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张建峰: 作品数：25 被引量：48H指数：3; 供职机构：广东省农业科学院动物卫生研究所更多>>; 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省农科院院长基金国家自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>

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shRNA抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)JXA1-R株在Marc-145细胞中复制及抗PRRSV细胞株的建立被引量：1: 2013年; 猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是世界上主要的猪传染性疾病之一,目前,疫苗和抗病毒药物只能提供有限的保护。本研究选择猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)JXA1-R株ORF1a、ORF3、ORF4、ORF5、ORF6、ORF7的保守区域为靶序列,利用pSilencer2.1-U6neo构建shRNA表达载体并转染Marc-145细胞。经实时荧光定量PCR、细胞病变及病毒滴度分析,结果显示,ORF1a-4-shRNA、ORF3-1-shRNA、ORF6-2-shRNA干扰质粒能明显抑制病毒基因的转录,并有效抑制PRRSV在Marc-145上的增殖,显著降低病毒滴度。最后筛选ORF6-2-shRNA表达质粒转染猪胎儿成纤维细胞,构建稳定转染细胞株,为抗PRRSV转基因猪的生产奠定了基础。; 李红梅贺聪张茂孟轩张建峰张健騑郭鹏举; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 RNA干扰

抑制猪源p53基因表达的RNA干扰载体及其制备与应用: 本发明公开了一种抑制猪源p53基因表达的RNA干扰载体及其制备方法与应用，属于基因工程领域。该RNA干扰载体以pEGFP-C1为骨架载体，包括猪U6RNA聚合酶Ⅲ启动子和干扰猪源p53基因的shRNA的转录模板。将pEG...; 沈海燕张建峰郭鹏举张春红周恒朱余军; 文献传递

一种固定线虫单条虫DNA粗提液及其制备方法与应用: 本发明属于分子生物学检测鉴定技术领域，具体涉及一种固定线虫单条虫DNA粗提液及其制备方法与应用。本发明通过线虫样品的洗涤、固定线虫样品的裂解以及DNA粗提液的制备等步骤，制备得到固定线虫单条虫DNA粗提液，该提取液进一步...; 徐春玲张建峰赵传波谢辉; 文献传递

用单条线虫虫体或单个线虫虫卵鉴定植物寄生线虫的方法: 本发明公开了一种用单条线虫虫体或单个线虫虫卵鉴定植物寄生线虫的方法，属于分子生物学检测鉴定技术领域。在分子生物学实验中由于线虫个体小，在提取单条线虫DNA模板的过程中存在容易混入其它试剂污染或者将单条线虫切断处理过程中易...; 徐春玲谢辉赵传波丁莎张建峰; 文献传递

检测鸭坦布苏病毒NS1抗体ELISA方法的建立被引量：2: 2017年; 为了检测鸭群中鸭坦布苏病毒的血清学流行情况,本研究在前期成功表达鸭坦布苏病毒NS1蛋白的基础上,建立了检测鸭血清中鸭坦布苏病毒抗体的间接ELISA方法。棋盘法确定了当纯化的NS1蛋白包被量为0.188μg/孔,待检血清1:200稀释,HRP标记的兔抗鸭二抗1:16000倍稀释时反应条件最佳。在最佳反应条件下,阴阳性临界值判定标准为0.467。用建立的间接ELISA方法对番鸭细小病毒、鹅细小病毒、鸭肝炎病毒、鸭疫里默氏杆菌阳性血清进行了检测,均无交叉反应,表明该方法具有良好的特异性。批内和批间重复试验的最大变异系数分别为6%和10%,显示该方法具有很好的稳定性。用建立的ELISA方法检测临床鸭坦布苏病毒感染鸭及攻毒蛋鸭的55份临床血清样品,测得52份为阳性,阳性率为94.5%,对36份阴性鸭群血清样品进行检测,36份为阴性,阴性率为100%。该方法为鸭坦布苏病毒的诊断和流行病学监测奠定了基础。; 孙敏华郭建伟李林林董嘉文邝瑞欢吴玄光张建峰胡奇林张春红; 关键词：NS1蛋白 ELISA

广东、湖南两地鸡饲料中矿物元素含量分析被引量：2: 2013年; 在家禽生产中，矿物质有调节动物体内渗透压、保持体液酸碱平衡的作用；同时它又是骨骼、蛋壳、血红蛋白、甲状腺激素的重要组成成分，是家禽正常生活、生产不可缺少的重要物质。人们为保证配合饲料营养的全面性，往往通过外源添加的方式补充多种矿物元素，日粮中矿物元素不足或过多会导致动物矿物元素缺乏症或中毒；因此，实现对配合饲料中矿物元素含量的准确测定对于饲料品质的把握至关重要。此外，严格控制饲料原料中重金属元素的超标也是一个关乎饲料安全和食品安全的重要问题，这同样需要对饲料原料中的重金属元素含量进行准确测定。; 朱余军韩文彩陈龙张晓战郭剑英张春红张建峰潘家强; 关键词：金属元素含量鸡饲料家禽生产动物体内矿物元素

鸡传染性贫血病病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立: 鸡传染性贫血病(chicken infectious anemia,CIA)又称蓝翅病、出血综合征或贫血性皮炎综合征,是由鸡传染性贫血病毒(chicken infectious anemia virus,CIAV)引起的...; 郭翠丽张春红郭鹏举张建峰沈海燕潘家强

广东、湖南两地鸡饲料中矿物元素含量分析: 矿物元素作为饲料添加剂在世界各国普遍应用，但也存在潜在的不安全因素。市场上的饲料品质良莠不齐，饲料中矿物元素的添加量往往难以达到最适的标准。饲料中矿物元素供应不足会影响机体正常发育；而过量同样会影响机体健康，甚至造成中毒...; 朱余军韩文彩张春红张建峰潘家强

RNAi抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究进展: 2013年; 猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是世界上主要的猪传染性疾病之一,以妊娠母猪发热、厌食、早产、流产、死胎等繁殖障碍及仔猪高死亡率和育成猪呼吸困难,类流感症状、发育迟缓为主要的特征。该病给各个国家的养猪业带来巨大的经济损失,目前,疫苗和抗病毒药物只能提供有限的保护。自2006年以来,不断有研究者应用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术开展抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究,并取得了一些阶段性成果。对已有的研究成果进行了综述。; 李红梅贺聪张春红张健騑张建峰孟轩郭鹏举; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 RNAI 抗病毒

H7N9亚型禽流感病毒HRM检测方法的建立被引量：3: 2016年; 根据H 7N 9亚型禽流感病毒(AIV)的HA和NA基因保守区域,分别设计了2对特异性引物,通过优化反应条件,建立了基于高分辨率熔解曲线(HRM)分析的H7N9亚型AIV检测方法。结果显示,该方法特异性强,其他常见禽源病毒及非H7亚型和非N9亚型的AIV不能形成特异熔解峰形;灵敏度高,对H7和N9阳性质粒的最低检测限分别达到1.0×101 copies/L和1.0×100 copies/L;重复性好,熔解峰Tm 1和Tm2的批内和批间变异系数均<1%;临床样本检测与某商品化H7N9亚型AIV定量PCR检测试剂盒比较,符合率为100%。该方法可用于临床疑似病例的应急检测、早期诊断及养鸡场、活禽交易市场等外环境H7N9亚型AIV的监测。; 刘志成贾伟新孙敏华沈海燕孙俊颖殷三鸿钟亮宁张建峰张春红; 关键词：禽流感高分辨率熔解曲线