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端粒植入和端粒位置效应对胃癌细胞生物学行为的影响: 胃癌的发生是一个由多基因改变、多种因素参与、并经历了多步骤的渐进过程，癌基因，抑癌基因、DNA错配修复基因、细胞黏附分子、端粒/端粒酶、细胞周期调节因子和生长因子/受体系统等多个基因改变的积累参与了由正常上皮细胞转变成胃...; 巩艳; 关键词：肿瘤病理基因表达胃癌; 文献传递

端粒植入胃癌7901细胞对细胞生长、端粒和端粒酶的影响被引量：3: 2008年; 研究外源端粒片段植入胃癌7901细胞后对细胞生长、端粒长度和端粒酶活性的影响.采用lipofectTM2000介导的转染方式,将含有端粒片段质粒pSXneo-1.6-T2AG3转染胃癌细胞SGC7901,PCR在基因水平上鉴定外源性端粒片段的植入后,采用TRAP法检测转染细胞端粒酶活性变化,TRF法检测转染细胞端粒长度变化,MTT法检测细胞生长曲线,RT-PCR测定转染细胞hTERT表达变化,染色体核型分析细胞染色体变化.结果显示端粒片段成功导入SGC7901细胞后获得稳定的细胞株,端粒片段植入后细胞生长变慢,端粒长度延长不明显,端粒酶活性明显降低,hTERTmRNA表达水平下降,核型分析显示转染前后细胞染色体数目无明显变化.实验成功将携带了1600bp端粒TTAGGG重复序列的真核表达载体pSX-T2AG3-neo稳定转染至人胃癌7901细胞中,端粒植入降低细胞端粒酶的活性和下调端粒酶活性亚单位hTERT的表达,但对端粒长度无明显影响.; 巩艳房殿春罗元辉张汝钢; 关键词：端粒酶端粒长度

人LXR-LBD原核表达载体的构建及其在E.coli中的表达: 2005年; 从正常中国人的肝脏组织分离总RNA,采用RT-PCR获得人的LXR-LBDcDNA,然后克隆至原核表达载体pET28a,构建高效原核表达质粒pET28a-LXR-LBD,序列分析表明正常中国人的LXR-LBDcDNA序列与GeneBank报道的序列一致.把构建的pET28a-LXR-LBD质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG进行诱导表达,Westernblot检测表达产物,在相对分子质量35kD处有特异的蛋白表达条带,表达蛋白以可溶性和包涵体方式存在.在N末端融合6×His纯化标签的表达产物用Ni2+-NTA离子交换树脂进行纯化,纯化蛋白进行SDS-PAGE纯度分析大于90%以上.; 巩艳叶治家曹廷兵彭家和江渝; 关键词：LXR 克隆

胃癌细胞中端粒位置效应研究被引量：2: 2005年; 目的　研究插入端粒片段的荧光素酶报道质粒在胃癌细胞的转染及它对相邻荧光素酶报道基因表达的影响,探讨胃癌细胞中端粒位置效应的存在。方法　将pTET OFF调节质粒和携带荧光素酶报道基因的pTRE2 Hyg Luciferase反应质粒共转染胃癌细胞SGC790 1,经强力霉素(deoxycyline)诱导2 4h后检测报道基因活性,观察强力霉素诱导的抑制反应。然后将插入有端粒片段的荧光素酶报道质粒pBX质粒和对照质粒pBX ntf (noteloemerefragment)分别与pTET OFF调节质粒共转染细胞,在强力霉素诱导下,检测报道基因活性的改变。结果　共转染pTET OFF和pTRE Hyg Luciferase质粒的SGC790 1细胞,在强力霉素作用下荧光素酶报道基因的活性逐渐降低。强力霉素诱导分别共转染有pTET OFF和pBX质粒或pTET OFF和pBX ntf的细胞时,前者荧光素酶活性较后者降低4倍。结论　转染TET OFF基因表达调控系统的胃癌细胞SGC790 1受强力霉素的诱导抑制;转染入胃癌细胞中的端粒片段降低了存在它附近荧光素酶报道基因的表达水平。; 巩艳房殿春罗元辉; 关键词：胃癌细胞

sIL-16在大肠杆菌中的表达及活性分析被引量：3: 2002年; 用PCR法扩增本室保存的sIL 16cDNA片段,插入含T7启动子的表达载体pET28a(+)中构建重组质粒pET sIL16,转化大肠杆菌BL21(DE3),低温经IPTG诱导蛋白表达,过Ni2+螯和层析柱一步纯化表达蛋白,重组蛋白与Jurkat细胞共同孵育后,观察它对细胞表面IL 2R表达的影响,结果发现IPTG诱导蛋白表达后,经SDS PAGE电泳,可以看到在18kD左右出现明显蛋白表达条带,表达量占菌体可溶蛋白的40%左右,纯化蛋白的纯度达90%以上,经重组蛋白处理过的Jurkat细胞表面IL 2R的表达水平比未经它处理的细胞增高了18.54%.; 巩艳叶治家甘立霞何凤田曹廷兵彭家和; 关键词：大肠杆菌活性分析纯化

端粒位置效应与人类衰老被引量：4: 2004年; 端粒随细胞分裂进行性缩短不但防止了人类肿瘤的发展,而且与人类的衰老密切相关。另外,端粒中存在一种特殊的现象:端粒位置效应,它首先在酵母中发现,表现为靠近端粒序列附近的基因表达因端粒的位置效应而沉默。在人类细胞中也存在端粒位置效应,并且有多种因子参与此效应,它可能对细胞生长停止、肿瘤以及衰老发生时等许多随端粒缩短密切相关基因的程序性表达产生重要作用。; 巩艳房殿春; 关键词：端粒衰老肿瘤

端粒植入对胃癌SGC7901细胞生物学行为的影响被引量：2: 2005年; 目的研究外源端粒片段植入对胃癌细胞生物学行为的影响,初步探讨端粒影响细胞生物学活性的作用机制。方法大规模制备含有端粒片段的质粒pSXneo1.6T2AG3,采用LipofectAMINTM2000介导的转染方式,将质粒转染胃癌细胞SGC7901,检测细胞周期、细胞形态、细胞生长曲线和细胞周期相关基因表达的改变。结果端粒片段能够成功导入SGC7901细胞,获得稳定的细胞株。端粒片段植入后细胞生长变慢,异型性减少,S期细胞减少,G0/G1和G2M期细胞比例增加,增殖指数减小,P21mRNA表达明显高于SGC7901细胞(P<0.05),caspase3mRNA在各组细胞的表达无显著差异(P>0.05)。结论携带了1600bp端粒TTAGGG重复序列的真核表达载体pSXneo1.6T2AG3能够稳定转染至人胃癌SGC7901细胞中,使细胞增殖减慢,P21mRNA表达上调,但对caspase3mRNA表达无明显影响。; 巩艳房殿春罗元辉帖君陈刚; 关键词：胃肿瘤生物学行为

sIL-16在大肠杆菌中的表达及活性测定: IL-16（interleukin-16,IL-16）最初是在1982年由Cruik Shank实验室从抗原刺激的单核细胞中分离提纯的/[1/]，因具有T细胞特异性的趋化作用而被称为淋巴细胞趋化因子（Lymphocyte...; 巩艳; 文献传递

端粒植入对胃癌7901细胞生长、端粒长度和端粒酶活性和hTERT mRNA表达的影响: 目的研究外源端粒片段植入对胃癌7901细胞生长、端粒长度和端粒酶活性的影响。方法大规模制备含有端粒片段的质粒 pSXneo-1．6-T2AG3,采用 lipofect TM2000介导的转染方式,将质粒稳定转染胃癌细胞 ...; 巩艳房殿春张汝钢杨仕明汪荣泉彭贵勇陈文生罗元辉; 文献传递

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巩艳