蛋白和STAT3蛋白的表达,并分析其相关性。结果DNMT3b在HCC组织中的阳性表达率为81.3%,明显高于正常肝组织(6.7%)以及癌旁组织(44.0%)(P<0.05)。STAT3在HCC组织中的阳性表达率为72.9%,显著高于癌旁组织(48.0%)和正常肝组织(20.0%)(P<0.05)。在HCC中,DNMT3b和STAT3的表达呈正相关(P<0.05)。结论DNMT3b及STAT3的高表达与HCC的发生发展有关,DNMT3b可能作为转录调控因子与STAT3起协同作用。
- 范正军刘怀然
- 关键词：肝细胞肝癌DNA甲基转移酶3B
- 凝血酶敏感蛋白-1对胆囊癌细胞凋亡的实验研究
- 2008年
- 目的研究凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)对胆囊癌细胞GBC-SD凋亡的体外诱导作用及其可能的作用机制。方法采用流式细胞术检测TSP-1及其受体CD36,CD47作用后HCCLM3的凋亡率,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)Caspase-3 mRNA表达的变化。结果TSP-1组凋亡率(10.56±0.63)%显著高于对照组(3.17±0.33)%和CD47阻断组(4.05±0.27)%(P<0.01)。CD36阻断组(8.49±0.37)%高于对照组或CD47阻断组,低于TSP-1组,差异有统计学意义(P<0.01)。TSP-1组Caspase3 mRNA的表达TSP-1组(0.575±0.026)和CD36阻断组(0.583±0.023)显著高于对照组(0.336±0.031)和CD47阻断组(0.412±0.017),差异有统计学意义(P<0.01)。结论TSP-1在体外可诱导胆囊癌细胞GBC-SD的凋亡,TSP-1与受体CD47结合后上调Caspase3的表达可能是作用途径之一。
- 薛建锋范正军赵守魁王艳瑛郭广成刘怀然
- 关键词：胆囊癌GBC-SD凝血酶敏感蛋白-1凋亡CASPASE3
- 凝血酶敏感蛋白-1对胆囊癌细胞生长增殖的作用
- 2008年
- 目的探讨研究凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)对胆囊癌细胞株GBC-SD生长增殖的作用及其作用途径。方法根据处理因素将胆囊癌细胞分为:空白对照组,TSP-1组,CD36单抗阻断组、CD47单抗阻断组。用四唑盐比色法(MTT)和流式细胞术检测TSP-1及受体CD36、CD47对胆囊癌细胞生长、细胞周期的影响。结果TSP-1组、CD36阻断组、CD47阻断组细胞生长明显低于对照组(抑制率分别为:23.63%,9.57%,18.13%)。CD36阻断组的抑制率小于CD47阻断组。TSP-1组G0/G1期细胞数增加,S期和G2/M期细胞数减少,与对照组和CD36阻断组相比有显著性差异。增殖指数分别为:对照组(39.55±2.12)、TSP-1组(26.21±0.61)、CD36阻断组(36.43±1.28)、CD47阻断组(30.73±0.38);各组之间两两比较均有差异。结论TSP-1可对抑制胆囊癌细胞的生长,通过与受体CD36的结合阻滞胆囊癌细胞停止于G0/G1期可能是主要的作用途径。
- 薛建锋范正军赵守魁王艳瑛郭广成刘怀然
- 关键词：胆囊癌凝血酶敏感蛋白-1
- DNA甲基转移酶3b对肝癌细胞系中细胞周期素D1基因的表达和启动子甲基化的影响被引量：1
- 2009年
- 目的探讨DNA甲基转移酶3b（DNMT3b）在人肝癌细胞系（SMMC7721）中对细胞周期素D1（cylin D1）表达及其启动子甲基化水平的影响，并进一步探讨DNMT3b的作用。方法用小分子干扰RNA（siRNA）技术抑制DNMT3b在SMMC7721细胞系中的表达（实验组），另设转染对照siRNA的对照组，及未加任何处理因素的正常组。用蛋白质印迹检测转染前后DNMT3b及cylinD1蛋白的表达。用噻唑盐（MTF）法检测其生长增殖的变化，并应用甲基化特异性PCR（MSP）技术分别检测实验、对照两组细胞中cylinD1基因启动子区的甲基化状况。结果DNMT3b siRNA转染组SMMC7721的生存率（53．7％）与对照组、正常组相比明显降低（P=0．01）。蛋白质印迹结果显示DNMT3b表达水平明显低于对照组和正常组，cylin D1蛋白的表达也低于对照组和正常组。两组中cylin D1启动子区甲基化状态无差异，均未发生甲基化。结论DNMT3b可以调节cyclin D1的表达，而不改变基因的甲基化状态，可能发挥了转录调控因子的作用。
- 王佳辰王家祥刘怀然张勇敢
- 关键词：DNA甲基转移酶3B细胞周期蛋白D1小分子干扰甲基化
- DNMT3b对肝癌细胞株中DLC-1的表达及启动子区甲基化状况的影响
- 2008年
- 目的探讨DNA甲基化转移酶3b（DNMT3b）对人肝癌细胞株SMMC-7721中DLC-1基因的表达及其启动子区甲基化状况的影响。方法将sMMC-7721细胞株分为两组，试验组应用siRNA技术沉默DNMTab的表达，对照组仅转染对照siRNA；应用Western Blot技术分别检测两组细胞中DNMT3b和DLC-1的表达，并应用甲基化特异性PCR（MSP）技术分别检测两组细胞中DLC-1基因启动子区的甲基化状况。结果试验组中DNMT3b的表达明显低于对照组，而DLC-1的表达明显高于对照组；两组中DLC1启动子区甲基化状态无差异，均发生甲基化。结论siRNA技术抑制DNMT3b的表达可使DLC-1基因表达水平增高，但DLC-1启动子区甲基化状态无变化。此过程中DNMT3b并非作为甲基转移酶，而可能是作为转录调控因子影响DLC-1的表达。
- 王家祥刘怀然范正军
- 关键词：肝细胞甲基化DNMT3BDLC-1
- 肝细胞癌中FHIT、Survivin和Caspase-3的表达及意义被引量：6
- 2008年
- 目的:研究脆性组氨酸三联体蛋白(FHIT)、Survivin和Caspase-3在肝细胞癌(HCC)中的表达及其意义。方法:通过免疫组化S-P法检测75例HCC及相应癌旁组织中FHIT、Survivin和Caspase-3的表达,分析其内在联系及与HCC临床病理特征的关系。结果:FHIT在HCC和癌旁组织中的表达阳性率分别为38.7%和69.3%,Survivin为86.7%和8%,Caspase-3为29.3%和84%,差别均有统计学意义(P<0.05)。FHIT蛋白的丢失与肿瘤的分化程度相关(P<0.05),与肿瘤大小、有无包膜、是否有门静脉癌栓、甲胎蛋白和HBsAg是否阳性无明显相关性。Survivin表达阳性率与肿瘤大小有关(P<0.05),与其他临床病理特征无关。Caspase-3蛋白的表达强度与HCC的分化程度和大小呈负相关(P<0.01)。在HCC中,FHIT与Survivin、Caspase-3与Survivin的表达呈负相关,FHIT与Caspase-3的表达呈正相关(P<0.05)。结论:FHIT和Caspase-3的表达缺失或下调与Survivin的过表达可能通过凋亡抑制共同参与了肝细胞肝癌的发生和发展。
- 范正军赵守魁刘怀然
- 关键词：肝细胞
- 凝血酶敏感蛋白-1诱导肝癌裸鼠模型凋亡作用被引量：1
- 2008年
- 目的研究TSP-1在人肝癌裸鼠种植瘤模型诱导凋亡的作用及作用机制。方法建立人肝癌细胞株HCCLM3裸鼠模型,治疗组和对照组(n=6)分别皮下注射TSP-1和生理盐水;治疗三周收集标本,采用Tunnel方法检测细胞凋亡水平,免疫组织化学方法检测Caspase-3蛋白的表达。结果TSP-1治疗组肝癌细胞凋亡指数显著高于对照组(9.36±1.49VS2.64±0.57,P<0.01)。TSP-1组Caspase3蛋白(0.0581±0.0185VS0.0908+0.0210,P<0.05)的表达显著高于对照组。结论TSP-1在人肝癌裸鼠模型中可诱导肝癌细胞凋亡,上调Caspase3的表达可能是TSP-1诱导细胞凋亡的作用途径之一。
- 薛建锋范正军赵守魁王艳瑛郭广成刘怀然
- 关键词：裸鼠凝血酶敏感蛋白-1凋亡CASPASE3
