吴萌
- 作品数：116 被引量：154H指数：7
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- 相关领域：医药卫生农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 牛血清淀粉样蛋白A时间分辨荧光免疫层析检测试剂盒研制被引量：2
- 2020年
- 本研究旨在研制一种牛血清淀粉样蛋白A(SAA)时间分辨荧光免疫层析定量检测试剂盒,用于牛奶中SAA含量的临床快速检测。采用双抗体夹心法结合荧光免疫层析技术,在结合垫上固定荧光微球标记的抗SAA单克隆抗体及荧光微球标记的鸡IgY的混合物,在硝酸纤维素膜的检测区包被另一株抗SAA单克隆抗体,在硝酸纤维素膜的质控区包被山羊抗鸡IgY。经抗体原料筛选及荧光微球标记抗体的工艺优化后,绘制标准曲线并对试剂盒的空白限、精密度、稳定性及样本测试性能进行初步评估。结果显示,Medix SAA-2单克隆抗体包被与YBX SAA-3单克隆抗体标记为最适抗体配对原料。荧光微球标记抗体的工艺中,荧光微球与抗体的质量投料比为40∶1、偶联剂与荧光微球羧基摩尔比为2∶1的条件为最优组合。试剂盒标准曲线的四参数拟合曲线方程为y=(1.03947-0.00182)/[1+(x/12.08222)×(-0.84692)]+0.00182,线性相关系数R 2=0.9997。研制的牛SAA检测试剂盒空白限为0.052 mg/L。精密度测试结果显示,批内变异系数<15%,批间变异系数<20%。室温稳定性试验表明,试剂盒在室温密封存放6个月的荧光T/C值相对跌幅约15%。自制试剂盒与上海蓝基试剂盒的样本对比测试相关系数R 2为0.97。综上所述,本试验研制的试剂盒具有操作简便、灵敏度高、成本低廉等优点,能满足临床测定需求,可作为一种新型牛SAA检测的快捷、准确的检测手段。
- 吴萌魏治静樊一明崔晨光李双董维亚
- 关键词：乳腺炎
- 盐析与疏水电荷诱导层析相结合快速纯化单克隆抗体被引量：5
- 2006年
- 目的:建立一种简便、快速纯化抗体的疏水电荷诱导层析(HCIC)方法。方法:小鼠腹水先经硫酸铵沉淀处理,然后经HCIC后得到单克隆抗体(mAb),纯化的mAb的活性用间接ELISA法测定。同时比较了不同pH洗脱液对mAb纯度的影响。结果:用pH为4.5的洗脱液进行洗脱,获得的mAb纯度大于90%,总的回收率为65%。结论:盐析与HCIC相结合的抗体纯化法,纯度高、生物活性好,适合在基层实验室推广。
- 程华闫静辉吴萌陈英珠张小兵李春生李亚璞
- 关键词：盐析
- 检测牛或羊骨骼肌肌钙蛋白I的酶联免疫试剂盒及其制备方法与应用
- 本发明涉及一种检测牛或羊骨骼肌肌钙蛋白I的酶联免疫检测试剂盒及其制备方法与应用，属于免疫学技术领域和食品安全分析技术领域。该酶联免疫试剂盒含有包被有捕获抗体的酶标板、辣根过氧化物酶标记的检测抗体、牛或羊骨骼肌肌钙蛋白I标...
- 李春生李玉静刘静静杜顺丰张岩张静吴萌曹秀梅
- 文献传递
- 一种检测呋喃唑酮代谢物的胶体金免疫层析试纸条及其制备方法与应用
- 本发明涉及一种检测呋喃唑酮代谢物的胶体金层析试纸条及其制备方法与应用，属于免疫学技术领域和兽药残留分析技术领域。该试纸条结构包括底板、样品垫、胶体金垫、包被膜和吸水垫，试纸条两端设有保护膜，所述样品垫、胶体金垫、包被膜、...
- 郝少彦李春生刘静静李玉静吴萌杜顺丰武孝利曹秀梅闫玉杰
- 文献传递
- 用于制备抗体芯片的抗人甲胎蛋白单克隆抗体的制备及特性分析
- 2007年
- 目的:制备抗人甲胎蛋白(AFP)单克隆抗体(mAb),并用于制备抗体芯片。方法:利用杂交瘤技术建立能稳定分泌抗人AFP mAb的杂交瘤细胞株;对抗体的亲和力、特异性等特性进行分析;利用抗体相加实验,双抗体夹心ELISA、胶体金免疫层析实验以及抗体芯片技术对抗体表位及其配对情况进行分析研究。结果:共获得16株稳定分泌抗人AFP mAb的杂交瘤细胞株,从中筛选出多组性能优良的配对抗体,结合抗体芯片技术,最终筛选出适合制备抗体芯片的配对抗体。结论:当抗体包被材料或包被方法发生改变时,会引起mAb构象发生变化,从而影响抗体的配对效果。因此,筛选适合制备抗体芯片的配对mAb时,需要对mAb的特性进行综合分析,选取特异性好,亲和力高的mAb进行配对筛选。
- 闫静辉吴萌程华张小兵李春生李亚璞陈英珠
- 关键词：抗体芯片AFP抗体筛选夹心ELISA
- 抗人N端脑钠肽前体抗原表位分析及单克隆抗体的研制被引量：1
- 2019年
- 目的:制备并鉴定特异性抗人N端脑钠肽前体(NT-proBNP)抗原表位的单克隆抗体。方法:通过Bepipred在线表位预测方法和Epitope Prediction System软件预测人NT-proBNP B细胞抗原表位,综合2种预测结果对比优化选取合适的2个表位肽段P1和P2,偶联KLH为免疫原,免疫BALB/c小鼠,选择血清效价较高的小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合;经HAT筛选,间接ELISA法检测和有限稀释法进行亚克隆,得到阳性杂交瘤细胞株;采用体内诱生法制备腹水并用Protein G柱纯化抗体;经鉴定,对特异性最好的2株进行纯度、效价、亚型及亲和力的分析。结果:通过P2-KLH免疫获得的阳性杂交瘤细胞株1F9和P1-KLH免疫获得的阳性杂交瘤细胞株4H2能稳定分泌抗NT-proBNP单克隆抗体,纯度较高,能与NT-proBNP重组蛋白特异性结合,效价分别达到4×10^4、4×10^5,抗体亚型均为IgG1,相对亲和力常数分别为1.14×10^7和1.6×10^7 L/mol。结论:获得2株特性良好的单克隆抗体,可为下一步研制NT-proBNP检测试剂盒提供原材料。
- 侯亚璐井金苗魏治静柳峰松吴萌
- 关键词：B细胞抗原表位单克隆抗体间接ELISA法
- 一种检测鸡或鸭骨骼肌肌钙蛋白I的酶联免疫试剂盒及其制备方法与应用
- 本发明涉及一种检测鸡或鸭骨骼肌肌钙蛋白I的双抗夹心酶联免疫检测试剂盒及其制备方法与应用，属于免疫学技术领域和食品安全分析技术领域。该酶联免疫试剂盒含有包被有捕获抗体的酶标板、辣根过氧化物酶标记的检测抗体、鸡或鸭骨骼肌肌钙...
- 李春生刘鹏茹刘静静张静徐冬梅吴萌杜顺丰
- 抗猪血红蛋白单克隆抗体的研制与测定被引量：4
- 2018年
- 为了制备抗猪血红蛋白的单克隆抗体,试验用猪血红蛋白纯品为抗原,直接免疫雌性BALB/c小鼠;待血清检测为阳性后,将小鼠骨髓瘤细胞SP2/0与免疫后小鼠脾细胞融合;用间接ELISA法和有限稀释法进行阳性单克隆杂交瘤细胞株的筛选,并对其中效价较高的一株杂交瘤细胞株进行特性分析。采用辛酸-硫酸铵方法纯化抗体,用间接ELISA法测定亲和力常数。结果表明：该方法能得到稳定分泌抗猪血红蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株并制备腹水,获得了效价为1∶800 000的抗猪血红蛋白单克隆抗体,该单克隆抗体的亚型为lgG1,亲和力常数为2. 8×10^8L/mol,且该单克隆抗体与牛、人血红蛋白交差反应率均小于0. 1%。说明该单克隆抗体特性良好,可以作为后续试验原料,进一步用于猪血红蛋白检测试剂盒的研制中。
- 李翠娜王增利李春生董维亚韩庆安杜顺丰武孝丽吴萌
- 关键词：猪血红蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株
- 一种抗万古霉素单克隆抗体及其应用
- 本发明涉及一种抗万古霉素单克隆抗体及其应用，属于免疫学技术领域和兽药残留分析技术领域。所述抗万古霉素单克隆抗体由保藏编号为CCTCC NO:C2020117的杂交瘤细胞株分泌产生，该抗体效价为1:256000，亚型为Ig...
- 李春生李玉静刘鹏茹贾春旭刘静静张静吴萌
- 文献传递
- 一种磷脂酰肌醇蛋白聚糖GPC3蛋白片段及其应用和制备的杂交瘤细胞株
- 本发明涉及一种磷脂酰肌醇蛋白聚糖GPC3蛋白片段，其具有如SEQ ID No.1的氨基酸序列；本发明的GPC3蛋白片段的抗体特异性强，可用于制备高效价的多克隆或单克隆抗体，或者制备GPC3蛋白标准品，可用于GPC3蛋白检...
- 程华闫静辉方向东吴萌崔硕
- 文献传递
