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朱莎莎: 作品数：13 被引量：13H指数：2; 供职机构：南京医科大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金江苏省医学重点人才培养基金更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

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邻苯二甲酸二乙基己酯对斑马鱼胚胎心脏发育的毒性被引量：4: 2013年; 目的探讨环境污染物邻苯二甲酸二乙基己酯（DEHP）对斑马鱼胚胎心脏发育的毒性及其机制。方法采用水域染毒法，将受精后4h（4hpf）的斑马鱼胚胎分别暴露于质量浓度为1、2、4、8mg／L的DEHP作为4个质量浓度组，同时设79．2mg／L甲醇对照组、60mg／L的氯化钠溶液空白对照组。通过分析72hpf的孵化率，24、48、72、96、120hpf的死亡率和畸形率等指标以及胚胎整体原位杂交的方法来评价DEHP对斑马鱼胚胎心脏发育的毒性。结果与对照组比较，随着DEHP质量浓度的增加，斑马鱼胚胎72hpf的孵化率降低，24、48、72、96、120hpf的死亡率和畸形率增加。当DEHP质量浓度达到8mg／L时，斑马鱼72hpf的孵出率由对照组的98．33％下降到62．22％，并且120hpf的死亡率达40．00％、畸形率达27．30％。整体原位杂交结果显示DEHP处理组斑马鱼胚胎心脏的位置和心管环化均出现不同程度的异常。与对照组比较，DEHP处理组胚胎在24hpf心房肌球蛋白重链（amhc）、心室肌球蛋白重链（vmhc）、心肌肌浆球蛋白轻链（cmlc2）的表达位置均发生了变化；48hpf amhc的表达量明显下降，vmhc的表达位置发生了变化，cmlc2标志的整个心脏发育异常，未能完成心脏环化过程，仅形成1条心管。结论DEHP能影响斑马鱼胚胎发育，导致斑马鱼胚胎和幼鱼的畸形与死亡，而它的心脏毒性可能发生在心管的环化过程中。; 李萌萌余章斌韩树萍胡晓山朱金改朱莎莎朱春郭锡熔; 关键词：斑马鱼邻苯二甲酸二乙基己酯心脏发育胚胎毒性

shRNA沉默芳香烃受体表达对心肌细胞分化过程中WNT信号通路的影响: 2013年; 目的观察芳香烃受体(AHR)基因沉默后对P19细胞向心肌分化进程中WNT信号通路的影响。方法根据小鼠AHR基因序列设计并构建AHR基因的shRNA真核表达载体,将AHR干扰质粒转染至P19细胞,通过G418筛选出稳定的AHR基因沉默表达的阳性细胞株,应用实时荧光定量RT-PCR技术检测P19细胞分化过程中WNT信号通路中关键基因GSK3β、β-catenin mRNA的表达水平。结果构建的AHR-shRNA表达质粒能显著抑制AHR基因的表达;随着P19细胞向心肌细胞分化,实验组β-catenin基因的相对表达量低于对照组,而GSK3β基因的相对表达量则高于对照组,差异均有统计学意义(P均<0.01)。结论干扰AHR基因表达对心脏发育过程中WNT信号通路产生调节作用。; 范志刚朱春余章斌胡晓山李萌萌朱金改朱莎莎韩树萍; 关键词：芳香烃受体心肌细胞分化 WNT信号通路

miR-20b慢病毒表达载体的构建及表达: 2014年; 目的构建鼠miR-20b慢病毒表达载体,检测其在P19细胞中的过表达效果。方法设计并合成含有miR-20b成熟序列的编码短发卡状RNA(shRNA)的双链DNA。将shRNA克隆入慢病毒载体,与Pcgvp、Rev和Vsvg包装质粒共转染HEK-293T细胞包装病毒,收取病毒上清液,纯化后感染P19细胞。荧光倒置显微镜下观察感染效率,实时定量PCR检测慢病毒感染后miR-20b的相对表达量。结果经双酶切分析及测序验证,成功构建了miR-20b的过表达载体。慢病毒感染P19细胞的效率可达到70%以上,miR-20b表达水平明显升高。结论成功构建了鼠miR-20b的慢病毒表达载体,包被的病毒可以在P19细胞中实现过表达效果。; 朱莎莎朱春余章斌韩树萍朱金改彭宇竹; 关键词：慢病毒 P19细胞

miR-20b过表达对P19细胞增殖和细胞分化的影响: 朱莎莎刘雪华余章斌朱春李萌萌韩树萍胡晓山朱金改彭宇竹

孕期母血清miRNA-19b诊断胎儿先天性心脏病的初步评价被引量：1: 2015年; 目的探讨孕期母血清miRNA在胎儿先天性心脏病（CHD）诊断中的临床价值。方法选取2009年7月-12月27例我院孕中期CHD胎儿孕妇为研究对象，同时收集27例与病例组在孕妇年龄、胎儿孕周基本匹配的胎儿无畸形的孕妇作为对照组，采用Real—timePCR检测miRNA-19b的表达水平，采用ROC曲线下面积（are aunder the curve，AUC），对miRNA-19b诊断CHD胎儿的准确性进行初步评价。结果通过检测孕期母血清miRNA-19b的表达水平，结果表明胎儿CHD病例组孕妇血清miRNA-19b水平显著高于对照组（P〈0．01），对miRNA-19b预测胎儿CHD的准确性进行分析，结果表明AUC分别为0．79。结论孕期母血清miRNA-19b可以预测胎儿CHD的发生风险，作为胎儿CHD的诊断标志物。; 沙莉朱莎莎余章斌韩树萍; 关键词：诊断标志物

miR-20b对P19细胞增殖、分化、凋亡、BMP信号通路及线粒体功能的影响: 心脏是胚胎发育最早形成并发挥功能的重要器官,心脏形成发育需要各种复杂而精密的遗传调控程序在时间和空间上相互协调,并涉及众多相关基因的顺序表达及多条信号通路(如BMP信号通路、Wnt信号通路、FGF信号通路、Notch信号...; 朱莎莎; 关键词：过表达 P19细胞心脏发育线粒体; 文献传递

miR-19b沉默对P19细胞分化及线粒体功能的影响被引量：2: 2015年; 目的:通过沉默微小RNA-19b(miR-19b)研究miR-19b对P19细胞分化及线粒体功能的影响。方法:转染miR-19b沉默质粒与空载质粒进入P19细胞建立起稳定的细胞系;线粒体功能分析用以检测细胞凋亡;诱导分化P19细胞,实时定量荧光PCR检测miR-19b沉默后细胞分化关键基因表达水平。结果:Target Scan 5.1软件及双荧光素酶报告基因系统共同证实,Wnt1为miR-19b在P19细胞中发挥作用的靶点(P<0.05);测定第0、4、6、8、10、12天c Tn T、NKX2.5、GATA4等基因的核酸表达量显示,心肌分化相关标志基因逐渐增高,miR-19b沉默组明显低于对照组(P<0.05);于分化第10天检测线粒体功能,发现miR-19b沉默组线粒体DNA拷贝数的相对含量高于对照组,其活性氧水平显著低于对照组,ATP水平也高于对照组(均P<0.05)。结论:miR-19b沉默可抑制细胞凋亡,抑制心肌细胞分化。; 刘雪华朱莎莎余章斌朱春李萌萌韩树萍胡晓山朱金改彭宇竹; 关键词：P19细胞线粒体分化

邻苯二甲酸二乙基己酯[Di(2-ethylhexyl)-phthalate,DEHP]对斑马鱼胚胎心脏发育的毒性影响: 目的:探讨环境污染物邻苯二甲酸二乙基己酯(DEHP)对斑马鱼胚胎心脏发育的毒性影响及机制.方法:采用水域染毒法,将受精后4h(hours post fertilization,hpf)内的斑马鱼胚胎分别暴露于浓度为1mg...; 韩树萍李萌萌胡晓山余章斌朱金改朱莎莎朱春郭锡熔

miR-19b过表达对斑马鱼胚胎心脏发育的影响: 目的通过显微注射miR-19b模拟物(mimic)实现miR-19b过表达,探讨miR-19b过表达对斑马鱼胚胎心脏发育的影响及其机制,为先天性心脏病在妊娠期的早期防治提供新的理论依据和潜在的干预靶标。方法根据斑马鱼...; 余章斌李萌萌韩树萍朱莎莎朱春胡晓山; 文献传递

MicroRNA-19b过表达通过Wnt／β-catenin通路对P19细胞的影响被引量：4: 2014年; 目的MicroRNA（miR）-19b是通过芯片筛选出与心脏发育高度相关的-种miRNA，本研究旨在研究miR-19b通过Wnt／β-catenin信号通路对P19细胞的影响。方法生物信息学软件预测miR-19b潜在靶基因；双荧光素酶报告基因验证miR-19b是否作用于Wnt的预测靶点；脂质体2000转染miR-19b过表达质粒与空载质粒进入P19细胞；CCK-8法检测细胞增殖活性；磷脂酰丝氨酸外翻分析检测细胞凋亡；Westernblot检测Wntl表达水平；实时定量-聚合酶链反应（PCR）检测miRNA-19b表达水平。结果TargetScan5．1软件预测Wntl为miR-19b在P19细胞中发挥作用的潜在靶点，双荧光素酶报告基因进行了验证，miR-19b过表达显著降低了靶基因Wnt的活性（P〈0．05）；miR-19b过表达降低了wnt信号通路中Wntl和B—catenin的表达水平，两者水平表达一致，于第2天至第10天均有统计学差异（P均〈0．05）。与空载对照组相比，miRNA-19b可促进P19细胞的增殖（各时间点P〈0．05），并且抑制其凋亡（P〈0．05）。结论miR-19b可能通过Wnt／β-catenin信号通路促进P19细胞的增殖，抑制凋亡，为其以后用于心脏发育的进一步研究奠定基础。; 刘雪华秦大妮朱莎莎李萌萌余章斌韩树萍胡晓山朱金改朱春彭宇竹; 关键词：MICRORNA P19细胞 WNT通路

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