吴秀娟 作品数:10 被引量:26 H指数:3 供职机构: 温州医学院附属第一医院 更多>> 发文基金: 温州市科技计划项目 浙江省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
维持性血液透析患者的血管钙化情况及因素分析 徐利鸳 刘毅 吴秀娟 郑尘非硫代硫酸钠治疗血透患者糖尿病足的疗效观察 马璐璐 孙文学 吴秀娟 徐玉兰维持性血液透析患者的血管钙化情况及危险因素分析 被引量:7 2012年 目的了解维持性血液透析患者的血管钙化情况,探讨其危险因素。方法收集90例维持性血液透析患者的临床资料,拍摄骨盆、双手X线片,计算血管钙化评分,测量血压水平,检测钙、磷等血生化指标和全段甲状旁腺素(iPTH)水平,多元Logistic回归分析血管钙化的危险因素。结果 90例维持性血液透析患者中60例(66.7%)存在不同程度的血管钙化,38例(42.2%)存在中重度钙化。60岁以上、男性、糖尿病、最长透析间期24h尿量<200ml患者发生中重度钙化的危险分别是<60岁、女性、非糖尿病、24h尿量≥200ml患者的2.80、2.62、4.68、3.00倍。中重度钙化患者的每日服用钙剂剂量、校正血钙、钙磷乘积水平较高,P<0.05。以血管钙化评分为因变量,多元Logistic回归分析结果显示,高水平的钙磷乘积、碱性磷酸酶与血管钙化的发生呈正相关,透析频率与血管钙化呈负相关。结论维持性血液透析患者普遍存在血管钙化,老龄、男性、糖尿病、残余肾功能丧失、钙磷乘积、碱性磷酸酶、透析频率低是血管钙化的相对危险因素。 徐利鸳 刘毅 吴秀娟 郑尘非关键词:血液透析 血管钙化 筛选大鼠血管钙化消退差异表达基因及初步分析 被引量:3 2011年 目的:探讨大鼠在血管钙化消退过程中基因表达的变化。方法:选取6周龄SPF级雄性SD大鼠24只,随机分成3组(n=8),分别为对照组、钙化组和消退组。钙化组和消退组制作血管钙化模型(vitamin D3 plus nico-tine,VDN),对照组生理盐水和花生油灌胃。钙化组和对照组于实验第8周处死,消退组继续饲养至16周处死,测定各组大鼠动脉组织钙含量并作病理检查。采用抑制性消减杂交方法将消退组和钙化组大鼠血管cDNA作差减杂交,分离消退组较钙化组高表达或低表达基因的cDNA片段,建立消退组和钙化组的差异表达文库,扩增、鉴定文库并测序阳性克隆,BLAST比对测序序列。随机挑选4个基因进行RT-PCR验证和DNA条带半定量分析。结果:①血管组织钙含量测定显示钙化组((15.34±2.51)mg/g)较对照组((5.20±0.75)mg/g)血管组织钙含量明显升高(P<0.01);消退组((12.73±1.89)mg/g)较钙化组降低(P<0.05);②构建了血管钙化的差减文库,对所获阳性克隆进行测序和BLAST比对分析,获得28个表达上调基因和22个表达下调基因。RT-PCR验证示Prdx3,Ank2,Ror2,Abcc1等基因在消退组和钙化组间差异表达,消退组较钙化组表达增高,平均约为后者的1.7倍。结论:VDN模型诱导的大鼠血管钙化可以发生主动消退。钙化消退过程中焦磷酸合成相关基因、谷氨酸信号相关基因、还原及凋亡调节基因表达上调,同时见较多骨化相关基因及氧化活性等基因表达下调。钙化抑制基因的表达增多而钙化促进基因表达的下降可能是钙化发生主动消退的内源性机制。 吴秀娟 刘毅 孙文学 杜晓红 陈天新 毛瑞阳 徐利鸳关键词:钙质沉着症 基因文库 骨化 抑制性消减杂交 SSH方法筛选血管钙化消退的差异表达基因及初步分析 吴秀娟 刘毅抑制性消减杂交法筛选大鼠血管钙化相关基因的研究 被引量:4 2010年 目的了解大鼠血管钙化过程中血管组织基因表达的改变。方法选取6周龄SPF级雄性SD大鼠24只,随机分成钙化组和对照组(各12只),钙化组大鼠制作血管钙化模型(VDN)。两组大鼠于实验第8周处死后测定动脉组织钙含量并作病理检查。提取两组大鼠主动脉中膜RNA,反转录成eDNA,采用抑制消减杂交法(SSH)分离钙化组较正常组高表达基因的cDNA片段,将差异片段与PMD18-T质粒载体连接起来,热转化法转化感受态菌DH-5α,建立钙化组与对照组之间的差异表达eDNA文库。菌落PCR法鉴定重组载体,测序阳性克隆,BLAST比对分析测序结果。随机对Nell 1等6个基因进行差异表达的RT—PCR验证。结果(1)病理检查示钙化组大鼠主动脉中膜扭曲并见明显钙盐沉积,对照组大鼠主动脉中膜无任何钙盐沉积。(2)血管组织钙测定示钙化组和对照组大鼠分别为(15.34±2.51)mg/g和(5.20±0.75)mg/g,钙化组大鼠血管组织钙含量显著高于对照组(P〈0.01)。(3)采用SSH方法成功构建血管钙化的差减文库,对正反双向差减文库进行菌落PCR鉴定后分别获得92个阳性克隆(正向文库)和18个阳性克隆(反向文库),插入片段的大小主要集中于150~400bp。对所获阳性克隆进行测序和BLAST比对分析,获得钙化相关43个上调基因和11个下调基因。RT—PCR验证示CytoP450、Nell1等5个基因在钙化组和对照组中表达变化较大,钙化组表达高于对照组,约为后者的1.71倍。结论成功构建血管钙化VDN模型。血管钙化过程中相关基因表达发生改变,一些骨化基因以及凋亡、氧化、炎性反应和细胞因子等相关基因表达上调,同时伴有少数可能抑制钙化的基因下调。 吴秀娟 刘毅 孙文学 杜晓红 张媛元 徐利鸳关键词:钙质沉着症 基因文库 骨化 抑制性消减杂交 硫代硫酸钠治疗血透患者糖尿病足的临床体会 被引量:2 2011年 糖尿病足是糖尿病肾病维持性血液透析患者(MHD)危险的并发症,主要表现为下肢疼痛,溃疡,严重影响患者生活质量和社会回归率。国外文献报道[1~4]硫代硫酸钠(STS)治疗钙性尿毒症性小动脉病(CUA)和急性肢体缺血,能减轻患者疼痛,促使溃疡愈合。2008年1月~2010年10月我们将STS应用于血透患者糖尿病足的治疗,取得满意效果。现报告如下。 马璐璐 孙文学 吴秀娟 徐玉兰关键词:硫代硫酸钠 血透患者 糖尿病足 钙性尿毒症性小动脉病 维持性血液透析患者 下肢疼痛 慢性肾脏病维持性血液透析和腹膜透析患者血管钙化情况及钙化影响因素研究 徐利鸳 邵蓉蓉 刘毅 吴秀娟维持性血液透析患者外周血FGF-23水平与血管钙化相关性研究 被引量:12 2012年 目的:了解维持性血液透析患者的外周血成纤维细胞生长因子(FGF-23)水平和血管钙化情况,探讨两者的相关性。方法:收集90例维持性血液透析患者的临床资料,通过X线平片评价血管钙化情况,双抗体夹心ABC-ELISA法测定外周血FGF-23水平,Spearman相关分析血管钙化评分与FGF-23水平的相关性,多元Logistic回归分析血管钙化的危险因素。结果:血管钙化评分≥3分患者的外周血FGF-23水平显著高于钙化评分<3分患者,(98.21±13.55)VS(58.65±6.36)pg/ml,P<0.05。Spearman秩相关显示血FGF-23水平与血管中重度钙化存在相关(r=0.315),并且FGF-23水平越高,血管钙化程度越重(r=0.328),P<0.05。多元Logistic回归分析结果显示,FGF-23浓度是血液透析患者中小动脉钙化的独立危险因素。结论:维持性血液透析患者普遍存在的血管钙化与血浆FGF-23水平相关,FGF-23水平是除老龄、糖尿病、残余肾功能丧失等传统因素之外的血管钙化的相对危险因素。 徐利鸳 刘毅 吴秀娟 郑尘非关键词:血液透析 血管钙化 成纤维细胞生长因子23 硫代硫酸钠治疗血液透析患者糖尿病足的疗效观察 2011年 据报道硫代硫酸钠治疗糖尿病、尿毒症钙性小动脉炎和急性肢体缺血,能减轻患者疼痛,促使溃疡愈合。2008年1月至2010年10月我们用硫代硫酸钠的治疗血透患者糖尿病足,取得满意效果,报告如下。 马璐璐 孙文学 吴秀娟 徐玉兰关键词:血液透析患者 硫代硫酸钠 糖尿病足 疗效观察 肢体缺血 溃疡愈合