徐邦生
- 作品数：81 被引量：173H指数：7
- 供职机构：南通大学医学院组织学与胚胎学教研室更多>>
- 发文基金：江苏省教育厅自然科学基金江苏省现代教育技术研究规划课题南通市应用研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学社会学更多>>
- 周期型马来丝虫3-磷酸甘油醛脱氢酶/半胱氨酸蛋白酶抑制剂复合基因真核重组质粒的构建与表达被引量：2
- 2011年
- 目的 构建周期型马来丝虫3-磷酸甘油醛脱氰酶/半胱氨酸蛋白酶抑制剂（GAPDH/CPI）复合基因真核重组表达质粒,为研制复合多价疫苗奠定基础.方法 依据GenBank中BmGAPDH及BmCPI基因序列设计引物,以周期型马来丝虫总RNA为模板,RT-PCR扩增目的 编码基因.PCR产物经TA克降后,克隆至载体pGEM-T Easy中.取阳性重组质粒pGEM-T/BmGAPDH和pGEM-T/BmCPI以及真核重组表达载体分别双酶切,将酶切后的载体和目的 片段进行连接,构建真核重组表达质粒pcDNA3.1（＋）/BmGAPDH/BmCPI.将复合基因重组质粒瞬时转染人HeLa细胞后,进行RT-PCR验证,将表达产物用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）进行分析和鉴定.结果 分别克隆了pGEM-T/BmGAPDH和pGEM-T/BmCPI重组质粒,经酶切鉴定分别得到877、621 bp特异性片段,与预期值吻合.成功构建了复合基因重组真核表达载体pcDNA3.1（＋）/BmGAPDH/BmCPI,酶切鉴定所产生的片段大小与预期吻合.复合基因真核重组表达质粒转染HeLa细胞后得到高水平表达,SDS-PAGE分析显示重组蛋白相对分子质量（Mr）约为54×103.结论 成功构建了周期型马来丝虫GAPDH/CPI复合基因重组表达质粒,并在哺乳动物细胞内得到正确表达.
- 刘晓骏郭晓峰张赛楠陆施娟方浩徐邦生方政
- 关键词：半胱氨酸蛋白酶抑制剂HELA细胞
- 肿瘤抑制因子PTEN蛋白在成年大鼠腰段脊髓和背根节中的表达与分布被引量：4
- 2002年
- 目的 观察肿瘤抑制因子PTEN蛋白在成年大鼠腰段脊髓和背根节中的表达和分布。 方法 免疫组织化学ABC法显示大鼠脊髓和背根神经节中PTEN阳性免疫反应产物。 结果 背根节神经元及穿越背根节神经纤维轴突有阳性免疫反应产物存在 ;PTEN阳性免疫反应产物在脊髓主要位于灰质神经元。 结论 PTEN在成年大鼠腰段脊髓和背根节神经元及神经纤维轴突中表达。
- 严志强张沛云王晓冬徐邦生衣昕
- 关键词：肿瘤抑制因子腰段脊髓成年大鼠免疫组织化学ABC法背根节
- 组织学与胚胎学试卷库的使用与评价被引量：5
- 2012年
- 优质的教学质量是学校赖以生存与发展的根本保证，也是教育工作的最终目标。考试仍然是目前主要采用的教学质量检验方法[1]。近年来，针对不同专业的不同需求，按照知识性和实用性并重的原则，本教研室将组织学与胚胎学分成不同的教学模块，分别采用相应的教材、教学大纲和教学课件。同时建立和使用模块化组织学与胚胎学试卷库，试卷库共包含100套试卷，分7个组别设置：临床医学和全科医学专业定为99学时模块（含普本、本三两组）；护理和检验专业定为63学时模块（含本二、本三两组）；康复医学、临床医专和成人教育定为36学时模块（含本科、专科两组）。
- 夏平徐邦生姚健王晓冬
- 关键词：胚胎学组织学试卷教学模块全科医学专业
- BMP-6对卵巢功能和生殖能力作用的研究进展被引量：1
- 2011年
- 骨形态发生蛋白-6(BMP-6)是骨形态发生蛋白(BMPs)家族中的成员之一,而BMPs又属于转化生长因子β(TGF-β)超家族的成员。近年来发现,BMP-6在与生殖有关的多个过程中有着独特的作用。BMP-6及其受体在卵巢内的卵母细胞、颗粒细胞和膜细胞中均有分布,通过其在卵巢内的信号途径来调节类固醇激素的合成;对于不同种属的颗粒细胞和膜细胞的增殖具有不同的作用。从这两个角度讲,BMP-6对于雌性的生殖能力是有影响的。但目前关于BMP-6影响雌性生殖能力的研究具有矛盾性,仍需更广泛和更深入地研究。
- 王喜艳徐邦生高银峰刘军
- 关键词：卵泡发育生殖功能
- 马来丝虫肌球蛋白基因序列及编码产物预测被引量：1
- 2009年
- 目的克隆周期型马来丝虫肌球蛋白（BmMyosin）基因,进行序列测定、分析及编码产物的B细胞表位预测。方法依据公布的BmMyosin基因序列设计引物,以周期型马来丝虫总RNA为模板,反转录PCR（RT-PCR）扩增目的编码基因。扩增产物经初步鉴定后将其克隆入pGEM-T载体,转化大肠埃希菌（E.coli）DH5α,筛选阳性克隆,进行双酶切及PCR扩增鉴定,获得阳性重组质粒pGEM-BmMyosin,经测序验证,并进行同源性比较。应用5种参数和方法对其编码产物进行B细胞表位预测。结果RT-PCR扩增出一条约1 292 bp大小的特异性条带,重组质粒双酶切的PCR结果与预期相符,DNA序列分析与GeneBank已知的基因序列同源性为98.45%。经表位预测分析,BmMyosin的B细胞表位可能在287-300位、339-350位和416-422位氨基酸区域。结论成功构建了周期型马来丝虫肌球蛋白重组质粒pGEM-T克隆载体,对其编码产物进行B细胞表位预测。为蛋白质特性分析及免疫学研究提供基础依据。
- 谢东方方政童海燕徐邦生黄为群沈勤
- 关键词：周期型马来丝虫肌球蛋白基因克隆B细胞表位
- 周期型马来丝虫CPI基因真核表达载体的构建及DNA免疫研究
- 目的：构建周期型马来丝虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂(BmCPI)基因真核表达载体poDNA3．1-BmCPI，并观察其在小鼠体内的细胞免疫应答效应。方法：以周期型马来丝虫总RNA为模板，RT-PCR方法扩增出目的基因片段。与p...
- 方政张赛楠陆施娟童海燕方浩徐邦生
- 关键词：周期型马来丝虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂真核表达载体细胞免疫应答
- EMT模型大鼠在位和异位子宫内膜的超微结构变化
- 2004年
- 目的 :观察子宫内膜异位症 (endometriosis,EMT)模型大鼠造模早期在位和异位子宫内膜的超微结构变化 ,探讨机体对异位组织的自行清除作用。方法 :建立大鼠 EMT动物模型 ,取 2、4、6、8、10、12天模型大鼠在位和异位子宫内膜制作电镜标本 ,观察腺上皮细胞、基质细胞、巨噬细胞等固有层中细胞的形态变化。结果 :造模后在位内膜结构基本正常。 2～ 8天模型大鼠异位内膜中可观察到的凋亡腺上皮细胞 ,基质细胞渐多 ,部分细胞表现为坏死。第 8天见凋亡的巨噬细胞。 10～ 12天模型大鼠异位内膜中见腺上皮增生 ,固有层中见较多的嗜酸性粒细胞。结论 :异位内膜有被机体自行清除和异位存活两种可能性。
- 徐邦生张天一林琳黄晓春
- 关键词：超微结构
- 丙氨瑞林穴位注射对子宫内膜异位症模型大鼠的镇痛作用及对P物质表达的影响被引量：8
- 2009年
- 目的研究丙氨瑞林穴位注射对子宫内膜异位模型大鼠的镇痛作用及对P物质(SP)表达的影响。方法选取57只SD成年雌性大鼠,随机分为空白对照组(A组)、模型对照组(B组)、假手术对照组(C组)、生理盐水穴位注射组(D1组)、丙氨瑞林肌肉注射组(D2组)、丙氨瑞林穴位注射组(D3组)。建立大鼠子宫内膜异位模型,4周后用药,治疗4周后处死。分别测量用药前后痛阈的变化,免疫组化法测定SP在各组子宫及子宫内膜异位病灶标本中的表达。结果(1)B组痛阈显著低于A组和C组;D1组、D2组、D3组痛阈明显高于B组;D3组痛阈明显高于D1组和D2组,差异均有统计学意义(P<0.05或<0.01)。(2)SP主要表达于细胞浆中,呈棕黄色颗粒,分布于子宫内膜(异位和在位)上皮细胞、子宫平滑肌细胞、结缔组织、血管内皮细胞及炎性细胞中。A组、B组、C组、D1组、D2组、D3组SP表达阳性率分别为17.78%、92.22%、22.22%、57.00%、48.00%、25.00%,B组显著高于其他各组,且阳性级别最高;D3组SP表达阳性率和阳性级别低于D1组和D2组,差异均有高度统计学意义(均P<0.01)。结论小剂量丙氨瑞林穴位注射可有效抑制大鼠子宫内膜异位症引起的疼痛,其镇痛机制可能是通过抑制SP的释放,从而达到镇痛效果。丙氨瑞林穴位注射优于丙氨瑞林肌肉注射,有望成为治疗子宫内膜异位症的新方法。
- 林海英徐邦生张玉泉蔡云平夏平
- 关键词：促性腺激素释放激素激动剂穴位注射P物质
- p75神经营养素受体在新生和成年大鼠背根神经节中的不同表达
- 2002年
- 目的 :研究神经生长因子低亲和力受体 p75 NTR在新生和成年大鼠背根神经节中的表达 ,以探讨p75 NTR在背根神经节神经元中的作用。方法 :取新生和 3月龄大鼠背根神经节 ,免疫组化 ABC法观察 p75 NTR在神经元中的分布和表达。结果 :新生大鼠背根神经节中可见较多的 p75 NTR阳性反应神经元 ,免疫反应产物主要位于胞浆。成年大鼠背根神经节大多数神经元有 p75 NTR阳性免疫反应产物 ,主要位于细胞核。结论 :p75 NTR在新生和成年大鼠背根神经节神经元中表现为不同表达方式 。
- 严志强徐邦生衣昕胡亚娥
- 关键词：背根神经节
- 周期型马来丝虫3-磷酸甘油醛脱氢酶基因真核表达载体的构建及DNA免疫研究被引量：2
- 2009年
- 目的构建周期型马来丝虫3-磷酸甘油醛脱氢酶（BmGAPDH）真核表达载体pcDNA3．1-BmGAPDH，并观察其在小鼠体内的细胞免疫应答效应。方法以周期型马来丝虫总RNA为模板，RT—PCR方法扩增目的基因片段。与pGEM—TEasy克隆载体连接，筛选出阳性克隆，经PCR和双酶切鉴定后，亚克隆至真核表达质粒pcDNA3．1，构建pcDNA3．1-BmGAPDH表达载体，将纯化的pcDNA3．1-BmGAPDH和CpG经后腿胫前肌免疫BALB／c小鼠，并设PBS对照组及空质粒对照组，共免疫3次，每次免疫间隔2周。用RTPCR方法检测肌肉组织内目的基因；用噻唑蓝（MTT）法、ELISA方法分别检测免疫小鼠T淋巴细胞刺激增殖指数和血清中细胞因子IFN-γ、IL-4水平。应用SPSS统计学软件进行样本均数的t检验。结果成功构建了pcDNA3．1-BmGAPDH真核表达载体，基因片段全长为1020bp，DNA序列分析与基因库已知基因序列同源性为99％。该真核表达载体免疫小鼠后，从小鼠肌肉组织扩增出目的基因重组质粒组小鼠淋巴细胞刺激增殖指数显著高于PBS对照组及空质粒对照组，淋巴细胞刺激增殖指数分别为1．398、1．006和1．017（P〈0．05）。重组质粒组IFN-γ、IL-4细胞因子水平均高于PBS对照组及空质粒对照组，分别为163．905、58．589、51．317ng／L和107．906、27．111、34．627ng／L（P〈0．05）。免疫佐剂CpG与疫苗同时注射可增强机体的免疫应答，表现为IFN-γ水平和免疫4周后淋巴细胞刺激增殖指数显著上升。结论pcDNA3．1Bm GAPDH真核表达载体能在小鼠体内表达并可诱导相关的细胞免疫应答。
- 童海燕方政谢东方黄为群方浩徐邦生
- 关键词：甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因表达DNA
