叶志红
- 作品数:3 被引量:7H指数:2
- 供职机构:厦门出入境检验检疫局检验检疫技术中心更多>>
- 发文基金:福建省自然科学基金厦门市科技计划项目国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 线虫传多面体病毒属研究进展被引量:1
- 2010年
- 线虫传多面体病毒属病毒在全世界温带地区均有分布,具有广泛的寄主范围,其中许多种病毒能够在农业生产中引起严重危害。从传播途径、病毒种类、分类依据、基因组结构与功能等方面对线虫传多面体病毒属进行概述。
- 叶志红林毅
- 关键词:基因组
- 同时检测豇豆花叶病毒属与蚕豆病毒属病毒的通用RT-PCR检测方法被引量:3
- 2015年
- 【目的】建立一个可同时检测豇豆花叶病毒属(Comovirus)和蚕豆病毒属(Fabavirus)病毒的通用RT-PCR检测方法。【方法】通过基因组序列的多重比对分析,在其保守区域设计简并引物,用于这2个病毒属病毒的通用RT-PCR检测,并进行灵敏性、特异性试验。为便于PCR产物直接测序,在简并引物中引入通用测序引物(RV-M和M13-47),并通过序列分析对病毒种类鉴定。利用该方法对来自福建柘荣的太子参病毒进行检测验证。【结果】设计一对简并引物,建立了一个用于扩增豇豆花叶病毒属和蚕豆病毒属病毒部分依赖于RNA的RNA聚合酶(Rd Rp)基因的通用RT-PCR方法。该方法成功用于检测安第斯马铃薯斑驳病毒(Ap Mo V)、蚕豆染色病毒(BBSV)、蚕豆真花叶病毒(BBTMV)、菜豆荚斑驳病毒(BPMV)、豇豆花叶病毒(CPMV)、豇豆重花叶病毒(CPSMV)、南瓜花叶病毒(Sq MV)、红三叶草斑驳病毒(RCMV)和萝卜花叶病毒(Ra MV)9种豇豆花叶病毒属病毒;蚕豆萎蔫病毒1号(BBWV1)、蚕豆萎蔫病毒2号(BBWV2)2种蚕豆病毒属病毒共计17个分离物,而不能与同亚科的线虫传多面体病毒属病毒及健康寄主植物反应,显示出良好的广谱性和特异性。在简并引物的5′端分别加入一段非互补的通用测序引物序列(RV-M和M13-47),不仅可以利用该通用测序引物进行PCR产物直接测序,而且检测灵敏度可以提高10—100倍。序列及系统发育分析表明,所扩增的序列可以把豇豆花叶病毒属和蚕豆病毒属病毒区分到种的水平。利用该方法测定了BBSV的部分Rd Rp基因序列,显示出与RCMV具有最近的亲缘关系。利用该方法在太子参中检出BBWV2。【结论】建立的通用RT-PCR方法可用于豇豆花叶病毒属和蚕豆病毒属病毒的广谱性检测,结合序列可进行病毒种类的快速鉴定,并且可能用于新病毒种类的检测鉴定。
- 叶志红廖富荣郭木金方志鹏陈青陈红运林石明林毅
- 关键词:RT-PCR
- 应用RT-PCR和IC-RT-PCR方法检测南瓜花叶病毒被引量:3
- 2013年
- 南瓜花叶病毒(Squash mosaic virus,SqMV)是葫芦科作物上一种重要的种传病毒。本研究根据其外壳蛋白(CP)基因设计一对特异引物,建立了SqMV的RT-PCR和IC-RT-PCR检测方法。特异性检测结果表明,所建立的方法可将SqMV与同一个病毒属的其他病毒及健康寄主植物准确区分开来,具有良好的特异性。在此基础上,建立了SqMV的IC-RT-PCR检测方法,其灵敏度则比DAS-ELISA方法提高10倍以上。所建立的方法具有良好的特异性和灵敏度,适用于进出境植物繁殖材料的快速检测。
- 廖富荣叶志红陈青吴媛陈红运林石明
- 关键词:南瓜花叶病毒RT-PCRIC-RT-PCR