唐艳
- 作品数：14 被引量：8H指数：2
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- 相关领域：农业科学更多>>
- 家蝇新型抗菌肽基因MDAP-2的克隆、表达与抗菌活性分析
- 家蝇具有特殊的免疫防御能力,在细菌刺激下可产生多种抗菌肽。在采用抑制性消减杂交技术(SSH)构建的cDNA文库的基础上,采用cDNA末端快速扩增技术(RACE),从沙门氏菌诱导的家蝇幼虫体内扩增到一个大小为198bp的抗...
- 裴志花孙小宁唐艳高云航马红霞
- 文献传递
- 家蝇幼虫防御素基因Mdd Ⅰ在毕赤酵母中的表达及其抗菌活性鉴定
- 2015年
- 根据家蝇幼虫防御素基因(MddⅠ)序列,设计合成含有KpnⅠ和XbaⅠ酶切位点的特异性引物,PCR扩增出MddⅠ基因全长序列。克隆并测定序列后,构建真核表达质粒pGAPZαAMddⅠ,将其在毕赤酵母(P.pastoris)GS115中分泌表达,并对表达产物进行抑菌活性分析。结果表明,Mdd 1基因在P.pastoris如中成功表达,分子量约为10.3 kDa,抑菌结果显示MddⅠ基因的真核表达产物对猪源链球菌有抑制作用。该试验成功构建了表达MddⅠ基因的P.pastoris菌株,为进一步研究MddⅠ真核表达产物的生物学活性和免疫学活性奠定了基础。
- 傅小蒙万玲唐艳孔令聪裴志花刘树明马红霞
- 关键词：家蝇防御素P.PASTORIS
- 家蝇幼虫防御素基因MddⅠ的克隆与原核表达被引量：3
- 2013年
- 以猪肺炎支原体诱导家蝇幼虫的cDNA为模板,通过cDNA末端快速扩增技术(RACE)对MddⅠ基因进行扩增,对扩增产物测序和分析。构建重组表达质粒pET-32a-MddⅠ,在大肠杆菌BL21(DE3)中用IPTG对其诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE分析。结果,MddⅠ基因全长475bp,其开放阅读框(ORF)276bp,编码91个氨基酸,编码蛋白的理论分子质量9.7ku,理论等电点(pI值)8.89,存在信号肽的剪切位点,亲水性较强且无明显跨膜区,α螺旋和不规则盘绕为其主要结构元件,β折叠散布在整个蛋白质中。具有Defensin-2家族保守区域,与GenBank中登录号为AY260152同源性最高,达78%。构建的重组表达质粒pET-32a-MddⅠ在大肠杆菌BL21(DE3)中表达出分子质量约为25ku的蛋白质,与预期大小一致。结果表明,MddⅠ基因具有完整的开放阅读框,为新的家蝇防御素基因;MddⅠ基因在原核表达系统中的表达为进一步研究表达产物的生物学活性和免疫学活性奠定了基础。
- 万玲傅小蒙唐艳孙小宁裴志花刘树明马红霞
- 关键词：家蝇防御素原核表达
- 家蝇幼虫溶菌酶Ⅱ基因的克隆、表达及抑菌活性研究
- 2015年
- 以本实验室构建的鸡致病性大肠杆菌诱导家蝇幼虫抑制性消减杂交文库(SSH)为基础,对家蝇幼虫溶菌酶II基因(MdL-II)进行克隆,得到全长为532 bp的cDNA片段,其开放阅读框(ORF)与GenBank中登录号为HQ897688.1的MdL-II基因全序列同源性为95%。将MdL-II ORF序列插入到pET-32a(+)表达载体中成功构建重组质粒,其表达产物经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,结果显示约在34 ku处出现表达条带且与目的蛋白大小相符。当诱导温度为37℃,IPTG浓度为0.6 mmol/L时可获得大量可溶性Trx-MdL-II融合蛋白,纯化融合蛋白并进一步检测该蛋白的抑菌活性,结果表明融合蛋白对大肠杆菌和链球菌均有抑菌作用,且对大肠杆菌的抑菌作用相对较强。
- 邵清唐艳万玲孔令聪裴志花马红霞
- 关键词：家蝇幼虫克隆表达蛋白纯化
- 四种病原菌诱导家蝇幼虫后构建的抑制性消减杂交文库中差异表达基因的分析
- 对分别以猪致病性大肠杆菌、猪肺炎支原体、鸡白痢沙门氏菌及牛多杀性巴氏杆菌诱导家蝇幼虫后构建的四个抑制性消减文库中筛选到的差异表达基因进行分析。结果显示，不同病原菌诱导家蝇幼虫后筛选到了大量与家蝇免疫防御、信号传导、及物质...
- 唐艳裴志花王莹张惠左红梅王东方马红霞
- 关键词：家蝇幼虫抑制性消减文库差异表达基因
- 四种病原菌诱导家蝇幼虫后构建的抑制性消减杂交文库中差异表达基因的分析
- 对分别以猪致病性大肠杆菌、猪肺炎支原体、鸡白痢沙门氏菌及牛多杀性巴氏杆菌诱导家蝇幼虫后构建的四个抑制性消减文库中筛选到的差异表达基因进行分析。结果显示,不同病原菌诱导家蝇幼虫后筛选到了大量与家蝇免疫防御、信号传导、及物质...
- 唐艳裴志花王莹张惠左红梅王东方马红霞
- 关键词：家蝇幼虫抑制性消减文库差异表达基因
- 文献传递
- 昆虫抗真菌肽的作用机制与应用研究进展被引量：2
- 2017年
- 昆虫抗真菌肽作为昆虫防御外来病原菌的第一道防线,是构成昆虫先天免疫系统的重要组成部分,不需要免疫记忆并能直接有效地消灭外来入侵的病原体。随着昆虫抗真菌肽的深入研究,目前已发现昆虫抗真菌肽80多种,其主要是通过破坏真菌细胞壁、改变细胞膜通透性及细胞内ROS的产生发挥抑制和杀灭真菌的作用。抗真菌肽的这种作用机制使其广谱且不易产生耐药性和副作用。在农业、食品及医药等多个领域中,昆虫抗真菌肽作为生物农药、天然的防腐剂及新型的抗真菌物质,尤其是对某些耐药性病原菌的杀灭作用更是引起了人们的关注,有望成为一种新型高效的抗真菌药物。
- 张丹丹刘磊唐艳裴志花孔令聪刘树明马红霞
- 关键词：昆虫抗真菌肽先天免疫耐药性抗真菌药物
- 家蝇幼虫抗菌蛋白基因AS566在毕赤酵母中的表达及产物抑菌活性检测
- 2016年
- 为采用巴斯德毕赤酵母系统表达家蝇幼虫抗菌蛋白AS566基因,并对其抑菌活性进行初步确证。以分子克隆法构建重组表达质粒pGAPZαA-AS566,将其线性化后电击转化至毕赤酵母GS115感受态细胞,在GAP启动子调控下,于30℃诱导表达,SDS-PAGE检测结果显示表达产物的分子质量约为43.5 ku,与预期结果一致。采用管碟法对表达产物的抑菌活性进行检测,结果显示该表达产物对鸡源沙门菌和猪源金黄色葡萄球菌的生长具有抑制作用。本研究为进一步研究家蝇幼虫抗菌蛋白的抑菌机制奠定了基础。
- 闫恕李文婷丁士雯袁野唐艳孔令聪裴志花刘树明马红霞
- 关键词：毕赤酵母真核表达抑菌活性
- 家蝇新型抗菌肽基因MDAP-2的克隆、表达与抗菌活性分析
- 家蝇具有特殊的免疫防御能力,在细菌刺激下可产生多种抗菌肽。在采用抑制性消减杂交技术(SSH)构建的cDNA文库的基础上,采用cDNA末端快速扩增技术(RACE),从沙门氏菌诱导的家蝇幼虫体内扩增到一个大小为198bp的抗...
- 裴志花孙小宁唐艳高云航马红霞
- 家蝇乙醇脱氢酶基因MADH基因的克隆、表达与活性分析
- 乙醇脱氢酶在昆虫代谢、蜕皮及变态发育中起着重要作用。以鸡沙门氏菌诱导家蝇幼虫构建的抑制性消减文库中筛选到的未知功能基因为研究对象,应用RACE技术(Rapid amplification of cDNA ends,RAC...
- 裴志花孙小宁唐艳高云航马红霞
- 文献传递
