李国勋
- 作品数：100 被引量：546H指数：13
- 供职机构：青岛农业大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金河北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 营养和湿度对华北大黑鳃金龟生长发育和生殖的影响被引量：13
- 2009年
- 以华北大黑鳃金龟为对象,研究了营养和湿度对其发育和生殖的影响。在室内条件下,以不同饲料饲养成虫,取食榆树叶的华北大黑鳃金龟产卵量最高,为107.1粒/头,其次是毛白杨叶,而取食玉米叶和刺槐叶的产卵量最低。在马铃薯块、甘薯块和花生米三种饲料中幼虫最嗜取食马铃薯块,且存活率最高,幼虫重量显著高于取食甘薯块和花生米的幼虫重量。土壤湿度对卵发育影响较大,土壤湿度为18%时,卵的孵化率最高为75.6%,过干过湿都不利于卵的孵化。以含有15.7 mg/cm^2水的滤纸在暗处培育卵,孵化率可达77.7%,这种卵的孵育方法操作简便,减少了土壤中病原微生物和土壤颗粒对卵的侵染及损伤。土壤湿度为15%-18%时最有利于幼虫的生长发育,高于或低于这一湿度,幼虫的死亡率均增加。饲养中发现,幼虫在低龄阶段死亡率最高,尤其在初孵幼虫生长发育的前30 d内,这可能与低龄幼虫体壁较薄,抵抗过干过湿以及物理损伤的能力较差有关。
- 周洪旭谭秀梅李长友郑桂玲李国勋
- 关键词：华北大黑鳃金龟营养生长发育生殖
- 甘蓝夜蛾核型多角体病毒连续传代的研究被引量：3
- 1998年
- 对甘蓝夜蛾核型多角体病毒（ ＭｂＮＰＶ） 在同源寄主细胞系ＮＥＡＵＭｂ９３１１０４（ Ｍｂ９３１１０４） 中的生长特性进行了研究。结果表明，无包涵体游离病毒（ ＭｂＮＰＶ＿ＮＯＶ） 在接种后１４ ｈ 达到吸收高峰，病毒滴度降到最低值５－７９ ×１０２ＴＣＩＤ５０／ｍ Ｌ，接种病毒９６ ｈ，病毒滴度达到最高值２－１３ ×１０５ＴＣＩＤ５０／ｍＬ，在ＮＯＶ（ｎｏｎｏｃｃｌｕｄｅｄ ｖｉｒｕｓ） 连续传递２０ 代的过程中，ＭｂＮＰＶ＿ＮＯＶ 毒力随传递代数的增加而减低，并且多角体的毒力也发生了显著的变化，前几代能使甘蓝夜蛾幼虫死亡率在９０ ％ 以上，传递到１５ 代以后产生的多角体对甘蓝夜蛾的幼虫几乎没有毒力。
- 席景会潘洪玉李国勋
- 关键词：甘蓝夜蛾核型多角体病毒连续传代细胞系
- 条件培养基对昆虫细胞BTI-Tn5B1-4及克隆株特性的影响被引量：2
- 2010年
- 研究了条件培养基对细胞BTI-Tn5B1-4及其克隆株特性的影响。用含20%条件培养基以2×105cells/ml浓度测定细胞生长曲线,并与新鲜培养基作比较。结果显示,含条件培养基的细胞培养中的最大浓度比对照培养基的浓度高,同时细胞群体倍增时间比对照培养基中缩短3～5小时。当用野生型病毒AcMNPV感染时,两种培养基中细胞敏感性均在93%以上,OB产量差异不显著。重组蛋白半乳糖苷酶和碱性磷酸酶表达量测定比较,结果显示条件培养基中两种重组蛋白表达量均比对照培养基中高大约10%。
- 崔英伟李长友李国勋
- 关键词：条件培养基昆虫细胞
- 甜菜夜蛾羧酸酯酶基因cDNA的克隆、表达及序列分析被引量：7
- 2008年
- 羧酸酯酶是昆虫体内重要的解毒酶系之一,与昆虫抗药性产生相关。利用粉纹夜蛾Trichoplusia ni(Hübner)肠粘蛋白多克隆抗体免疫筛选甜菜夜蛾Spodoptera exigua(Hübner)中肠cDNA表达文库,得到编码羧酸酯酶的全长cDNA克隆。该cDNA克隆全长1812bp(GenBank登录号EF580101),开放阅读框长1605bp,编码535个氨基酸。该蛋白活性中心包括3个氨基酸残基(催化三联体):Ser186,Glu319和His443,3个N-联糖基化位点,具备羧酸酯酶的结构特征,属羧酸酯酶家族(EC:3.1.1.-)。将该基因与pQE30载体重组,经IPTG诱导,spot-blot鉴定,蛋白获得了表达;以α-醋酸萘酯为底物,检测表达的羧酸酯酶活性为1.3nmol/100μL酶液。
- 张霞郭巍李国勋宋水山
- 关键词：甜菜夜蛾CDNA表达文库羧酸酯酶
- 甜菜夜蛾肠粘蛋白cDNA基因的分子克隆与序列分析被引量：15
- 2008年
- 【目的】围食膜(peritrophic membrane,PM)是衬托于昆虫中肠内的一种无脊椎动物特有的几丁质—蛋白复合结构,它能够促进食物消化,保护消化道免受微生物入侵。昆虫肠粘蛋白(ⅡM)是其重要组分之一。因此,作为中肠防御系统的PM已成为害虫生物防治的新靶标。分离和鉴定甜菜夜蛾肠粘蛋白基因cDNA。【方法】以甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)中肠为材料,依据stratagene公司试剂盒方法,构建甜菜夜蛾中肠cDNA表达文库。依据现代免疫学原理,利用粉纹夜蛾肠粘蛋白特异性多克隆抗体(anti-ⅡMantiserum)筛选该文库。【结果】cDNA表达文库滴度为8.51×106pfu/ml,重组率为99.97%。筛选文库得到一个编码甜菜夜蛾肠粘蛋白的cDNA克隆SeⅡM-8。核酸序列分析显示,该cDNA长为2234bp,在polyA末端上游24bp处有一个多聚腺苷酸信号序列AAATTA。最长读码框(ORF)编码714个氨基酸,与粘虫肠粘蛋白(Mamestra configurata intestinal mucin)序列相似性为42%。结构域分析表明,它具有5个几丁质结合功能域;一个富含苏氨酸类粘蛋白结构域,重复序列为TTTQAPTTT,高度O-联糖基化;一个天冬氨酸富集区,序列DDDKPGCNGNCPE重复达12次,该区域在已知的昆虫肠粘蛋白中属首次发现。与已知肠粘蛋白比较,推测其5′端还应包括信号肽序列和几丁质结合功能域的未知序列。SeⅡM-8基因在GenBank登录号为EU047712。【结论】从本研究构建的高质量甜菜夜蛾中肠cDNA表达文库中筛选得到一个新的围食膜蛋白基因SeⅡM-8。
- 张霞李国勋郭巍
- 关键词：甜菜夜蛾中肠CDNA表达文库
- 粉纹夜蛾细胞系的克隆株及其用途
- 本发明公开了粉纹夜蛾细胞系的克隆株及其用途。本发明细胞克隆株的微生物保藏号是：CCTCC C201046；本发明克隆株无紧密贴壁特性，在悬浮培养时不结成团，有利于病毒附着和侵染从而显著提高病毒及重组蛋白的产量，与野生型细...
- 李国勋李天龙姜磊马明李淑文吴艳蕾
- 文献传递
- 甘蓝夜蛾核型多角体病毒杀虫剂的制备及田间防治试验被引量：12
- 2000年
- 应用活体增殖病毒 ,制备甘蓝夜蛾核型多角体病毒杀虫剂乳剂 ,室内对 4龄甘蓝夜蛾幼虫的毒力测定 ,其LD50 为 9 4 2× 1 0 3 PIB/头。田间防治效果表明 ,采用 1 0× 1 0 11PIB/hm2 和 3 0× 1 0 11PIB/hm2 的剂量防治甘蓝夜蛾的效果都在 70 %以上。乳液的稳定性较好 。
- 李长友张履鸿李国勋郑桂玲宋捷许少甫高洪祥魏淳芳
- 关键词：甘蓝夜蛾核型多角体病毒杀虫剂
- Bt杀虫蛋白基因cry8Ea2的克隆、表达和活性被引量：8
- 2008年
- 根据已知Btcry8类基因的全长序列设计一对特异性引物JJX5和JJX3,以Bt菌株B-DLL的质粒DNA为模板扩增出3.5 kb大小的片段;将该片段插入大肠杆菌表达载体pET-21b中,并完成了该片段的全序列测定。该基因编码区为3 495 bp,编码的蛋白质由1 164个氨基酸残基组成,相对分子质量为131.8 kDa,等电点为pH 4.71,为弱酸性蛋白。该基因(GenBank:EU047597)编码的氨基酸序列与Cry8Ea1的氨基酸序列同源性高达99.31%,被国际Bt基因命名委员会正式命名为cry8Ea2。经IPTG诱导后该基因在大肠杆菌BL21(DE3)中能够正常表达130 kDa的蛋白,表达产物对暗黑鳃金龟、琉璃弧丽金龟和柳蓝叶甲具有活性,在浓度为8.98μg/g时对暗黑鳃金龟、琉璃弧丽金龟一龄幼虫14 d的校正死亡率分别为46.67%和55.56%;在浓度为89.8μg/mL时对柳蓝叶甲三龄幼虫96 h的校正死亡率为33.33%。
- 刘兴龙程林友李天龙李长友李国勋
- 关键词：BT基因克隆蛋白表达杀虫活性
- 粘虫核型多角体病毒感染特性的研究被引量：6
- 1997年
- 对东北农业大学昆虫学教研室分离出来的粘虫核型多角体病毒Ｖ－Ｍｓ－４毒株进行初步研究，结果表明，病毒多角体呈近圆形、四角形、六角形和不规则形，大小在１．１６～２．８６μｍ之间，病毒粒子为３８９～４６７μｍ×４０～６８μｍ，为多粒包埋，病毒在粘虫消化液作用下，１０ｍｉｎ失去折光性，３０ｍｉｎ内完全被溶解，释放出病毒粒子；消化液能使释放出的病毒粒子在１５ｍｉｎ内失活；寄主的脂肪、气管基质及表皮组织为感染病毒的敏感组织，感染后脂肪和血淋巴蛋白的含量比健康幼虫明显降低，未见病毒侵染中肠的现象。
- 赵奎军李国勋宋捷李长友滕春波
- 关键词：粘虫核型多角体病毒消化液
- 粘虫核型多角体病毒在同源寄主中肠内复制的测定
- 关于昆虫核型多角体病毒在鳞翅目寄主幼虫中肠细胞内复制的问题直接涉及病毒的致病机理,有关这方面的研究和报道很多,因所用寄主种类不同其结果颇不一致;我们利用显微技术和DNA杂交技术,测定粘虫核型多角体病毒(Mythimna ...
- 李国勋滕春波宋捷赵奎军
- 关键词：粘虫核型多角体病毒
- 文献传递
