叶榕
- 作品数：50 被引量：139H指数：6
- 供职机构：杭州市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金杭州市医药卫生科技计划项目教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程农业科学更多>>
- 短乳杆菌gyrB基因的扩增与测序被引量：5
- 2007年
- 目的:为检测短乳杆菌gyrB基因序列。方法:设计两对简并引物对3种啤酒污染乳酸杆菌进行PCR扩增,获得短乳杆菌部分目的基因片断。并将该片断克隆至pGEM-T Easy载体,经限制性内切酶分析和测序获得短乳杆菌gyrB基因部分序列。结果:通过对序列进行进化树分析,发现该序列与啤酒典型污染菌植物乳酸杆菌gyrB序列相似性较高。结论:短乳杆菌gyrB序列对于建立啤酒中短乳杆菌快速检测具有十分重要的意义。
- 赵敏潘劲草李学梅叶榕俞骅孙培龙
- 关键词：啤酒短乳杆菌测序
- PCR法快速鉴定啤酒中分离的乳酸杆菌被引量：8
- 2006年
- 目的:建立一种灵敏、快速的PCR法检测啤酒中的乳酸杆菌。方法:设计一对属特异性引物扩增乳酸杆菌的16Sr DNA基因,对7株乳酸杆菌进行检测,扩增片断长度为223 bp,金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、李斯特菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、铜绿假单孢菌5种菌作为阴性对照菌。结果:该引物能扩增7株乳酸杆菌,结果为阳性;阴性对照菌结果为阴性。结论:该方法快速、灵敏、特异,为啤酒中乳酸杆菌的快速检测提供了有效的途径。
- 赵敏潘劲草于新芬叶榕孙培龙叶青
- 关键词：PCR啤酒乳酸杆菌
- 某些同源重组修复基因多态性与慢性苯中毒风险性关系研究被引量：3
- 2004年
- 目的 探讨X线修复交叉互补基因 2 (XRCC2 )、X线修复交叉互补基因 3 (XRCC3 )的基因多态性与慢性苯中毒发病风险的关系。方法 采用病例对照设计 ,以 15 2名苯中毒工人为病例组 ,15 2名接触苯而没有中毒表现的工人为对照组。应用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性分析技术 (PCR RFLP)检测XRCC2c .188和XRCC3c .2 41位点的多态性。结果 未检测到XRCC2c .188的突变基因型 ,XRCC3c .2 41基因各基因型在病例组和对照组间的分布差异无显著性。结论 XRCC2c .188和XRCC3c .2 41位点的多态性与慢性苯中毒的发病风险没有关系 。
- 张忠彬管继如叶榕顾寿永万俊香金锡鹏夏昭林
- 关键词：苯中毒基因多态性
- 用逆转录聚合酶链反应方法检测SARS冠状病毒被引量：1
- 2005年
- 目的 应用双位点逆转录聚合酶链反应 (RT-PCR)和改良巢式实时RT PCR方法检测临床标本中SARS冠状病毒(SARS CoV)核酸,以提高检测的可靠性和灵敏度。方法 对 2003年杭州市 3例严重急性呼吸综合征(SARS)临床确诊患者、4例疑似和 27名医学观察者的咽拭子标本用巢式实时RT-PCR检测SARS- CoV核酸,对阳性扩增产物进行核酸序列测定,同时对 3例患者的标本应用半巢式RT -PCR检测另一位点SARS- CoV核酸片段,并应用常规实时RT- PCR技术及改良实时RT -PCR技术进行检测。结果 3例患者的巢式RT -PCR检测结果 2例阳性, 4例疑似和 27名医学观察者均为阴性;阳性扩增产物的核酸序列与SARS- CoV基因组相应部分序列完全一致。3例患者标本的另一位点的半巢式RT -PCR及实时RT PCR结果均相同。在检测低拷贝数标本时,常规实时RT- PCR技术在约 35个循环后出现弱阳性信号,但改良的巢式实时RT -PCR技术可使强阳性信号在 10个扩增循环后出现。结论 双位点RT- PCR方法是提高检测准确性的有效方法,改良巢式实时RT- PCR技术较常规实时RT- PCR技术具有更高的灵敏度。
- 叶榕潘劲草黄志成王衡汪皓秋韦东芳许珂闻洪根陈康凯
- 关键词：RT-PCR技术SAILS巢式RT-PCR
- 苯作业工人淋巴细胞p53相关基因mRNA表达水平分析被引量：5
- 2008年
- 目的了解苯环境作业工人外周血淋巴细胞中，经p53介导的DNA损伤修复路径相关基因表达水平。方法选择某喷涂厂直接接苯工人46人（直接接苯组）、间接接苯工人26人（间接接苯组）和无苯及其他毒物接触工人29人（对照组），应用SYBR GreenⅠ嵌合荧光法实时RT-PCR分析技术，检测外周血淋巴细胞p53及相关基因mRNA表达水平，比较对照组与作业组间P53及相关基因mRNA表达倍数差异。结果直接接苯组和间接接苯组p53、Ku80、Ape1和Mdm-2 mRNA表达水平与对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；p21有增高趋势，但差异无统计学意义（P〉0．05）。直接接苯组的Rad51、Bcl-2、Bax、Xpa和XpcmRNA表达水平下调、间接接苯组Rad51 mRNA表达下调，与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。直接接苯组的白细胞、血红蛋白和血小板分别为（4．93±1．27）×10^9／L、（123．97±11．80）g／L和（124．02±41．22）×10^9／L，间接接苯组血小板为（135．80±39．44）×10^9／L，均低于对照组，差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论长期慢性的低浓度苯接触可使工人淋巴细胞中p53介导的部分DNA损伤修复相关基因mRNA表达水平发生改变，直接接苯工人的外周血白细胞、血红蛋白、血小板减低以及Bcl-2、Bax、Xpa和XpcmRNA表达水平改变明显。
- 叶榕潘劲草曹坚忠管继如谢晓敏虞爱旭吴龙何月龙夏昭林
- 关键词：基因P53苯
- 多重实时PCR检测致泻性大肠埃希菌志贺毒素和紧密素基因被引量：6
- 2007年
- 目的 建立多重实时PCR检测志贺毒素（stx1、stx2）基因和紧密素基因（eae）的方法。方法 优化多重实时PCR反应条件，检测系列稀释的阳性菌DNA提取物及纯化阳性质粒。检测42株携带已知毒力基因的大肠埃希菌株，并比较其阳性和阴性符合率。对比3种粪便样品处理和DNA提取方法，选出最适方法。同时用该方法对36份腹泻患者粪便标本进行直接检测且对阳性标本进行菌株分离和鉴定。结果 多重实时PCR方法最低可以检测到10^1拷贝／pJ的毒力基因和10。CFU／p．1的DEL933大肠埃希菌。检测42株携带已知毒力基因的大肠埃希菌的阳性和阴性符合率均为100％。粪便样品的DNA提取以BP肉汤增菌6h后煮沸提取效果最好。36份腹泻患者粪便中2份eae阳性，均鉴定为大肠埃希菌。结论 建立的同时检测stx1、stx2、eae基因的多重实时PCR方法，具有较高的敏感性，可用于产志贺毒素大肠埃希菌（STEC）和肠致病性大肠埃希菌（EPEC）毒力基因鉴定及临床腹泻粪便标本的快速筛检。
- 于新芬潘劲草孟冬梅叶榕汪皓秋张蔚谢立
- 关键词：聚合酶链反应毒力大肠杆菌
- 细菌性食物中毒病原的分子快速鉴定和筛检技术的研究
- 潘劲草于新芬孟冬梅张蔚汪皓秋叶榕斯国静
- 本研究建立的实时荧光PCR可检测门菌、志贺菌、产志贺毒素大肠埃希菌、肠产毒素性大肠埃希菌、肠侵袭性大肠埃希菌、肠致病性大肠埃希菌、霍乱弧菌、副溶血性弧菌、肠炎耶尔森菌、空肠弯曲菌、单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽抱杆...
- 关键词：
- 关键词：细菌性食物中毒病原
- 初探毒物代谢酶基因多态性和慢性苯中毒预后的关系被引量：2
- 2002年
- [目的 ]探讨慢性苯中毒工人在脱离苯作业后白细胞水平仍然低下的影响因素。 [方法 ]对 12 0例曾经苯中毒者 ,按外周血白细胞计数 ,分为 <4× 10 9/L和≥ 4× 10 9/L两组 ,比较两组之诊断年龄、接苯工龄、体质指数 (BMI)均数和CYP2E1、MPO、NQO1、GSTM1和GSTT1各基因型的构成比 ,并用Logistic回归构建苯中毒预后的风险模型。 [结果 ]白细胞 <4× 10 9/L的苯中毒工人的BMI低于白细胞≥ 4× 10 9/L的苯中毒工人的BMI(2 1 40± 2 76与 2 3 0 9± 3 3 6,P =0 0 1)。回归模型表明GSTT1缺失型的个体接触苯时 ,苯中毒的危险性是GSTT1阳性型的 4 45倍 (95 %CI :1 13 13～ 17 5 45 9)。[结论 ]提示苯作业工龄。
- 万俊香管继如叶榕曹多志朱雪梅刘剑金锡鹏夏昭林
- 关键词：慢性苯中毒预后基因多态性
- 临床来源nct-CTXΦ样霍乱弧菌基因的多样性分析被引量：3
- 2007年
- 目的 了解临床来源霍乱弧菌nct-CTXΦ（不含霍乱毒素基因的CTXΦ）样基因特征。方法 对6株于2000-2004年自杭州散发腹泻患者分离的ctxA^-、tcpA^＋ 01群霍乱弧菌核糖体基因分型，PCR检测zot、noe、cep基因及串联CTXΦ基因组拷贝问的相邻片段；以zot、ace、cep基因探针South-ernblot分别检测nct-CTXΦ样基因的PstⅠ、HindⅢ、MluⅠ、BglⅡ酶切及HindⅢ、MluⅠ双酶切的限制性酶切长度多态性，结合拷贝间相邻片段HindⅢ酶切位点分析，构建nct-CTXΦ样基因组物理图谱。结果 6株01群霍乱弧菌中，核糖体基因分型为2种型别；1株无CTXΦ或nct-CTXΦ样基因组，5株存在nct-CTXΦ样基因组，且此5株菌株中存在3种类型nct-CTXΦ样基因组组成，分别为单拷贝长约6kb串联双拷贝、单拷贝长约5．8kb的串联双拷贝和串联4拷贝（2个单拷贝长约6kb，另2个单拷贝长约5．8kb）。结论 nct-CTXΦ霍乱弧菌可能具有引起腹泻的能力；临床和环境来源的霍乱弧菌中存在着一类多样性的nct-CTXΦ样噬菌体家族。
- 濮小英潘劲草孟冬梅叶榕黄志成
- 关键词：霍乱弧菌霍乱毒素
- 杭州市肠道病毒71型的分离与VP1区域序列分析被引量：6
- 2011年
- 目的了解杭州市2008年和2011年肠道病毒71型(EV71)流行株VP1基因特征。方法手足口病患者咽拭子、粪便等样本先通过荧光RT-PCR方法初筛,然后选部分肠道病毒71型阳性样本进行病毒分离、培养;通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定上述培养物,并扩增VP1区全长基因和序列测定,利用生物信息学软件对序列进行分析,构建基因进化树。结果从2008年和2011年手足口样本中分离到EV71阳性毒株各4株,VP1基因全序列测定结果显示其与C4亚型代表株核苷酸和氨基酸的相似性最高,分别为93.8%～95.2%、99.0%～99.7%。结论杭州市手足口病患者感染EV71病毒的流行株属C基因型的C4亚型。
- 邱晓枫祝水芬濮小英叶榕张国忠李钧缪凡黄志成
- 关键词：手足口病肠道病毒71型VP1基因基因型
