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张昭秀

作品数：8 被引量：41H指数：4
供职机构：福建医科大学附属协和医院更多>>
发文基金：国家教委资助优秀年轻教师基金福建省教委科研基金福建省医学创新课题更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 8篇中文期刊文章

领域

  • 7篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 5篇细胞
  • 5篇基因
  • 2篇荧光
  • 2篇荧光定量
  • 2篇生长因子Β
  • 2篇实时荧光
  • 2篇实时荧光定量
  • 2篇转化生长因子
  • 2篇转化生长因子...
  • 2篇扩增
  • 2篇化生
  • 2篇TGF-Β
  • 2篇TGF-Β1
  • 1篇凋亡
  • 1篇引物
  • 1篇造血
  • 1篇造血干
  • 1篇真核
  • 1篇真核表达
  • 1篇真核表达载体

机构

  • 8篇福建医科大学
  • 1篇福州大学
  • 1篇福建省泉州市...

作者

  • 8篇张昭秀
  • 5篇陈元仲
  • 5篇吕联煌
  • 4篇胡建达
  • 4篇吴勇
  • 3篇黄美娟
  • 3篇李乃农
  • 2篇陈鑫基
  • 2篇吴立德
  • 2篇郑静
  • 1篇张臣青
  • 1篇黄惠芳
  • 1篇梁敏
  • 1篇陈晓梨
  • 1篇李昊
  • 1篇林敏辉
  • 1篇景全胜
  • 1篇兰小鹏
  • 1篇陈显凌
  • 1篇杨旭伟

传媒

  • 2篇福建医科大学...
  • 2篇中国病理生理...
  • 2篇中华血液学杂...
  • 1篇中华医学遗传...
  • 1篇中国生物化学...

年份

  • 2篇2008
  • 4篇2003
  • 2篇2002
共 8 条 记 录，以下是 1-8
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排序方式：
银染mRNA差异显示方法的建立被引量：14
2002年
目的　建立银染 m RNA差异显示方法 ,为差异表达基因片断的分离克隆奠定基础。　方法　采用随机引物和锚定引物各 1条 ,建立差异显示反转录聚合酶链式反应 (DDRT- PCR)和银染方法 ,对 DDRT- PCR过程中各实验影响因素进行优化 ,割取差异条带进行二次扩增。　结果　当总 RNA用量为 0 .2μg,引物浓度为 0 .6～ 1.0μm ol/ L ,d NTP浓度为 2 0 0μmol/ L ,Mg Cl2 浓度为 1.6～ 2 .0 mm ol/ L时 ,同时起始 5个循环的退火温度为 5 0℃ ,扩增效率最佳 ,特异性好 ,背景干净。　结论　 DDRT- PCR方法简便、快捷、灵敏、高效 ,可用于分离差异表达基因。
陈晓梨陈鑫基郑静张昭秀胡建达
关键词：基因扩增差异表达基因克隆DDRT-PCR
TGF-β1参与视黄酸诱导的HL-60细胞分化被引量：3
2008年
为研究内源性TGF-β1对全反式视黄酸(ATRA)作用HL-60细胞的影响,应用定量RT-PCR和ELISA方法,研究ATRA诱导HL-60细胞分化过程中TGF-β1表达的变化.并构建TGF-β1RNA干扰表达质粒,抑制HL-60细胞内源性TGF-β1表达,进而研究ATRA诱导内源性TGF-β1表达下降的HL-60细胞分化的情况.结果发现,ATRA诱导HL-60细胞分化过程中,TGF-β1表达明显增高.得到4个针对不同靶位点的RNA干扰表达质粒.其中,针对起始编码区的质粒转染48h后对HL-60细胞的TGF-β1蛋白抑制率为73.2%.内源性TGF-β1表达下降后,ATRA作用的HL-60细胞NBT还原试验的光密度值降低,CD33抗原阳性的细胞比例较对照组升高,CD11b抗原阳性的细胞比例较对照组降低.表明内源性TGF-β1表达下降后,ATRA诱导HL-60细胞分化的作用有所减弱,提示内源性TGF-β1在ATRA诱导HL-60细胞分化中起一定的作用.
黄美娟吴立德陈元仲李昊张臣青张昭秀陈显凌
关键词：转化生长因子Β1SIRNA视黄酸HL-60细胞
单顺反子表达人GM-CSF和B7.1融合基因真核表达载体的构建和鉴定被引量：5
2003年
目的　构建单顺反子表达人 GM- CSF和 B7.1融合基因真核表达载体。　方法　应用巨引物 PCR技术对 h GM- CSF基因 c DNA进行定点突变 ;应用 PCR重叠延伸法 ,将 h GM- CSF和 h B7.1基因的 c DNA编码序列通过一 linker序列拼接 ,构建 h GM- CSF与 h B7.1融合基因 h GM- B7.1,将其插入 pc DNA3真核表达载体 ,测定核苷酸序列。　结果　序列分析表明 :(1) h GM- CSF突变体基因 c DNA编码序列的 178位核苷酸由 C变为 A,其余核苷酸序列均未发生变化 ;(2 ) h GM- CSF、linker、h B7.1的连接顺序、方向及序列完全正确。　结论　构建 pc DNA3- h GM- B7.
李乃农陈元仲杨旭伟吴勇黄惠芳黄美娟张昭秀吕联煌
关键词：粒细胞巨噬细胞集落刺激因子基因融合CD28
p53基因诱导白血病细胞凋亡的机制研究被引量：9
2003年
目的　探讨p5 3基因诱导白血病细胞凋亡过程中内源性TGF β1 、TNF α、端粒酶活性、Bcl 2表达的改变及其意义。方法　利用脂质体将温敏型p5 3基因 [pN5 3cG(Val135 ) ]导入p5 3基因缺失的白血病细胞系HL 6 0、K5 6 2细胞 ,经G4 18筛选 ,获得稳定表达P5 3蛋白的抗性克隆细胞HL 6 0pN5 3cG ,K5 6 2 pN5 3cG细胞。采用缺口末端标记法、片段化DNA分析、RT PCR、定量PCR、ELISA、PCR ELISA、流式细胞术等方法检测外源性p5 3基因诱导白血病细胞凋亡过程中TGF β1 、TNF α、bcl 2、端粒酶反转录酶 (hTERT)mRNA表达变化、细胞上清TGF β1 水平和端粒酶活性及TGF β1 、TNF α反义PS ODNS对白血病细胞凋亡和Bcl 2蛋白表达的影响。结果　①外源性野生型p5 3基因诱导细胞凋亡过程中内源性TGF β1 和TNF αmRNA表达上调 ,bcl 2及hTERTmRNA表达下调 ,细胞培养上清TGF β1 蛋白水平明显升高 ,端粒酶活性水平下降 ;②TGF β1 、TNF α反义PS ODNS能够明显抑制野生型p5 3基因诱导细胞凋亡的发生 ,并使细胞bcl 2mRNA及蛋白表达恢复到处理前的水平。结论　p5 3基因诱导白血病细胞凋亡可通过上调内源性TGF β1 和TNF α水平 ,下调hTERTmRNA表达及端粒酶活性 ,抑制bcl 2基因表达而发挥作用。
陈元仲吴勇梁敏李乃农张昭秀吕联煌
关键词：P53基因白血病细胞凋亡
TGF-β_1和/或TNF-α反义PS-ODNS对造血干/祖细胞体外扩增的作用被引量：4
2003年
目的 :研究TGF - β1和 /或TNF -α反义硫代寡核苷酸 (PS -ODNS)对造血干 /祖细胞体外扩增的调节作用。方法 :采用免疫磁珠分离技术从新鲜脐带血中分离CD3 4 + 细胞 ,用淋巴细胞分离液从骨髓血中分离单个核细胞 ,应用液体培养及造血祖细胞集落分析检测TGF - β1和 /或TNF -α反义PS -ODNS对CD3 4 + 细胞数及多向性造血祖细胞 (CFU -mix)、粒 -单祖细胞 (CFU -GM)、红系祖细胞 (BFU -E和CFU -E)集落数的影响。结果 :培养体系中加入TGF - β1反义PS -ODNS后CD3 4 + 细胞数、CFU -mix、CFU -GM、BFU -E和CFU -E集落数分别是对照组 (仅加细胞因子组 )的 4、2 6、2 7、1 8、2 1倍 ;加入TNF -α反义PS -ODNS后CD3 4 + 细胞数、CFU -mix、CFU -GM、BFU -E和CFU -E集落数分别是对照组的 4、2 9、2 6、1 7、1 8倍 ;同时加入TGF - β1和TNF -α反义PS -ODNS后CD3 4 + 细胞数、CFU -mix、CFU -GM、BFU -E和CFU -E集落数分别是对照组的 5 3、2 1、2 7、1 9、1 8倍。结论 :采用反义PS -ODNS阻断内源性TGF - β1和TNF -α是造血干 /祖细胞体外扩增的有效措施之一。
黄美娟陈元仲吴勇李乃农张昭秀
关键词：转化生长因子Β反义寡核苷酸类
实时荧光定量RT-PCR检测TGF-β_1mRNA表达被引量：3
2003年
张昭秀陈元仲吴立德胡建达吴勇吕联煌
关键词：实时荧光定量RT-PCR检测TGF-Β1MRNA细胞株PCR引物
实时荧光定量反转录聚合酶链反应检测bcl-2基因mRNA表达被引量：2
2002年
目的　建立实时荧光定量反转录聚合酶链反应 (reverse transcription- polymerase chain reac-tion,RT- PCR)法检测 bcl- 2基因 m RNA表达。方法　应用 T- A克隆技术构建含 bcl- 2基因的载体作为标准模板 ,采用荧光 Taq man方法及探针标记技术 ,建立实时荧光定量 RT- PCR方法 ,制备标准曲线 ,检测bcl- 2反义核酸治疗前后人类 Burkitt's淋巴瘤裸鼠模型中瘤细胞的 bcl- 2 m RNA表达水平变化 ,并与半定量 RT- PCR检测结果进行比较。结果　实时荧光定量 RT- PCR检测 bcl- 2反义核酸治疗组的瘤细胞 bcl- 2m RNA表达明显降低 ,而 bcl- 2无义核酸对照组及空白对照组的瘤细胞 bcl- 2 m RNA表达仍较高 ,且显示无义核酸对照组与空白对照组的 bcl- 2 m RNA表达水平相近。半定量 RT- PCR结果显示 bcl- 2出现类似的变化趋势。结论　所建立的实时荧光定量 RT- PCR用于检测 bcl- 2 m RNA表达 ,结果用拷贝数表示 ,比半定量 RT- PCR更灵敏。
张昭秀吕联煌兰小鹏胡建达林敏辉景全胜
关键词：实时荧光定量反转录聚合酶链反应BCL-2基因聚合酶链反应
急性白血病患者bcrp、mdr-1、mrp-1和lrp耐药基因表达的临床意义被引量：3
2008年
目的:定量检测急性白血病(AL)患者乳腺癌耐药相关蛋白基因(bcrp)、多药耐药基因(mdr-1)、多药耐药相关蛋白基因(mrp-1)及肺耐药相关蛋白基因(lrp)表达及其与临床的关系。方法:应用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应RT-PCR(real time fluorescent quantitative RT-PCR,FQ RT-PCR)检测105例AL患者bcrp、mdr-1、mrp-1、lrp等基因的拷贝数,分析其与临床预后的关系。结果:AL组bcrp基因拷贝数(2.8×103)±(8.4×103)明显高于正常对照组(7.6×102)±(2.3×103),P<0.05;mdr-1基因拷贝数(1.3×105)±(2.2×105)及lrp基因拷贝数(8.3×105)±(1.0×106)显著高于正常对照组(P<0.01)。复发组AL患者的mdr-1拷贝数(3.7×104)±(1.1×105)明显高于初治组患者(1.1×104)±(3.6×104),P<0.05。在AL耐药组mdr-1拷贝数(2.1×104)±(9.1×104)明显高于敏感组(1.0×104)±(3.8×104),P<0.05)。经直线相关分析显示mdr-1和mrp-1,mdr-1和lrp,mrp-1和lrp之间呈显著正相关,经等级相关分析显示mdr-1和lrp的表达与耐药性密切相关。结论:急性白血病多药耐药的出现与bcrp、mdr-1、mrp-1、lrp中一项或几项过度表达有关,mdr-1较其它基因更具有预测临床预后的意义。
郑静胡建达张昭秀陈鑫基吕联煌
关键词：基因表达
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