朴冬花
- 作品数：8 被引量：16H指数：3
- 供职机构：东北农业大学农学院更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金中国科学院知识创新工程重要方向项目黑龙江省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学化学工程更多>>
- 二化螟β1微管蛋白基因cDNA序列的克隆与序列分析被引量：8
- 2008年
- 微管是真核生物体内分布最为广泛的一类蛋白,是由α-和β-两种不同的微管蛋白组成的异源二聚体。微管参与许多细胞功能,如细胞形态发生、细胞生长和分裂等。以二化螟3龄幼虫为材料提取总RNA,利用RT-PCR和cDNA末端快速扩增技术(RACE),扩增得到该虫的β微管蛋白基因的cDNA序列一条。cDNA序列含1 862个碱基,开放读码框1 344个碱基,编码氨基酸447个,分子量约为50.2kD,等电点4.82。氨基酸序列中1～4个氨基酸MREI为β微管蛋白转录后调控信号,是微管蛋白特异片段;氨基酸序列的140～146GGGTGSG位存在一个微管蛋白标志信号片段。序列比对表明,克隆的β微管蛋白基因与其他昆虫的β微管蛋白基因在核苷酸和氨基酸水平上都是高度同源的,与家蚕Bombyx mori β1微管蛋白的氨基酸序列同源性达到99.1%,与烟草天蛾β1微管蛋白的氨基酸序列同源性达到98.7%,与果蝇Drosophila melanogaster β1微管蛋白的氨基酸序列同源性达到96.9%。该基因cDNA序列已经登录Genbank并获得登录号为EU429675。
- 樊东秦松柏朴冬花许艳丽
- 关键词：二化螟克隆
- 小地老虎几丁质代谢酶基因的克隆及分子特性研究
- 目前已分离出一些昆虫几丁质酶，并且已将昆虫几丁质酶基因导入到植物中以增强植物的抗虫性，及将几丁质酶嵌入到昆虫病原体内，增强昆虫病原体对害虫的为害。本文从小地老虎体内分离和表达了几丁质代谢相关酶基因，详细了解其分子特性对研...
- 朴冬花
- 关键词：地下害虫小地老虎几丁质酶
- 文献传递
- 小地老虎2种不同类型肌动蛋白基因的克隆与序列分析
- 2008年
- 本研究以鳞翅目夜蛾科昆虫小地老虎[Agrotis ipsilon(Hfnagel)]3龄幼虫整个虫体为材料提取总RNA,利用RT-PCR和cDNA末端快速扩增技术(RACE),分别扩增得到2条肌动蛋白的cDNA序列Aiactin1和Aiactin2。GenBank数据库搜索及序列比对结果表明,克隆的2条肌动蛋白基因应属于2种不同类型的肌动蛋白,Aiactin1为肌肉特异型肌动蛋白,Aiactin2为细胞质特异型肌动蛋白。Aiactin1的cDNA序列含有1469个碱基,Aiactin2的cDNA序列含有1408个碱基。2条基因的cDNA序列均包括一个1131个碱基的开放阅读框,编码一个含376个氨基酸的蛋白。Aiactin1肌动蛋白分子量约为41.77ku,等电点5.22;Aiactin2肌动蛋白分子量约为41.83ku,等电点5.47。Prosite软件分析结果表明,Aiactin1和Aiactin2肌动蛋白氨基酸序列中都存在3个肌动蛋白特征片段。2个基因的cDNA序列已经登录GenBank并获得登录号。
- 朴冬花姚磊贺玉年樊东
- 关键词：小地老虎肌动蛋白克隆
- 甘蓝夜蛾几丁质合成酶基因片段的克隆与序列分析被引量：3
- 2008年
- 以甘蓝夜蛾(Mamestra brassicae(L.))4龄取食期幼虫为材料提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增得到部分几丁质合成酶基因的cDNA片段,该基因片段包括2295bp,编码一个含765个氨基酸残基的蛋白,分子量约为87.6ku。在765个氨基酸组成的片段中存在9个跨膜螺旋,几丁质合成酶的催化区在该序列的401～765位。序列比对表明,克隆得到昆虫几丁质合成酶基因是比较保守的,与埃及伊蚊、四斑按蚊、冈比亚按蚊、铜绿蝇、黑腹果蝇、赤拟谷盗、小菜蛾、烟草天蛾、甜菜夜蛾等其他昆虫几丁质合成酶基因相应的cDNA序列同源性为65.4%～87.8%,相应氨基酸的序列同源性达到68.0%￣96.5%。该cDNA序列已经登录GenBank并获得登录号为EU160598。
- 朴冬花樊东
- 关键词：甘蓝夜蛾几丁质合成酶克隆
- 甘蓝夜蛾和八字地老虎肌动蛋白基因的克隆与序列分析
- 2008年
- 肌动蛋白是细胞骨架微丝的主要组成成分,在肌肉收缩、细胞骨架形成、细胞移动等方面起重要作用。以鳞翅目夜蛾科昆虫甘蓝夜蛾Mamestra brassicae L.和八字地老虎Agrotis c-nigrum 3龄幼虫整个虫体为材料提取总RNA,利用RT-PCR和cDNA末端快速扩增技术(RACE),分别扩增得到2种昆虫的肌动蛋白的cDNA序列,甘蓝夜蛾肌动蛋白的cDNA序列含有1441个碱基,而八字地老虎肌动蛋白的cDNA序列含有1411个碱基。2种昆虫的该基因的cDNA序列均包括1个1131个碱基的开放阅读框,编码1个含376个氨基酸的蛋白。甘蓝夜蛾肌动蛋白分子量约为41.8kDa;八字地老虎肌动蛋白分子量约为41.9kDa。Prosite软件分析结果表明,甘蓝夜蛾和八字地老虎肌动蛋白氨基酸序列中存在3个肌动蛋白特征片段。GenBank数据库搜索及序列比对结果表明,甘蓝夜蛾肌动蛋白属于肌肉特异型肌动蛋白,八字地老虎肌动蛋白属于细胞质特异型肌动蛋白。2个基因的cDNA序列已经登录GenBank并获得登录号,甘蓝夜蛾肌动蛋白cDNA序列登录号为EU035314,八字地老虎肌动蛋白cDNA序列登录号为EU035315。利用RT-PCR技术在八字地老虎4龄、5龄、6龄幼虫、蛹期4个不同发育阶段和6龄期的肠道、体壁、脂肪体3种不同组织中都检测到了肌动蛋白基因在mRNA水平的表达。
- 朴冬花贺玉年樊东
- 关键词：克隆肌动蛋白甘蓝夜蛾八字地老虎
- 小地老虎几丁质酶基因的克隆与序列分析(英文)
- 2008年
- 利用昆虫几丁质酶对几丁质的调控作用破坏几丁质新陈代谢的平衡来防治害虫,在生物防治策略中具有很大的发展潜力。从处于预蛹期的小地老虎Agrotls ipsilon(Hufnagel)体中肠内提取总的RNA,经反转录,利用cDNA末端快速扩增技术(RACE)获得了几丁质酶基因的cDNA序列。该基因序列已经登录GenBank并获得登录号为EU035316。该序列长度为2823个碱基,含有一个1674个碱基的开放读码框。开放读码框编码558个氨基酸残基,预测的分子量为62.5kDa,等电点5.12。推导得到的氨基酸序列含有2个N-位糖基化位点,20个O-位糖基化位点,含有2个几丁质酶所具有的保守序列:N-端的催化区和C-端的几丁质结合区。氨基酸序列与其他昆虫,特别是鳞翅目昆虫的几丁质酶高度同源。
- 朴冬花姚磊王玲樊东
- 关键词：小地老虎几丁质酶克隆
- 黏虫体内两种微管蛋白基因cDNA序列的克隆与序列分析被引量：3
- 2008年
- 以黏虫4龄幼虫为材料提取总RNA，利用RT-PCR和cDNA末端快速扩增技术（RACE），分别扩增得到该虫的α和β微管蛋白基因的cDNA序列各1条。其中α微管蛋白基因的cDNA序列1443个碱基，包括一个1353个碱基的开放阅读框，编码一个含450个氨基酸的蛋白，分子量约为50．0ku。氨基酸的142～148位存在一个微管蛋白标志信号片段GGGTGSG，在氨基酸序列的C-端有一个酪氨酸残基，N-端存在一个对转录后调控非常重要的保守区MRECI序列，以上特点与其他昆虫α微管蛋白氨基酸序列相同。黏虫口微管蛋白基因eDNA序列含1906个碱基，开放读码框1344个碱基，编码氨基酸447个，分子量约为50．2ku，等电点4．75。1～4个氨基酸MREI为β微管蛋白转录后调控信号，140～146GGGTGSG位同样存在一个微管蛋白标志信号片段。序列比对表明，克隆的α和β微管蛋白基因与其他昆虫的α和β微营蛋白基因在核苷酸和氨基酸水平上都是高度同源的，黏虫与家蚕（Bombyx mori）α微营蛋白的氨基酸序列同源性达到99．3％，与其他3种夜蛾科昆虫α微管蛋白的氨基酸序列同源性更是达到100％。黏虫与家蚕β微管蛋白的氨基酸序列同源性达到98．7％，与烟草天蛾β微管蛋白的氨基酸序列同源性达到99．6％。两个基因的cDNA序列已经登录GenBank并获得登录号分别为EU100016和EU234504。
- 樊东秦松柏朴冬花许艳丽
- 关键词：黏虫克隆
- 三种鳞翅目夜蛾科昆虫α-微管蛋白基因的克隆与mRNA表达水平被引量：5
- 2008年
- 根据昆虫微管蛋白的分子特征筛选对昆虫微管有效的抑制剂来控制昆虫的生长发育或不同器官的有效功能的表达来达到控制害虫的目的，在未来的害虫综合治理中具有广泛的应用前景。以预蛹期甜菜夜蛾Spodoptera exigua、小地老虎Agrotis ypsilon和八字地老虎Agrotis c-nigrum为材料提取总RNA，利用RT-PCR和cDNA末端快速扩增技术（RACE），分别扩增得到以上3种夜蛾科昆虫的α-微管蛋白基因的cDNA序列，3种昆虫的该基因序列均包括1个1353个碱基的开放阅读框。这3个cDNA序列均编码1个含450个氨基酸的蛋白，分子量约为50kDa。氨基酸的142～148位存在1个微管蛋白信号片段GGGTGSG，在氨基酸序列的C-端都有1个酪氨酸残基，N-端存在1个对转录后调控非常重要的保守区MRECI序列，以上特点与其他昆虫α-微管蛋白氨基酸序列保守区序列相同。序列比对表明，克隆得到的α-微管蛋白基因的核苷酸序列是高度保守的，同源性为94．4％～97．0％，而氨基酸的序列同源性达到100％。利用RT—PCR技术在3种昆虫4龄、5龄、6龄幼虫、蛹期4个不同发育阶段和6龄期的肠道、体壁、脂肪体3种不同组织中都检测到了α-微管蛋白基因在mRNA水平的表达。
- 樊东秦松柏朴冬花许艳丽
- 关键词：夜蛾科昆虫Α-微管蛋白
