曲自刚
- 作品数：64 被引量：41H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学文化科学更多>>
- 一种多头带绦虫抗原基因及其重组蛋白与用途
- 本发明公开一种多头带绦虫抗原基因及其重组蛋白与用途。本发明的一种多头带绦虫绵羊脑多头蚴抗原基因是氨基酸序列为SEQ№1的Tm82。本发明的多头带绦虫抗原基因Tm82可用于制备脑多头蚴的免疫疫苗。
- 李文卉付宝权曲自刚盖文燕谢志宙刘静宜
- 文献传递
- 寄生性蠕虫组织蛋白酶F研究进展被引量：1
- 2013年
- 组织蛋白酶F(cathepsin F)是半胱氨酸蛋白酶家族木瓜蛋白酶亚家族的重要成员。寄生性蠕虫组织蛋白酶F可水解半胱氨酸蛋白酶特异性底物,降解血红蛋白等宿主蛋白作为营养物质,参与虫体入侵,且具有免疫反应性,可作为寄生虫病免疫诊断、疫苗研制和抗寄生虫药物筛选的潜在靶点,对寄生虫病防治具有重要意义。本文综述了组织蛋白酶F的结构特征、作用机制及寄生性蠕虫组织蛋白酶F的研究进展。
- 曲自刚付宝权
- 关键词：酶活性免疫反应性
- 一种敲除柔嫩艾美耳球虫N-肉豆蔻酰基转移酶基因的方法
- 本发明提供了一种敲除柔嫩艾美耳球虫N‑肉豆蔻酰基转移酶基因的方法，属于微生物技术领域，包括：将柔嫩艾美耳球虫的子孢子与pCRISPR::EtNMT质粒、pEtNMT::DHFR质粒混合后进行电转化，得到敲除N‑肉豆蔻酰基...
- 蔡建平曲自刚许笑汪靖龚振兴王恒何雪阳王文青
- 文献传递
- 旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂(TsSerpin)基因的克隆及序列分析
- 2014年
- 为了分析旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂(TsSerpin)的分子特征,提取了旋毛虫标准株ISS534,河南、云南、天津、西安、哈尔滨等6个猪旋毛虫分离株基因组DNA,设计引物进行PCR扩增,克隆不同虫株TsSerpin基因组的DNA序列。将PCR产物连接到pMD18-T载体后转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆进行序列测定,利用生物信息学软件对TsSerpin基因序列进行预测分析。结果显示,TsSerpin cDNA序列含有1个由1 122个核苷酸组成的开放阅读框,编码由373个氨基酸残基组成的多肽,蛋白质分子质量的理论值为42.5ku,理论等电点为6.54。该蛋白的二级结构中,α螺旋占36.7%,β折叠占25.2%,其余38.1%为无规则卷曲。TsSerpin第14~373位氨基酸序列为Serpin结构域,具有Serpin的保守序列FVADHPFLFFI。线性B淋巴细胞抗原表位分析显示,TsSerpin中含有12个潜在的B细胞抗原表位。TsSerpin基因的开放阅读框对应的基因组序列包含3个外显子和2个内含子。不同旋毛虫分离株TsSerpin序列高度保守,一致性在99%以上。上述研究结果为进一步研究TsSerpin蛋白的生物学功能和研制新型抗旋毛虫疫苗奠定了基础。
- 盖文燕李文卉张念章曲自刚付宝权
- 关键词：旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂克隆
- 多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶基因的克隆及序列分析被引量：1
- 2011年
- 从自然感染的羊脑内采集脑多头蚴原头节,提取总RNA。根据亚洲牛带绦虫的TaHc2-D11 mRNA序列设计特异引物,采用RT-PCR技术扩增多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶(TmTPx)基因。PCR产物连接到pMD18-T载体构建重组质粒pMD-TmTPx,转化大肠埃希菌DH5α后筛选阳性克隆,经限制性酶切及测序鉴定后进行序列分析。扩增获得大小为614bp的TmTPx基因cDNA,该基因的完整开放阅读框架(ORF,591bp)编码196个氨基酸,编码蛋白的相对分子质量为Mr 21690,等电点为7.61。生物信息学分析结果表明TmTPx具有一个典型的2-Cys Prx保守功能结构域。绦虫已知TPx的分子进化分析发现,多头带绦虫与亚洲牛带绦虫的亲缘关系最近,与猪带绦虫和肥头绦虫的亲缘关系次之,与细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫的亲缘关系最远。
- 李永光李文卉盖文燕姚菊霞曲自刚贾万忠Radu Blaga付宝权
- 关键词：脑多头蚴克隆
- 一种分离艾美尔球虫小配子的方法和应用
- 本发明提供了一种分离艾美尔球虫小配子的方法和应用，涉及球虫分离和纯化技术领域。本发明首次采用基因组编辑技术将外源的荧光蛋白的基因序列与特异性基因进行融合，并将融合基因敲入艾美尔球虫基因组使其融合表达，随后根据荧光蛋白的发...
- 曲自刚
- 文献传递
- 一种基于流式细胞技术分离单个球虫卵囊的方法
- 本发明提供了一种基于流式细胞技术分离单个球虫卵囊的方法,属于生物技术领域。本发明确定了针对球虫卵囊单个分离的参数，在流式细胞仪从细胞群中高速分选出被指定的细胞，具有分选准确度高、分选速度快等优点。其分选时间较短，且分选得...
- 曲自刚付宝权黎玉琼李文卉张念章杨峰
- 胞内劳森菌0710蛋白的表达及免疫活性分析被引量：1
- 2021年
- 为了评价胞内劳森菌(Lawsonia intracellularis)鞭毛相关蛋白LI0710的免疫原性,将LI0710基因插入到pET-32a(+)原核表达载体,构建重组表达质粒pET-32a-LI0710,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导目的蛋白表达,获得重组目的蛋白(rLI0710),通过Western-blot验证rLI0710的反应原性,同时用rLI0710免疫新西兰大白兔,获得多克隆抗体,用间接ELISA和间接免疫荧光(IFA)方法验证rLI0710的免疫原性。结果显示,重组LI0710蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式表达;Western-blot揭示rLI-0710能够与LI试验感染小鼠血清反应,表明rLI0710具有反应原性;ELISA检测表明,rLI0710能诱导家兔产生高效价抗体,且IFA分析表明此抗体能与培养细胞中的LI反应,证明rLI0710具有良好的反应原性和免疫原性。本试验为基于LI0710蛋白的猪增生性回肠炎免疫学诊断方法的建立奠定了基础。
- 张昆杨顺利许笑熊铃曲自刚汪靖蔡建平
- 关键词：原核表达免疫活性
- 一种碘克沙醇密度梯度离心纯化虫卵的方法
- 本发明涉及一种碘克沙醇密度梯度离心纯化虫卵的方法，属于虫卵纯化技术领域。本发明所述方法包括以下步骤：1)将含虫卵样品进行破碎和均质；2)将匀浆与次氯酸钠水溶液混合进行消化，过筛，得到滤液；3)将滤液进行离心，得到的沉淀用...
- 曲自刚蔡建平王恒汪靖张昆
- 文献传递
- 旋毛虫组织蛋白酶F特性研究
- 旋毛虫病是一种再度肆虐的疾病,是由旋毛虫感染引起.在此研究中研究了旋毛虫组织蛋白酶F (TsCF1),将TsCF1进行克隆表达并研究其生物学特性.序列分析表明TsCF1编码366aa,在组织蛋白酶的前体中存在组织蛋白酶F...
- 曲自刚付宝权
