- 抗炭疽PA15单克隆抗体的制备、鉴定及免疫学检测方法的建立
- 炭疽病(anthrax)是由炭疽芽胞杆菌(Bacillus anthracis)引起的急性人兽共患传染病,人群普遍易感。由于其高度致病性、其芽胞在恶劣环境中有较强的生存能力以及可通过气溶胶途径感染等特点,长期以来被认为是...
- 方国平
- 关键词：炭疽病炭疽芽胞杆菌保护性抗原单克隆抗体
- 文献传递
- 抗炭疽PA15单克隆抗体的制备及免疫学检测方法的建立
- 2014年
- 目的:制备抗炭疽保护性抗原15(protective antigen,PA15)单克隆抗体,初步建立双抗体夹心ELISA检测炭疽感染者血清中的保护性抗原。方法:以纯化的PA63蛋白为免疫原免疫小鼠,利用杂交瘤技术制备单克隆抗体,SDS-PAGE电泳检测抗体纯度,间接ELISA、Western blot、免疫沉淀(IP)和蛋白质谱分析单抗特异性,并建立双抗体夹心ELISA检测方法。结果:制备了2株抗PA15单克隆抗体,命名为3D7和8E9。SDS-PAGE电泳可见抗体的重链和轻链,间接ELISA、Western blot发现单抗3D7和8E9可与PA15、PA63特异性结合,IP和蛋白质谱分析发现单抗3D7可与PA83特异性结合,双抗体夹心ELISA方法检测炭疽感染血清中保护性抗原的最低检出浓度为16 ng/ml。结论:成功制备了抗PA15单克隆抗体,并建立了双抗体夹心ELISA方法检测炭疽感染血清中的保护性抗原。
- 方国平唐甜仇镇宁冯振卿朱进管晓虹
- 关键词：炭疽病炭疽芽胞杆菌保护性抗原单克隆抗体
