李华钟
- 作品数：110 被引量：586H指数：14
- 供职机构：江南大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程医药卫生更多>>
- 构建具有酪氨酸酚解酶活性的重组大肠杆菌生物合成左旋多巴
- 左旋多巴是治疗帕金森综合症的主要药物。由酪氨酸酚解酶催化丙酮酸、氨和邻苯二酚合成左旋多巴是最具工业化潜力的路线之一。本文以弗氏柠檬酸菌(Citrobacter freundii)的染色体DNA为模板,利用PCR技术从中扩...
- 李华钟李寅孙伟陈坚
- 文献传递
- 免疫法筛选酵母HSA-IL-11融合蛋白转化子被引量：1
- 2011年
- 报道了一种筛选高表达融合蛋白HSA-IL-11的毕赤酵母转化子的免疫双膜筛选法。将生长在醋酸纤维素滤膜上的转化子进行原位诱导,再用硝酸纤维素滤膜对表达的蛋白进行原位捕捉,并经封闭过夜后使用抗HSA抗体进行免疫杂交,再用标记二抗进行显色。根据显色强弱将转化子分为强阳性、中等和阴性三类,再用抗IL-11抗体进行复筛验证。结果显示,抗HSA抗体所筛得的200株强阳性转化子中190株在抗IL-11抗体杂交验证中呈现强阳性反应,而无一株呈现阴性反应。这表明,利用免疫学方法筛选人白介素11-人血清白蛋白融合蛋白高表达菌株时,可以只使用抗HSA抗体进行一步筛选。挑选各种转化子进行摇瓶复筛和SDS-PAGE分析,结果显示,转化子融合蛋白表达量与免疫学显色反应之间呈现高度相关性,这表明利用所建立的免疫学方法筛选融合蛋白高表达转化子是可行的。
- 吴琼王亚苏婷段作营金坚李华钟
- 关键词：融合蛋白免疫学筛选
- 人血清白蛋白在乳酸克鲁维酵母中的表达被引量：1
- 2012年
- 以乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis,K.lactis)GG799为宿主对人血清白蛋白(HSA)进行分泌表达。以pPIC9k-HSA为模板,采用带有XhoⅠ和NotⅠ酶切位点的引物PCR扩增获得HSA基因,经XhoⅠ和NotⅠ双酶切后插入pKLAC1,构建表达载体pKLAC1-HSA。经SalⅡ线性化后,电击转化K.lactis GG799,用含5 mmol/L乙酰胺的YCB平板筛选阳性转化子。提取基因组DNA,采用PCR方法对转化子鉴定后进行摇瓶发酵。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及Western blot分析发酵上清液中的表达产物,并初步分析酵母基础N源(YNB)对HSA在K.lactis GG799中表达的影响。结果表明,HSA成功在K.lactis GG799中分泌表达,表达量为81μg/mL,遗传稳定性好。
- 付莉莉关波雷楗勇段作营陈蕴金坚李华钟
- 关键词：人血清白蛋白乳酸克鲁维酵母分泌表达
- 微生物遗传育种学教学策略创新
- 2021年
- 为进一步提高微生物遗传育种学课程教学质量,激发学生的专业兴趣,文章从模块化教学方法、创新教学模式、多元化授课形式等方面探讨了该课程教学改革的必要性,阐述了对微生物遗传育种学课程融入思想政治教育的思考,讨论了如何为国家与社会培养出综合素质全面和具有创新能力以及国际化视野的综合型人才,为相关本科专业的教学改革实践与应用提供借鉴。
- 张显饶志明徐美娟杨套伟李华钟段作营陈献忠
- 关键词：教学改革发酵工程
- 重组极耐热木聚糖酶和重组极耐热漆酶协同漂白麦草浆
- 2014年
- 利用来自海栖热袍茵的重组极耐热木聚糖酶XynB和来自嗜热栖热菌Thermus thermophilus HB27的重组极耐热漆酶Tth-laccase对麦草浆进行协同漂白。结果表明,当未漂浆经XL漂序处理(X:重组木聚糖酶用量20 U/g绝干浆,pH 5.8,温度90℃,浆浓8%,处理时间2 h;L:重组漆酶用量3 U/g绝干浆,pH 4.5,温度90℃,浆浓8%,处理时间1.5 h),可获得最佳漂白效果。与对照浆比较,XL处理使浆料白度提升11.5%ISO,卡伯值降低6.9。双酶协同处理在改善浆料可漂性的同时,对纸浆纤维强度无负面影响。在后续过氧化氢漂白段中,当漂终白度相近时,XL预处理浆可节省约50%H_2O_2消耗量。
- 郑志强李华钟邵蔚蓝
- 关键词：木聚糖酶漆酶麦草浆海栖热袍菌嗜热栖热菌
- PVA-卡拉胶混合载体固定化大肠杆菌-酵母菌混合体系生产谷胱甘肽被引量：31
- 2000年
- 提出了PVA -卡拉胶混合载体固定化微生物细胞的技术 ,确定了较好的制备工艺 ,并用该载体对大肠杆菌 -酵母菌混合体系进行了固定化研究。结果表明 :在PVA浓度 1 0 % ,卡拉胶浓度 0 .5 % ,成型剂的pH值 6.4,菌体量 0 .5 g/g固定化细胞 ,固化时间 3 6h的条件下 。
- 童群义陈坚堵国成李华钟
- 关键词：PVA卡拉胶固定化大肠杆菌酵母菌谷胱甘肽
- 双孢菇深层发酵培养基的响应面优化被引量：4
- 2013年
- 研究了碳源、氮源、无机盐对双孢菇胞外多糖产量的影响。在单因素实验的基础上,采用响应面实验设计对双孢菇(Agaricus bisporus)深层发酵生产胞外多糖的培养基进行了优化,并建立了葡萄糖、KH2PO4、蛋白胨变化的二次回归方程,探讨了各因子对胞外多糖产量的影响。最终确定适宜的培养基条件为葡萄糖35.7g/L,KH2PO42.1g/L,蛋白胨3.1g/L;在此条件下可得到胞外多糖的最大产量,预测值为1.86g/L,对实验结果进行验证,得到胞外多糖的产量为1.87g/L。
- 毛勇毛健李华钟孟祥勇
- 关键词：双孢菇深层发酵胞外多糖
- 面包酵母和耐高温酵母在谷胱甘肽合成过程中作为ATP再生菌株的比较被引量：2
- 2000年
- 分别考察了面包酵母、耐高温酵母合成ATP的最适条件和重组大肠杆菌合成谷胱甘肽的最适条件 ,比较了面包酵母和耐高温酵母作为ATP再生菌株对谷胱甘肽合成的影响 .结果表明 :由耐高温酵母构建的ATP再生 谷胱甘肽合成耦合体系 ,与用面包酵母构建的耦合体系相比 ,其谷胱甘肽产量提高 4 3.6%以上 ;与直接添加ATP相比 ,其谷胱甘肽产量提高 14.5%以上 .
- 童群义陈坚堵国成李华钟
- 关键词：面包酵母耐高温酵母谷胱甘肽
- 啤酒厂无菌压缩空气细菌含量的定量检测被引量：1
- 1999年
- ０前言本检测方法的原理是将一定体积的无菌压缩空气经特殊的空气分布器以极小的气泡通过无菌生理盐水，使压缩空气中的微生物被无菌生理盐水吸收。然后用无菌过滤器过滤吸收有微生物的生理盐水，将微生物富集于滤膜上。将该滤膜放于无菌培养皿中，加入营养琼脂培养基进行...
- 李华钟葛风清顾国贤王贵忠
- 关键词：啤酒厂无菌空气细菌检测
- 聚γ-谷氨酸高产突变株的选育及摇瓶发酵条件被引量：23
- 2004年
- 对地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)进行亚硝基胍和60Co诱变,获得一株γ PGA的高产菌株C9.γ PGA质量浓度由9.44g/L提高到19.76g/L,提高了109%.突变株传代10次,质量浓度保持基本稳定.通过正交试验和单因素试验对发酵培养基及发酵条件进行了优化.当发酵培养基中含柠檬酸12g/L、甘油80g/L、L 谷氨酸23g/L、氯化铵7g/L,pH7.0,装液量为50mL/250mL三角瓶,接种体积分数为5%时,37℃摇瓶发酵72h,γ PGA达到23.32g/L.
- 徐艳萍王树英李华钟陈坚
- 关键词：聚Γ-谷氨酸诱变地衣芽孢杆菌摇瓶发酵
