徐立新
- 作品数：166 被引量：203H指数：7
- 供职机构：南京农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 牛胎儿三毛滴虫的PCR检测
- 毛滴虫病是由胎儿三毛滴虫(Trichomonas foetus)寄生于牛生殖道引起的疾病,呈世界性分布,引起牛,尤其是奶牛生殖器官炎症、死胎、流产和不育．该病主要通过自然交配和人工授精的精液以及器械传播。毛滴虫病被国际兽...
- 徐立新严若峰薄新文格日勒图李祥瑞
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- 预防鸡毒害艾美耳球虫的免疫调节型DNA疫苗
- 本发明涉及一种鸡毒害艾美耳球虫免疫调节型DNA疫苗，属于生物兽药技术领域。利用分子生物学技术将毒害艾美耳子孢子表面抗原NA4基因和鸡白细胞介素－2(chIL－2)基因进行串连，构建了融合表达载体pVAX－NA4－IL－2...
- 李祥瑞严若峰徐立新宋小凯张娜
- 文献传递
- 一种鸡球虫多价重组蛋白亚单位疫苗及其应用
- 本发明涉及生物兽药技术领域，涉及一种鸡球虫多价重组蛋白亚单位疫苗。该疫苗包含4种鸡球虫的重组蛋白成分：TA4（E.tenella）、NA4（E.necatrix）、LDH（E.acervulina）和Em8（E.maxi...
- 李祥瑞严若峰徐立新宋小凯高云路
- 文献传递
- 旋毛虫胶质瘤致病相关蛋白1样蛋白2对宿主免疫功能的影响
- 2023年
- [目的]本文旨在分析旋毛虫胶质瘤致病相关蛋白1样蛋白2(GLIPR1L2)对宿主免疫功能的影响。[方法]用反转录PCR(RT-PCR)方法克隆旋毛虫GLIPR1L2基因,构建表达载体,获得重组蛋白(rGLIPR1L2),用Western blot分析rGLIPR1L2的反应原性。将大鼠外周血单核细胞(PBMC)与rGLIPR1L2共孵育,用免疫荧光检测技术(IFA)检测rGLIPR1L2与大鼠PBMC的结合,分析rGLIPR1L2对细胞增殖、迁移、NO分泌、吞噬功能和细胞凋亡的影响。大鼠腹腔注射rGLIPR1L2后,测定血清中IL-4、IL-9、IL-17、TGF-β、IFN-γ等细胞因子的变化。背部皮下多点注射对小鼠进行免疫后,ELISA检测特异性IgG、IgG1和IgG2a抗体的变化,收集旋毛虫成虫和肌肉幼虫并计数,分析rGLIPR1L2的免疫保护作用。[结果]体外试验表明,rGLIPR1L2能够促进大鼠PBMC的增殖与迁移,增强细胞NO分泌和吞噬功能,一定浓度下可提高细胞凋亡比例。体内试验显示rGLIPR1L2能促进大鼠IL-4分泌,但对细胞因子IFN-γ、IL-9、IL-17和TGF-β的分泌无显著影响。rGLIPR1L2免疫小鼠可引起其体内特异性IgG抗体水平显著升高,且可显著减少受感染小鼠的肌肉幼虫数。[结论]旋毛虫胶质瘤致病相关蛋白1样蛋白2能通过多种途径影响宿主免疫功能。
- 孙晓轲陆滢滢齐萌陈伟陆明敏徐立新宋小凯李祥瑞严若峰
- 关键词：旋毛虫
- 鸡球虫共同抗原UCE免疫原性分析及其对多种球虫感染的免疫保护效果评估被引量：5
- 2018年
- [目的]在前期研究中,筛选到了存在于多种鸡球虫间的共同抗原泛素缀合酶结构域蛋白(UCE),本研究进一步分析其免疫原性,评估其对多种球虫感染的免疫保护效果。[方法]提取纯化的堆型艾美耳球虫孢子化卵囊总RNA,用反转录PCR(RT-PCR)技术扩增堆型艾美耳球虫UCE基因(EaUCE),插入pVAX1质粒,构建真核表达质粒pVAX-EaUCE,通过RT-PCR和Western blot检测pVAX-EaUCE在鸡体内的转录和表达情况。经流式细胞术和间接ELISA法检测pVAX-EaUCE免疫后鸡体细胞免疫和体液免疫水平变化,分析其免疫原性。分别采用柔嫩艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫及三者的混合卵囊人工感染雏鸡,观察感染前、后雏鸡体质量变化和排出卵囊减少量,评估其对多种球虫感染的免疫保护效果。[结果]EaUCE基因开放阅读框为444 bp,编码148个氨基酸,BLAST分析显示,柔嫩艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫UCE氨基酸序列同源性均大于95%。pVAX-EaUCE能够在鸡体内成功转录和表达。pVAX-EaUCE免疫后,鸡体的CD_4^+/CD_3^+和CD_8^+/CD_3^+细胞比例显著升高,IFN-γ、IL-2、IL-4、TNFSF15、IL-17D、TGF-β4 mRNA和IgY抗体水平显著升高,表明免疫该质粒能诱导细胞和体液产生免疫反应(P<0.05)。pVAX-EaUCE免疫后,与对照组相比,免疫组鸡体质量显著增加,卵囊产量明显下降,肠道损伤也相应减轻。[结论]鸡球虫共同抗原UCE具有良好的免疫原性,可对多种球虫感染提供部分免疫保护力,有望成为抵抗多种球虫感染的候选抗原。
- 刘剑华刘连瑞李灵娟徐立新严若峰李祥瑞宋小凯
- 关键词：鸡球虫共同抗原免疫原性
- 一种用于早期诊断捻转血矛线虫感染的抗原及其应用
- 本发明涉及一种用于早期诊断捻转血矛线虫感染的抗原及其应用。本发明鉴定出一种可用作该寄生虫感染的诊断用抗原，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该抗原可以对感染捻转血矛线虫14天后的宿主血清中的抗体进行特异性识别，能...
- 严若峰李祥瑞徐立新宋小凯卡力比夏提.艾木拉江陆明敏
- 文献传递
- 山羊IFN-γ基因的克隆与表达
- 以山羊外周血淋巴细胞RNA为模板,通过RT-PCR方法,获得了山羊γ干扰素(IFN-γ)基因,并将该基因克隆入pMD-18-T载体。序列测定结果表明,山羊IFN-γ基因的开放阅读框为501bp,编码167个氨基酸;该基因...
- 徐立新袁橙严若峰宋小凯李祥瑞
- 关键词：山羊IFN-Γ克隆
- 文献传递
- 2种鸡柔嫩艾美耳球虫DNA疫苗的构建及在鸡体内的表达
- 利用DNA重组技术,将柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenalla)第2代裂殖子抗原基因MZ5-7的完整阅读框(ORF,945bp)克隆到真核表达质粒pcDNA4.0中,构建DNA疫苗DcDNA4.0-MZ。用同样方法...
- 格日勒图徐立新严若峰李祥瑞
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫IL-17DNA疫苗
- 文献传递
- 鸡γ-干扰素基因的克隆、序列分析及原核表达
- 应用RT-PCR方法,以ConA体外刺激培养6 h的鸡脾脏淋巴细胞(SP)总RNA为模板,成功扩增出鸡γ-干扰素cDNA基因,并克隆入pMD18-T载体,序列测定结果显示其阅读框(ORF)为492bp,与 GenBank...
- 严若峰黄欣梅徐立新李祥瑞
- 关键词：Γ-干扰素基因原核表达
- 文献传递
- 一种基于LAMP技术的旋毛虫快速检测方法及引物组合物
- 本发明公开了一种基于LAMP技术的旋毛虫快速检测方法及引物组合物。一种用于检测旋毛虫的特异性的LAMP引物组合物，由F3、B3、FIP和BIP四条引物组成，F3、B3、FIP和BIP引物序列分别如SEQ ID NO.1‐...
- 严若峰李祥瑞徐立新宋小凯黄芸
- 文献传递
