刘涛
- 作品数：26 被引量：47H指数：4
- 供职机构：杭州市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：杭州市科技发展计划项目杭州市卫生科技计划项目浙江省医药卫生科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 单纯疱疹病毒Ⅱ型G蛋白免疫优势肽段在杆状病毒表达系统的表达及其反应原性
- 2013年
- 目的利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统对单纯疱疹病毒II型(HSV-2)糖蛋白G(gG-2)免疫优势片段gG321-580进行表达,纯化并评价其反应原性,以探索HSV-2免疫诊断试剂的研制。方法提取HSV-2DNA作为模板,PCR扩增gG321-580基因,克隆至pFastBac HTC载体中,通过Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达His-gG321-580融合蛋白,SDS-PAGE和Western-blotting鉴定表达产物,NTA-Ni 2+纯化后间接ELISA评价其反应原性。结果 HSV-2gG321-580在昆虫细胞Sf9中得到特异性表达,纯化后的重组gG321-580蛋白对HSV-2阳性血清抗体有较好的抗原性和特异性。结论 gG321-580蛋白在Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中成功表达,表达产物表现出良好的反应原性,为发展HSV-2免疫诊断试剂奠定了基础。
- 刘涛刘继峰斯国静俞骅胡俊李钧
- 单纯疱疹病毒Ⅱ型gD糖蛋白在杆状病毒昆虫表达体系中的表达及其免疫效应研究
- 刘涛黄志成刘继峰祝水芬郑伟
- 该项目为杭州市科技局重点专病专科项目(资助课题编号：20080333Q29)。单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)是引起人类生殖器疱疹(genitalherpes，GH)的主要病因，GH90%的病原体为HSV-2。GH近年来发...
- 关键词：
- 关键词：杆状病毒免疫效应
- 食品中阪崎肠杆菌多重PCR检测方法的建立被引量：7
- 2014年
- 目的建立并优化食品中阪崎肠杆菌检测的多重PCR方法。方法以阪崎肠杆菌ITS序列,16s rDNA和ompA基因为靶基因,选择3对引物,建立并优化多重PCR反应体系;验证其特异性、灵敏度和抗干扰能力;并在实际样品中进行阪崎肠杆菌的检测,检测结果与现行国家标准方法进行比较。结果该多重PCR反应体系具有良好的特异性、灵敏度和较强的抗干扰能力。人工污染奶粉样品的模拟实验表明,增菌后该多重PCR反应体系可以检出1 CFU/100 g奶粉的阪崎肠杆菌。108份不同种类的实际样品中共检出阪崎肠杆菌10份,检出率为9.26%,检测结果与采用现行国家标准方法测定具有良好的一致性。结论本研究所建立的多重PCR方法特异好、灵敏较高、结果准确,可用于食品中阪崎肠杆菌的日常检测。
- 楼秀芹斯国静戚建江刘涛俞骅
- 关键词：阪崎肠杆菌多重PCR食源性致病菌
- 单核细胞增生李斯特菌在市售食品中污染现状分析
- 目的了解杭州市市场销售的部分食品受单增李斯特污染状况。方法于2007年5月至2009年11月,采集杭州市4家超市及5家农贸市场数类食品样品共计244件,其中生畜、生禽肉类样品143件,即食食品101件,按GB/T4789...
- 斯国静俞骅刘涛胡俊
- 关键词：冷藏食品单增李斯特菌污染状况
- 文献传递
- 降落PCR扩增单纯疱疹病毒Ⅱ型G蛋白基因的研究
- 2008年
- 目的建立一种快速,准确检测单纯疱疹病毒Ⅱ型G蛋白基因的方法。方法根据已发表的gG蛋白核苷酸序列设计引物,采取降落PCR对gG蛋白基因进行扩增。结果从2份病毒株中均扩增出与预期大小完全一致的目的片段,并且能有效地降低或避免非特异性扩增。结论TD-PCR能够用于快速,准确地检测gG蛋白基因,为生殖器疱疹的鉴别诊断在分子水平上提供了理想的新方法。
- 刘涛黄志成祝水芬
- 大黄素对金黄色葡萄球菌生物膜抑制作用的体外研究被引量：4
- 2020年
- 目的研究大黄素对金黄色葡萄球菌生物膜早期形成及后期成熟的影响。方法以ATCC6538及编号为16-22的金黄色葡萄球菌为受试菌株,用琼脂稀释法测定大黄素的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC);构建体外生物膜模型,用银染法观察载体表面的生物膜形态,结晶紫染色法和连续稀释法进行膜内活菌计数。结果大黄素对ATCC6538和16-22的MIC分别为32、16μg/ml。形态学观察发现≥4μg/ml的大黄素能有效减少金黄色葡萄球菌的黏附和破坏已成熟的生物膜。结晶紫染色法和连续稀释法的结果表明当大黄素的浓度达到8μg/ml后,75%的ATCC6538和70%的16-22金黄色葡萄球菌生物膜生成被抑制;56%的已成熟生物膜被破坏。结论大黄素在体外可以有效抑制金黄色葡萄球菌生物膜的形成并破坏成熟的生物膜。
- 陈琦楼秀芹刘涛张蔚
- 关键词：金黄色葡萄球菌生物膜大黄素
- 免疫磁珠-环介导等温扩增联用技术快速检测副溶血性弧菌方法的建立被引量：4
- 2017年
- 目的建立一种快速且质优价廉的检测副溶血性弧菌的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法。方法制备副溶血性弧菌跨膜转录调控蛋白toxR多克隆抗体,鉴定纯化后,进行磁珠包被制成免疫磁珠。利用免疫磁珠分离法和环介导等温扩增联用完成对副溶血性弧菌的检测,扩增产物经SYBR Green I染色肉眼观察和电泳鉴定。将副溶血性弧菌菌液作一系列稀释后,运用LAMP法进行敏感性检测,利用副溶血性弧菌和非副溶血性弧菌来验证LAMP方法的特异性。结果LAMP检测副溶血性弧菌的检测下限为10~5 CFU/ml。副溶血性弧菌出现LAMP特征性扩增反应,非副溶血性弧菌未出现LAMP扩增。结论 LAMP检测方法为快速诊断试剂盒打下实验基础,适合日常监测,可满足快速检测的需要。
- 刘涛俞骅张蔚楼秀芹斯国静
- 关键词：副溶血性弧菌环介导等温扩增免疫磁珠
- 2型单纯疱疹病毒糖蛋白G基因片段的表达及其抗原性分析被引量：1
- 2013年
- 目的获得单纯疱疹病毒2型(HSV-2)糖蛋白G(gG2)免疫优势片段gG321-580并初步研究其抗原性。方法 PCR扩增gG321-580基因,利用Bac-to-Bac表达系统表达gG321-580His融合蛋白,Western blot和间接ELISA鉴定蛋白活性。结果在Sf9细胞中成功表达HSV-2 gG321-580His蛋白,gG321-580His能与小鼠抗HSV-2 gG2单抗结合,在60 KDa附近出现特异性结合条带,ELISA分析初步证实gG321-580His能够与HSV-2阳性血清反应,而不与HSV-1阳性血清和正常人血清反应。结论 gG321-580His蛋白获得成功表达,ELISA检测显示其具有良好的抗原性,为研究以gG321-580蛋白作为靶区域的HSV-2型特异性诊断试剂盒打下实验基础。
- 刘涛刘继峰斯国静俞骅胡俊李钧
- 关键词：单纯疱疹病毒2型酶联免疫吸附
- 食品中阪崎肠杆菌多重PCR检测方法的建立和改良
- 楼秀芹斯国静戚建江刘涛胡俊俞骅
- “食品中阪崎肠杆菌多重PCR检测方法的建立和改良”系杭州市科技局“社会发展科研专项项目”（20110533B19），项目执行日期2011年7月至2014年5月。该项目以阪崎肠杆菌ITS序列，16s，rDNA和ompA基因...
- 关键词：
- 关键词：食品检测阪崎肠杆菌
- 杭州地区相同分子型别的单核细胞增生李斯特菌临床和食品分离株基因组分析被引量：2
- 2019年
- 目的 研究杭州地区分子型别相同的临床和食品来源单核细胞增生李斯特菌在基因组水平的分子差异及进化关系。方法 利用高通量基因组测序和生物信息学分析方法对脉冲场凝胶电泳(Pulse-field gel electrophoresis,PFGE)型别一致的1株临床来源和6株食品来源的ST8型菌株进行基因组共线性、ncRNAs分布和毒力基因携带分析。联合NCBI Assembly数据库中ST8型菌株基因组,构建基于全基因组SNPs位点的进化树,进行溯源分析。结果 杭州地区临床和食品来源的菌株基因组共线性一致。菌株在毒力基因 lmo 0036和 lmo 2396的序列和 rli48, rli62和rliG 分子,质粒pLmA144的分布存在差异。基因组SNPs进化树显示ST8型菌株呈现高度同源。食品分离株中12-004与临床株12-103的进化上最接近,只有16个SNPs差异。结论 杭州市场近年肉类食品中存在遗传进化高度相似的一群ST8型单核细胞增生李斯特菌。杭州单核细胞增生李斯特菌临床分离株感染可能来自这群菌株。
- 俞骅董华丽汪皓秋楼秀芹刘涛张蔚王旭初潘劲草
- 关键词：单核细胞增生李斯特菌毒力基因非编码RNA
