孟毅
- 作品数：30 被引量：118H指数：7
- 供职机构：复旦大学上海医学院妇产科研究所更多>>
- 发文基金：国家教育部“985工程”国家自然科学基金上海市科委科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 分子佐剂C3d3增强hCGβ蛋白疫苗免疫原性及其抗血清中和hCG生物学活性的作用被引量：4
- 2004年
- 本文观察分子佐剂C3d3增强hCGβ蛋白避孕疫苗体液免疫效力的能力。采用分子生物学技术以phCMV1为载体分别构建分泌型、带有6个组氨酸纯化标签的真核表达质粒phCMV1-6His-hCGβ-C3d3和phCMV1-6His-hCGβ,在CHO 细胞中获得重组蛋白的稳定、高效表达,并用镍柱和凝胶过滤层析对其进行分离、纯化。分别用hCGβ-C3d3融合蛋白、hCGβ+弗氏佐剂和单用hCGβ免疫生育期雌性BALB/c 小鼠,共免疫两次,间隔4周。ELISA 测定血清中抗hCGβ抗体滴度,并对各组小鼠产生的抗血清中和hCG 生物学活性的能力进行比较。结果表明hCGβ单独免疫组在加强免疫后才见抗体生成,其抗体滴度比hCGβ-C3d3融合蛋白免疫组低1995倍,C3d3的佐剂能力是弗氏佐剂的10倍(初次免疫)-32倍(再次免疫),并且hCGβ-C3d3融合蛋白免疫小鼠产生的抗血清具有很强的中和hCG 生物学活性的作用。实验证明通过分子佐剂C3d3可以大幅提高机体对hCGβ的体液免疫应答能力。
- 王秀丽李大金袁敏敏王明雁朱影孟毅
- 关键词：免疫避孕分子佐剂C3D3避孕疫苗抗血清
- 补肾宁心方对去势雌兔免疫功能的影响被引量：2
- 2006年
- 为探讨补肾宁心方对去势雌兔免疫功能的影响。24只3月龄新西兰雌兔随机分为正常对照组、假手术组、去势组(卵巢切除)、中药组(卵巢切除并灌以补肾宁心中药复方),除正常对照组外均于卵巢切除2周后给予高脂饮食,中药组同时灌胃给药,其余各组均灌服等量的蒸馏水,连续3个月。采用MTT法测定外周血淋巴细胞增殖反应;同时采用半定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测动物脾脏IL-2、IL-10 mRNA的表达量。结果显示:雌兔去势后,动物外周血淋巴细胞增殖活性较正常对照组明显降低;补肾宁心方灌药后动物的外周血淋巴细胞增殖活性明显增强,补肾宁心方对动物脾脏的IL-2 mRNA表达水平有明显的上调作用,而对动物脾脏的IL-10mRNA表达水平有明显的下调作用。
- 郝群李大金周跃华袁敏敏孟毅
- 关键词：补肾宁心方绝经期免疫
- CD1332/AC141——一种滋养层细胞新的细胞内标志被引量：2
- 2004年
- 目的 了解CD133在滋养细胞的表达情况 ,为鉴定滋养细胞株及原代分离的滋养细胞提供新的细胞内标志。 方法 通过胰蛋白酶 /DNaseⅠ分步消化 ,Percoll密度梯度离心分离纯化滋养细胞 ,经抗角蛋白 (CK 7)、波形蛋白 (vimentin)单克隆抗体行免疫细胞化学和流式细胞仪 (FACS)鉴定 ,纯度达 95 %以上。采用三种不同的CD133荧光标记单克隆抗体在70 %的甲醇固定前后对原代分离的滋养细胞和绒毛膜上皮癌细胞株 (JAR)行FACS分析。 结果 70 %甲醇固定前 ,三种CD133单克隆抗体均不能与滋养细胞反应 ;固定后 ,抗CD133 1(AC133 1 APC)、抗CD133 2 (2 93C3 PE)仍不能与滋养细胞反应 ,而抗CD133 2 (AC14 1 PE)与滋养细胞胞内抗原结合。而且AC14 1阳性的细胞也是CK 7阳性的细胞。 结论 CD133 2 /AC14 1可作为滋养细胞纯度鉴定的一种有用标志 ,但应用时应选择合适的抗体。
- 杜美蓉李大金王明雁朱影袁敏敏孟毅
- 环孢素A诱导妊娠失败模型孕鼠外周母-胎免疫耐受被引量：4
- 2006年
- 目的探讨环孢素A(cyclosporin A,CsA)能否诱导妊娠失败模型CBA/J×DBA/2孕鼠外周母-胎免疫耐受。方法分别使用CBA/J×DBA/2及CBA/J×BALB/c作为妊娠失败模型和正常妊娠模型,CBA/J小鼠于妊娠第4天(着床期)腹腔注射不同剂量(0、5、10、15mg/kg)CsA,妊娠第9天和第14天时分别采用单向混合淋巴细胞反应分析孕鼠外周脾脏免疫细胞对父系抗原的增殖能力,并用RT-PCR分析细胞IL-2mRNA含量以研究脾脏细胞母-胎免疫耐受状态;妊娠第14天观察两组的胚胎吸收率。结果(1)于妊娠第4天腹腔注射5、10、15mg/kg CsA后,妊娠失败模型胚胎吸收率分别下降至2.86%、5.75%及11.24%,明显低于对照组(P<0.001,P<0.01,P<0.01);而对妊娠成功模型胚胎吸收率无显著性影响(P>0.05)。(2)混合淋巴细胞反应研究显示,于妊娠第4天腹腔注射CsA,可使妊娠第9、14天的妊娠失败模型孕鼠外周脾脏免疫细胞对父系抗原的增殖能力显著下降(P均<0.01);RT-PCR分析显示,孕鼠脾细胞受父系抗原刺激后IL-2转录显著下降(P均<0.01)。结论于孕早期腹腔注射CsA可诱导妊娠失败模型孕鼠外周免疫细胞对父系抗原的特异性免疫耐受,从而使自然流产模型孕鼠的妊娠结局达到正常妊娠水平,提示CsA可能成为治疗妊娠失败的有效药物。
- 闫凤亭杜美蓉李大金程海东王明雁朱影孟毅
- 关键词：环孢素A混合淋巴细胞反应IL-2免疫耐受
- 补肾宁心方对去势高脂血症家兔主动脉血管细胞粘附分子1表达的调节被引量：10
- 2004年
- 为了探讨补肾宁心方对去势雌兔动脉粥样硬化形成的影响及其可能的机制,将26只3月龄新西兰雌兔随机分为正常对照组、假手术组、去势对照组和治疗组(卵巢切除并灌以补肾宁心中药复方),除正常对照组外均于术后2周给予高脂饮食,治疗组同时灌胃给药,连续3个月。12周末测定血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平;取主动脉行组织形态学及扫描电镜观察,并应用免疫组织化学方法检测主动脉血管细胞粘附分子1的蛋白表达。结果发现,与去势对照组比较,补肾宁心方对血脂变化无明显影响,但能明显降低主动脉粥样斑块面积与动脉内膜比值,降低内膜中膜厚度比,减轻主动脉病理损害,抑制主动脉血管细胞粘附分子1的蛋白表达。结果提示,补肾宁心方可能通过抑制主动脉血管细胞粘附分子1的表达从而阻止动脉粥样硬化的发生发展。
- 郝群李大金朱影袁敏敏王明雁孟毅
- 关键词：中药学补肾宁心方卵巢切除术血管细胞粘附分子1
- 加强免疫治疗反应不良的RSA患者的疗效评价
- 2003年
- 目的 :评价加强免疫对淋巴细胞免疫治疗反应不良RSA患者的疗效。方法 :以封闭抗体流式细胞术选择抗CD3 BE和抗CD4 BE低于 0 %的母 胎免疫识别低下型RSA患者行配偶淋巴细胞体外诱生后免疫、高于 0 %者行配偶淋巴细胞直接免疫 ,对第一疗程反应不良的RSA患者行加强免疫治疗 ,复测封闭抗体指标以评价其效果。结果 :母 胎免疫识别低下型RSA经配偶淋巴细胞免疫后封闭抗体水平仍呈下降趋势的患者 ,经第二疗程配偶淋巴细胞加强免疫后 ,封闭抗体水平明显升高 ,而经配偶淋巴细胞直接免疫者虽然封闭效率明显升高 ,其它指标均无明显改善。结论 :对配偶淋巴细胞免疫疗法反应不良的RSA患者需进行第二疗程配偶淋巴细胞加强免疫 ,以配偶淋巴细胞体外诱生后免疫治疗为佳。
- 余江李大金朱影王明雁孟毅
- 补肾宁心方对单核-内皮细胞在动脉粥样硬化中相互作用的影响被引量：14
- 2004年
- 目的 探讨补肾宁心方对动脉粥样硬化中单核 -内皮细胞相互作用的影响。方法 以培养人脐静脉内皮细胞 (HUVECs)作为靶细胞 ,在内皮细胞培养基中加入氧化型低密度脂蛋白 (ox- LDL)并在试验体系中加入灌服补肾宁心方的兔血清 ,收集内皮细胞条件培养基 ,作用于人单核细胞系 U937细胞 ,检测内皮细胞条件培养基中 MCP- 1的含量及内皮细胞表面粘附分子、细胞间粘附分子 - 1 (ICAM- 1 )、血管细胞粘附分子 - 1(VCAM- 1 )的表达 ,同时测定 U937细胞 CCR2、LFA- 1以及 VL A- 4 m RNA水平。结果 ox- LDL显著升高内皮细胞条件培养基中 MCP- 1的含量 ,明显促进内皮细胞表面 ICAM- 1、VCAM- 1的表达 ,且在内皮细胞条件培养基作用下单核 U937细胞 CCR2、L FA- 1以及 VL A- 4 m RNA水平明显升高。如在试验体系中加入灌服补肾宁心方的动物血清 ,则 MCP- 1含量明显下降 ,内皮细胞表面 ICAM- 1、VCAM- 1的表达显著下调 (P<0 .0 1 ) ,且在条件培养基作用下单核 U937细胞 CCR2、LFA- 1以及 VLA- 4 m RNA水平明显下调。结论 补肾宁心方含药血清可能通过抑制内皮细胞分泌趋化因子、下调内皮细胞表面粘附分子的表达 ,抑制内皮细胞对单核细胞的趋化及相互粘附 ,从而发挥对血管内皮细胞的保护作用。
- 郝群李大金朱影袁敏敏王明雁孟毅
- 关键词：补肾宁心方单核细胞内皮细胞动脉粥样硬化趋化因子细胞粘附分子
- 过继转输的胚胎抗原耐受T细胞在妊娠小鼠体内细胞因子及协同刺激分子的表达特征被引量：1
- 2005年
- 目的 :分析过继转输的小鼠胚胎抗原耐受T细胞内细胞因子及细胞表面协同刺激分子的表达特征。方法 :以♀CBA/J×♂DBA/ 2为自然流产模型 ,将自然流产模型CBA/J孕鼠于孕 4天 (着床期 )分别腹腔注射大鼠抗小鼠CD80和CD86mAb或大鼠同型IgG。于孕 9天 ,应用免疫磁珠阴性分选两组孕鼠的脾脏T细胞 ,将T细胞进行碳氧氢化荧光素双乙酸盐琥珀酰亚胺酯 (CFSE)体外荧光标记 ,再分别过继转输至孕 4天的CBA/J×DBA/ 2孕鼠。在宿主孕鼠孕第 9天 ,处死小鼠取脾细胞 ,用流式细胞术分析在DBA/ 2父系抗原刺激下过继转输的T细胞细胞因子IL 2、IL 4、IL 10和IFN γ及协同刺激分子CD2 8和CTLA 4的表达。结果 :与过继转输的胚胎抗原非耐受T细胞相比 ,过继转输的胚胎抗原耐受T细胞IL 10的表达显著增加 ,IL 2和IFN γ的表达则显著下降 (P <0 0 5 ) ,IL 4的表达无明显改变 (P >0 0 5 ) ;细胞表面CD2 8的表达显著下降 ,而CTLA 4的表达却显著增加 (P <0 0 5 )。结论 :过继转输的小鼠胚胎抗原耐受T细胞内Th2型细胞因子和表面CTLA 4表达上调 ,而Th1型细胞因子和表面CD2 8的表达则下降。胚胎抗原耐受T细胞通过Th2型细胞因子表达优势和协同刺激信号降调节 ,在母 胎免疫耐受的维持中发挥着重要作用。
- 金莉萍李大金王明雁朱影袁敏敏孟毅
- 关键词：过继转输细胞因子协同刺激分子
- 过继转输胚胎抗原耐受T细胞诱导自然流产孕鼠母胎免疫耐受被引量：3
- 2004年
- 探讨过继转输胚胎抗原耐受T细胞对小鼠自然流产模型妊娠预后及宿主孕鼠免疫细胞对父系抗原免疫耐受状态的影响。以CBA/J×BALB/c为正常妊娠模型 ,CBA/J×DBA/ 2为自然流产模型 ,将自然流产模型CBA/J孕鼠于孕 4d (着床期 )分别腹腔注射大鼠抗小鼠CD80和CD86mAb或大鼠同型IgG。于孕 9d ,应用免疫磁珠阴性分选三组孕鼠的脾脏T细胞 ,并将三组T细胞分别转输至孕 4d的CBA/J×DBA/ 2孕鼠。于宿主孕鼠孕第 9天 ,采用单向混合淋巴细胞反应分析宿主孕鼠脾脏免疫细胞对父系抗原的增殖能力 ,并用流式细胞术分析经父系抗原刺激的宿主孕鼠脾脏T细胞内IL 2表达水平。于孕 1 4d分别观察宿主孕鼠的胚胎吸收率。结果显示 ,过继转输胚胎抗原耐受T细胞和转输正常妊娠模型孕鼠的T细胞均可诱导宿主孕鼠脾脏免疫细胞对父系抗原的增殖能力及IL 2的表达显著下降 (P <0 0 5 ) ,孕 1 4d胚胎吸收率也显著下降 (P <0 0 5 )。这些结果表明 ,于孕早期过继转输胚胎抗原耐受T细胞和转输正常妊娠模型孕鼠的T细胞能诱导宿主孕鼠母 胎免疫耐受 ,防止母体对胚胎的免疫排斥 ,从而使自然流产模型的妊娠预后达到正常妊娠水平。
- 金莉萍李大金王明雁朱晓勇朱影袁敏敏孟毅
- 关键词：胚胎吸收率
- 过继转输的胚胎抗原耐受T、B细胞在受体孕鼠体内的归巢和分析被引量：1
- 2004年
- 目的 :观察过继转输的胚胎抗原耐受T、B细胞在受体孕鼠体内的归巢和分布 ,以探讨免疫耐受T细胞在诱导受体母 胎免疫耐受中的作用机制。方法 :于孕 4天 (着床期 )给小鼠自然流产模型CBA J×DBA 2孕鼠腹腔注射抗CD80和CD86mAb ,以诱导母 胎免疫耐受。孕 9天应用免疫磁珠分选孕鼠脾脏T、B细胞 ,并用CFSE体外荧光标记。将标记的T、B细胞分别转输至孕 4天的CBA J×DBA 2孕鼠 ,36小时后在双光子共聚焦显微镜下观察T、B细胞在受体体内脾脏、子宫引流淋巴结及母 胎界面组织中的分布。结果 :过继转输的T、B细胞分布在孕鼠体内脾脏和子宫引流淋巴结 ,但并不留驻在母 胎界面。结论 :过继转输的胚胎抗原耐受T细胞定居于外周免疫器官 ,从而介导受体孕鼠对相应父系抗原的免疫耐受。
- 金莉萍李大金王明雁朱影孟毅袁敏敏
- 关键词：过继转输B细胞脾脏母-胎界面
