徐丽娟
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：吉林大学白求恩医学院病原生物学系更多>>
- 发文基金：吉林省卫生厅重点实验室科研课题更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人乳头瘤病毒16型E7基因原核表达载体的构建及表达
- 2011年
- 目的:构建人乳头瘤病毒16型(HPV-16)E7基因原核表达载体,观察目的基因的蛋白表达。方法:人工合成HPV16E7基因核苷酸序列,利用特异性引物通过聚合酶链反应扩增HPV16E7基因,并克隆至pGEX-4T1原核表达载体,构建重组表达载体pGEX-4T1-HPV16-E7。将其转化到工程菌Rosetta后,经IPTG诱导表达,进行E7-GST融合蛋白的SDS-PAGE分析和Ni 2+-NTA亲和层析纯化。结果:E7基因PCR扩增产物和重组表达质粒的双酶切产物经琼脂糖凝胶电泳,均可见300bp的目的基因条带。表达的重组蛋白经SDS-PAGE电泳和纯化后,在相对分子质量约36 000处有特异性表达带,与预期相符。结论:在原核系统中含E7基因的重组质粒可有效表达E7-GST融合蛋白。
- 徐丽娟温剑平史红艳孙延波
- 关键词：人乳头瘤病毒16型聚合酶链式反应原核表达载体
- EGFR外显子19、21突变等位基因特异性PCR检测方法的建立被引量：2
- 2012年
- 目的建立一种人表皮生成因子受体(EGFR)外显子19、21突变等位基因特异性聚合酶链反应(PCR)检测方法。方法根据EGFR外显子19、21野生型和突变型设计特异性引物,提取健康人和非小细胞肺癌患者血中有核细胞的基因组DNA作为模板,采用等位基因特异性聚合酶链式反应扩增EGFR外显子19、21突变基因。结果特异性引物可以扩增EGFR外显子19缺失突变的2种类型和外显子21的错义突变。结论等位基因特异性PCR法可以用于检测人EGFR外显子19、21突变。
- 温剑平张学英史红艳徐丽娟孙延波
- 关键词：EGFR突变PCR基因检测
