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曹孟德: 作品数：43 被引量：270H指数：10; 供职机构：郑州大学更多>>; 发文基金：河南省科技攻关计划河南省医学科技创新人才工程项目河南省自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学化学工程农业科学更多>>

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急性白血病患者白细胞表面分化抗原34的检测: 2000年; 目的　研究白细胞表面分化抗原 (CD) 34在急性白血病中的表达情况 ,探讨CD34与白血病的关系。方法　采用间接免疫荧光技术对 118例初诊为急性白血病患者的骨髓标本进行细胞免疫学表型分析。结果　急性淋巴细胞白血病 (ALL)、急性髓细胞性白血病 (AML)、急性杂合细胞白血病 (HAL)、急性未分化细胞白血病 (AUL)中高表达CD34抗原的病例分别为 45 .8% (2 2 / 48)、37.5 %(18/ 48)、6 0 .0 % (12 / 2 0 )和 10 0 .0 % (2 / 2 )。CD34阳性细胞 (CD34+)在各型白血病骨髓中的数量 ,以CD34+细胞数占单个核细胞百分率计 :ALL中 ,B ALL、T ALL和T/B ALL组分别为 30 .7%、11.0 %和16 .0 % ;AML中 ,M0 亚型组为 41.2 % ,M1～M5亚型组为 2 4.3% ;HAL和AUL分别为 43.0 %、35 .0 %。结论CD34与急性白血病的发生密切相关 ,不同亚型之间CD34高表达发生率和CD34+细胞数有很大差异。未分化的AUL、低分化的M0 及细胞表型紊乱的HAL的CD34+细胞数高于分化明确的白血病。; 岳保红曹孟德秦东春毛红丽黄波田; 关键词：抗原分化急性白血病免疫表型分型

香荚兰细胞悬浮培养产生香兰素条件的研究被引量：10: 1999年; 该文报道了碳源、氮源及吸附剂对香荚兰细胞悬浮培养产生香兰素的影响，结果表明，蔗糖比葡萄糖及果糖更适合作香荚兰细胞生长及产生香兰素的碳源，最佳蔗糖浓度为５％；当培养基中仅含ＫＮＯ３，则有利于细胞的生长和香兰素的形成，培养液中去掉ＫＮＯ３仅含ＮＨ４ＮＯ３时，细胞生长和香兰素形成均被抑制；培养基添加吸附剂后，香美兰细胞产生的香兰素含量明显增加，活性炭的效果优于ＸＡＤ-２，而且活性炭用量增加，香兰素的产量亦增加。; 曹孟德李家儒王君健; 关键词：香兰素

干细胞的端粒酶活性研究进展被引量：7: 2004年; 龚光明秦洁陈宗德曹孟德; 关键词：干细胞端粒酶

HLA-DRB1基因多态性与急性淋巴细胞白血病和慢性髓性白血病易感性关联的研究: 目的:为了探讨急性淋巴细胞白血病和慢性髓性白血病易感性与 HLA-DRB1基因多态性之间的关联性,试图找出急性淋巴细胞白血病和慢性髓性白血病的易感基因。方法:采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)DNA 分型技...; 曹孟德秦东春岳保红苏堤王东升苏天水燕桂香盛光耀; 文献传递

悬浮生长的人脐血细胞中Nestin及MAP_2 mRNA的表达被引量：2: 2004年; 目的 :探讨悬浮生长的人脐血细胞中神经元特有标志物的表达特性 ,进一步阐明脐血单个核细胞(MNCs)向神经细胞分化的条件和机制。方法 :取健康自然分娩产妇脐血 ,密度梯度离心法分离单个核细胞 ,以 1×1 0 6ml-1 细胞密度接种于含体积分数为 2 0 %胎牛血清的DMEM培养瓶内 ,置 37℃、体积分数为 5 %CO2 、饱和湿度的培养箱内培养 ,倒置显微镜下观察细胞形态变化。收集培养第 1d、3d、5d、7d、1 0d悬浮生长的细胞 ,用RT PCR法检测培养前后MNCs神经元特有标志物Nestin和MAP2 的mRNA的表达。结果 :培养前MNCs呈小圆形 ,Nestin、MAP2mRNA均表达阳性。培养后细胞体积增大 ,部分细胞贴壁生长 ,部分细胞呈悬浮生长。收集悬浮生长细胞 ,第 1d、3dNestinmRNA的表达升高 ,随后降低直至转阴 ,而MAP2 mRNA的表达随培养时间的延长而增强。结论 :悬浮生长的脐血细胞表达神经元特有标志物Nestin和MAP2 mRNA 。; 鄢文海刘计荣王建枝邢莹许燕韩雪飞曹孟德; 关键词：脐血细胞神经干细胞 NESTIN 微管相关蛋白-2

脐血单个核细胞在半固体培养基中向神经元样细胞的分化被引量：2: 2004年; 为观察脐血单个核细胞在甲基纤维素半固体培养基中的生长情况 ,常规方法分离脐血单个核细胞 ,接种于含 SCF、GM-CSF、G-CSF、IL-3、IL-6、EPO的甲基纤维素半固体培养基中培养。第 5 d发现有 6～ 10个细胞组成的小集簇 ,散在分布 ,细胞形态无变化。第 11d有神经元样细胞生长 ,与集簇并存。以后神经元样细胞逐渐生长 ,但集簇生长停滞 ,第 16d仍未发现集落形成。收集细胞 ,进行神经元特异烯醇化酶 (NSE)、神经丝蛋白 (NF)免疫细胞化学测定 ,显示少量神经元样细胞 NSE、NF阳性。该结果提示在半固体培养基中 ,脐血单个核细胞可向神经元样细胞分化。; 邢莹马杰杨红旗孙慧韩雪飞曹孟德鄢文海; 关键词：脐血核细胞半固体培养基神经元样细胞

细胞因子诱导人脐血间充质干细胞分化过程中细胞巢蛋白、神经丝亚单位和端粒酶逆转录酶mRNA的表达被引量：11: 2005年; 目的:观察细胞因子EGF和bFGF联合诱导人脐血间充质干细胞(MSCs)向神经细胞分化过程中细胞巢蛋白(nestin)、神经丝亚单位M(NF M)和端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的变化。方法:采集健康自然分娩产妇脐血,密度梯度离心分离单个核细胞(MNCs),PBS洗涤2次后重悬于含体积分数20%胎牛血清的DMEM/F12 中,接种于T 75培养瓶内(细胞密度为1×106ml-1),一组加入细胞因子EGF和bFGF,终浓度各为10μg/L,另一组不加细胞因子,剩余细胞用液氮冻存。培养24h倾去全部液体以除去未贴壁细胞,以后每3d全量换液1次,倒置显微镜下观察细胞形态。分别收集培养1d、4d、7d、14d贴壁细胞和冻存细胞,采用RT -PCR方法检测nestin、 NF M、hTERTmRNA的表达。结果:未培养的脐血MNCs(内含MSCs)nestin、NF M、hTERTmRNA均表达阳性。培养后nestin、hTERTmRNA表达下降,至第7d已不能检出;而NF MmRNA的表达随培养时间延长而增强。与对照组相比,细胞因子组NF MmRNA表达较高,nestin、hTERTmRNA表达的下降趋势延迟。结论:细胞因子EGF和 bFGF在联合诱导脐血MSCs分化为神经细胞的过程中,能下调hTERTmRNA的表达。; 邢莹秦洁曹孟德韩雪飞鄢文海陈宗德刘计荣许燕龚光明; 关键词：EGF 间充质干细胞端粒酶逆转录酶巢蛋白

体外诱导人骨髓间充质干细胞分化为多巴胺能神经元被引量：6: 2007年; 骨髓间充质干细胞(BMSCs)是存在于骨髓中的非造血干细胞,在体外一定条件下可向神经细胞分化。本实验通过密度梯度离心获取人骨髓中的单个核细胞,贴壁培养纯化BMSCs,并用脑源性神经营养因子(BDNF)、forskolin(FSK)和多巴胺(DA)联合对BMSCs进行诱导,电子显微镜观察诱导后细胞是否具有成熟神经元的超微结构特点;免疫细胞化学和RT-PCR检测DA能神经元分化过程中的标志物酪氨酸羟化酶(TH)的表达以及转录因子Nurr1、Ptx3、和Lmx1b的表达。结果显示:诱导2周后,电镜下可见细胞浆中有大量密集的呈扁平囊状的粗面内质网及其间的一些游离核糖体,以及神经丝。RT-PCR结果显示NSE(neuron specific enolase)、Nurr1、Ptx3、Lmx1b和TH的mRNA均有表达;免疫细胞化学表明诱导2周后TH阳性细胞的表达较诱导3d后明显提高。上述结果表明BDNF、FSK和DA可以在体外诱导人BMSCs定向分化为DA能神经元。; 邢莹柴立辉吴素霞陈中德许燕韩雪飞曹孟德鄢文海; 关键词：骨髓间充质干细胞多巴胺能神经元脑源性神经营养因子电子显微镜

银染法与产物杂交法检测端粒扩增产物比较被引量：1: 2001年; 目的 :选择简便、灵敏地检测端粒酶活性的方法。方法 :以HL 6 0细胞与慢性粒细胞白血病单个核细胞为检测对象 ,在端粒重复序列扩增技术 (telomericrepeatamplificationprotocol,TRAP)基础上 ,采用同步扩增产物杂交法和产物银染法检测其端粒酶活性。结果与结论 :产物杂交法操作简便 ,比产物银染法有更高的灵敏度 ,还可用于半定量。; 雷俊霞曹孟德张莹秦东春岳宝红陈宗德苏堤刘宏伟; 关键词：TRAP HL-60细胞慢性粒细胞白血病银染法

人脐血来源神经元样细胞的分离与鉴定被引量：8: 2005年; 目的　探讨人脐血单个核细胞 (MNCs)体外培养后的神经元特有分子表达和形态特征。　方法　密度梯度离心法分离脐血中单个核细胞 ,部分接种于培养瓶内 ,部分细胞接种在 6孔培养板内。倒置显微镜下观察培养细胞形态变化。RT PCR方法检测MNCs培养前后神经细胞标志物nestin、NF M及MAP2mRNA的表达 ,培养 14d后行免疫细胞化学鉴定。　结果　培养前脐血MNCs胞体小呈圆形 ,神经干前体细胞特异性抗体nestin阳性细胞、神经元特异性抗体MAP2和NF M阳性细胞散在分布 ,阳性率分别为 1 5 %、3 4 %和 2 5 %。培养 14d后 ,倒置显微镜下可见一些有多个粗长突起的细胞群 ,相邻细胞突起连成网状 ;免疫细胞化学检测MAP2、NF M染色阳性细胞成片状分布 ,阳性率分别为 2 7 6 %和 2 1 7%。RT PCR检测脐血单个核细胞nestin、NF M及MAP2基因表达呈阳性 ,培养 14d后上述基因表达上调。　结论　脐血细胞中可能沉寂有神经 (干 )前体细胞 ,经体外培养后能分化为具有一定形态的类神经细胞。; 鄢文海刘计荣王建枝曹孟德许燕韩雪飞邢莹; 关键词：脐血细胞神经干细胞神经细胞细胞分化

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