施广璞
- 作品数：8 被引量：18H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 过氧化氢对大鼠肝卵圆细胞内游离钙含量的影响被引量：3
- 2002年
- 目的研究小剂量(800nmol/L)过氧化氢H2O2诱导培养的大鼠肝卵圆细胞(WB细胞)胞质内游离钙犤Ca2+犦i含量的变化及其机制。方法以800nmol/LH2O2刺激WB细胞,采用Fluo-3/AM作为荧光指示剂,以激光共聚焦扫描显微镜测定不同条件下犤Ca2+犦i荧光值的改变以反映犤Ca2+犦i含量的变化。结果(1)小剂量H2O2可引起犤Ca2+犦i升高,约300s后达到高峰,800s后恢复正常,过氧化氢酶(CAT)可抑制此变化;(2)细胞在无钙外环境下,相同浓度的H2O2不引起犤Ca2+犦i变化;(3)钙拮抗剂心痛定(nifedipine)不能抑制犤Ca2+犦i荧光值的升高,而蒽-9-羧酸(A9C)则可抑制此变化。结论小剂量H2O2刺激WB细胞可诱使犤Ca2+犦i含量升高,其机制可能是H2O2引起细胞膜上非选择性阳离子通道开放使胞外Ca2+进入胞内,造成胞浆内犤Ca2+犦i含量增高。
- 施广璞杜洪震刘子文刘旭吴元德
- 关键词：过氧化氢肝卵圆细胞激光共聚焦扫描显微镜
- 过氧化氢促肝卵圆细胞株WB-F344的增殖转化作用的研究
- ＜正＞ 已知自由基、活性氧在诱变因子、辐射等多种因素致、促癌过程中发挥重要作用,许多致癌物如黄曲霉毒素和苯并芘,部分地通过其代谢过程中产生的活性氧来发挥其毒性作用.肿瘤促进剂TPA、TCDD、UV、OA等在其促癌过程中都...
- 施广璞李芸吴元德
- 文献传递
- H_2O_2对大鼠肝卵圆细胞株WB-F344细胞膜理化特性、脂质过氧化及基因组DNA的影响被引量：2
- 2001年
- 目的 研究小剂量(100 nmol/L)H_2O_2对大鼠肝卵圆细胞株WB-F344细胞膜理化特性、脂质过氧化及基因组DNA的影响。方法利用标记膜脂及膜蛋白质的荧光标记物1，6-二苯基-1，3，5-己三烯(DPH)和N-(3芘)马来酰亚胺[N-(3P)M]标记不同剂量H_2O_2作用及经H_2O_2多次作用后发生转化的WB细胞，通过测定其荧光偏振度确定膜理化特性的改变；以硫代巴比妥酸(TBA)法测定其脂质过氧化产物丙二醛（MDA）含量的变化；以及利用溴化乙锭(EB)作荧光探针，通过DNA-EB结合物荧光强度的变化确定其基因组DNA的损伤程度。结果小剂量(100 nmol/L)H2O2的一次作用可使膜蛋白运动度增加，膜脂流动性增大，MDA的含量增高；H_2O_2的多次作用使上述变化更为显著。大剂量(1 mmol/L)、中剂量(100 μmol/L)的H_2O_2作用细胞后可直接损伤基因组DNA，小剂量H2O2的一次作用虽然不能直接损伤基因组DNA，但多次作用后却可使基因组DNA受损。结论H_2O_2可诱使WB细胞膜理化特性发生改变，脂质过氧化产生及造成基因组DNA损伤，此可能与H_2O_2的致、促癌作用有关。
- 施广璞李芸霍淑敏吴元德
- 关键词：脂质过氧化DNA损伤
- 活性氧对大鼠肝卵圆细胞株WB-F344钾通道的作用被引量：1
- 2000年
- 用膜片箝技术的细胞贴附式 (cell-attached)观察O2.-对大鼠肝卵圆细胞株WB -F344K +通道活动的影响 ,结果发现 :1)在细胞处于静息状态时 ,在箝制电压为0mV ,每10mV阶跃 ,测试电压分别达±120mV范围内未记录到通道活动。此时 ,小剂量O2.- 也不能激活WB细胞的通道活动。在细胞外液中加入20mmol/LCaCl2 后通道开启 ,记录到小振幅的通道活动 ,它们的电导是9.48±0.93ps(n=4)。此时再用O2.-作用于细胞 ,通道被激活 ,通道电导增大 ,在正测试电压时为15.74±5.46ps(n=8) ,在负测试电压时为48.32±8.67ps(n=6)。通道活动具有外向整流特性。2)胞外加入4 -AP可抑制该通道的活动 ,而SNP则可增强通道的活动。
- 施广璞于德洁鲍光宏
- 关键词：膜片箝钾通道肝卵圆细胞活性氧
- 过氧化氢诱导大鼠肝卵圆细胞株WB-F344增殖转化作用及机理
- 化学因素与肝癌的发生密切相关,自由基、活性氧可能参与肝癌的发生过程。肝卵圆细胞株WB-F344是一种肝脏幼稚上皮细胞,与肝癌发生相关,具有肝癌前体细胞作用。本文研究了小剂量过氧化氢(H
- 施广璞杜洪震刘子文刘旭吴元德
- 文献传递
- 过氧化氢对细胞膜上离子通道的作用被引量：3
- 2001年
- H2 O2 对细胞膜上不同的离子通道有广泛的作用 ,而且同一种通道在不同的组织类型中对H2 O2 的反应性亦不同。在培养的lymnaea(椎螺 )神经元中 ,H2 O2 可诱导剂量依赖性的内向Ca2 +电流的降低 ,L 型Ca2 +电流的降低 ,导致通道失活。在绵羊心肌细胞的内质网H2 O2 可直接调节Ca2 +释放通道 ,使其开放概率 (P0 )增加 ,但它不影响电导。H2 O2对K+通道的作用表明 ,H2 O2 介导的KCa通道活性改变因组织类别的不同而亦有差异。H2 O2 可诱导豚鼠心肌细胞ATP 敏感K+通道的活动增加。H2 O2
- 施广璞鲍光宏
- 关键词：过氧化氢离子通道细胞膜钙离子
- 过氧化氢促肝卵圆细胞株WB-F344的增殖及转化作用被引量：5
- 2001年
- 目的 探讨过氧化氢（H_2O_2）对肝卵圆细胞株WB-F344的促增殖及转化作用。 方法 用H_2O_2直接作用于培养的WB-F344细胞，以MTT 比色试验、3H-TdR掺入液闪计数观察其对细胞的促增殖效应；经N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍（MNNG）启动的和未经MNNG启动的WB细胞用小剂量H_2O_2连续作用促其转化，以形态学观察、核型分析及甲基纤维素半固体培养进行检测。 结果 小剂量的H_2O_2一次作用具有明显的促进WB细胞增殖的效应，连续作用28 d，可促进经MNNG启动的和未经MNNG启动的WB细胞发生转化，形态上呈现典型的转化细胞的特征；核型分析显示染色体数目改变，染色体结构畸变率明显升高；在甲基纤维素半固体培养基中形成克隆。 结论 小剂量H_2O_2可诱使肝卵圆细胞增殖、转化，提示H_2O_2在肝癌发生中可能具有重要作用，抗氧化作用可能在肝癌的防治中具有一定的意义。
- 施广璞李芸王全意吴元德
- 关键词：过氧化氢增殖肝癌肿瘤发生
- H_2O_2致WB-F344细胞内活性氧的产生及机理被引量：6
- 2002年
- 以双氢罗丹明123(DHR123)作为荧光探针,采用激光共聚焦扫描显微镜研究小剂量(800 nmol/L)H2O2诱导大鼠肝卵圆细胞株WB-F344细胞内活性氧产生的动态变化过程及其机理。结果发现:(1)小剂量H2O2的一次作用可以引起胞内活性氧的产生;(2)胞内活性氧清除剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)处理2 h时后,再加入小剂量H2O2,发现胞内活性氧的产生明显减少;(3)用广谱的蛋白激酶抑制剂2-氨基嘌呤(2-AP)、Ca2+依赖性蛋白激酶(PKC)抑制剂Bisindolylmaleimide I、酪氨酸蛋白激酶(TPK)抑制剂Tyrphostin 25分别预处理15 min后,H2O2诱导的胞内活性氧的产生现象均消失;(4)细胞在无外钙环境下,小剂量H2O2诱导的胞内活性氧的产生明显减少;(5)细胞在无外钙环境下用NAC预处理后,H2O2诱导的胞内活性氧的产生现象消失。结果表明,H2O2可以通过胞内信号转导系统诱使WB细胞胞内活性氧产生,这可能与小剂量H2O2调控细胞生物学功能(如增殖、转化)相关。
- 施广璞杜洪震刘子文刘旭吴元德
- 关键词：过氧化氢信号转导
